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背景:BIGH3蛋白位于角膜上皮和基质层,在基质层高表达,先前研究已经发现BIGH3蛋白能促进角膜上皮创伤愈合,为此进一步探讨其对角膜基质创伤愈合的影响.目的:构建人BIGH3基因的原核表达载体,观察其对角膜细胞与细胞外基质黏附和迁移的作用.方法:PCR扩增BIGH3基因的ORF阅读框,并通过Kpn Ⅰ和Sal Ⅰ插入到原核表达载体pET32a(+)中.经PCR、酶切和序列测定方法鉴定重组质粒.将重组质粒转入BL21(DE3)表达,IPTG诱导表达人BIGH3融合蛋白,并进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测分析:以Ni-NTA树脂对蛋白纯化与复性,作用于体外培养的兔角膜细胞,用MTT法分析其对细胞与细胞外基质黏附的影响,采用改良的Boyden微孔膜双槽法观察BIGH3蛋白对角膜细胞迁移的影响.结果与结论:重组质粒经PCR、酶切与DNA测序证实插入了pET32a(+)载体中.通过IPTG诱导,成功的表达融合蛋白在包涵体中,经SDS-PAGE电泳分析,出现了一条新生的蛋白条带,Western blot也证实了该蛋白具有与BIGH3抗体特异性的结合能力.MTT法和Boyden微孔膜双槽法分别证明所表达的BIGH3融合蛋白可促兔角膜细胞黏附和迁移.成功构建了人BIGH3重组融合蛋白表达质粒,纯化了该基因的原核表达产物,并通过重组融合蛋白BIGH3能促进兔角膜细胞与细胞外基质黏附及迁移,而验证了重组BIGH3蛋白的活性. 相似文献
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目的对比格列吡嗪控释片与格列吡嗪片治疗2型糖尿病的临床疗效。方法选取2011年3月-2011年11月在我科治疗的154例2型糖尿病患者为研究对象,随机分为试验组(格列吡嗪控释片组)84例和对照组(格列吡嗪片组)70例,将治疗结束后两组患者空腹及餐后2小时血糖平均水平、餐后血糖水平大于11.1mmol/L的患者比例进行比较,然后进行统计学分析。结果试验组治疗结束后空腹血糖的平均水平为5.78±1.02mmol/L、餐后两小时血糖平均水平为6.89±1.13mmol/L;餐后血糖大于11.1mmol/L的患者比例为3.6%,均明显低于对照组,P均小于0.05。结论应用格列吡嗪控释片控制2型糖尿病患者血糖临床疗效优于格列吡嗪片,可以在临床推广。 相似文献
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目的:探讨梅毒母婴传播的预防措施及效果。方法50例妊娠梅毒患者随机分为观察组和对照组,各25例,观察组患者给予规范的抗梅毒治疗,对照组患者未采取任何预防措施。定期对患者做相应的梅毒病原体检查,观察两组患者接受治疗后的妊娠结局。结果采取规范的预防治疗后观察组新生儿的出生率为100%,其中有2例为早产儿,25例新生儿均未感染梅毒;未采取预防措施的对照组的新生儿的出生率为92%,其中有4例为早产儿,死胎的发生概率为8%,正常新生儿所占比例为68%,先天梅毒患儿6例(24%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对妊娠梅毒患者采取梅毒预防措施的效果显著,能够有效阻断梅毒的母婴传播,提高产科质量值得推广应用。 相似文献
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目的:探讨单纯125I粒子治疗后头颈部腺源性癌远处转移的一般规律。方法:2002年至2010年就诊于北京大学口腔医院口腔颌面外科的头颈部腺源性癌患者43例,因全身或局部因素不能进行手术切除,行单纯125I放射性粒子组织间植入治疗,肿瘤部位包括腮腺、颅底颞下窝、舌、上颌、咽旁、口底、颌下、唇。术后随访观察,统计局部控制率、生存率及远处转移情况。结果:远处转移率为53.5%(23/43);转移发生时间为5~96个月,平均时间(27.0±23.7)个月,中位时间21个月;肺为最常见转移部位(16/23,69.6%);远处转移常见病理类型为腺样囊性癌(14/23,60.9%)和非特异性腺癌(7/23,30.4%)。最终死亡26例,其中18例因转移而死亡,占所有死亡患者的69.2%(18/26)。27例获得了肿瘤完全消退(完全缓解,complete remission,CR),12例消退大于50%(部分缓解,partial remission,PR),2例消退小于50%,2例无效,有效率(CR+ PR)为90.7%。3年局部控制率和生存率分别为60.1%和82.6%,5年分别为53.4%和56.0%。结论:对于手术禁忌或无法切除的头颈部腺源性癌,单纯125I放射性粒子组织间植入可以取得良好的近期疗效,但远期疗效仍有待进一步观察。远处转移是治疗失败的主要原因,肺为最常见的部位。 相似文献
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重组腺病毒介导的sTLR2对LPS致炎小鼠抗炎效应的实验研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:观察携带Toll样受体2(TLR2)胞外区基因的重组腺病毒介导的sTLR2在小鼠体内的抗炎作用,为急性炎症反应的防治提供新的思路和治疗策略。方法:建立亚致死剂量脂多糖(LPS)所致炎症小鼠模型。将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、炎症对照组及重组腺病毒(Ad)TLR2实验组。AdTLR2于致炎前后,分别作用于小鼠,观察其对小鼠生存时间的影响,并应用ELISA对血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量进行检测,探讨AdTLR2对小鼠血清细胞因子水平变化的影响。结果:重组AdTLR2作用于炎症小鼠模型后,实验组小鼠的生存时间与炎症对照组比较相对延长,并且实验组中血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的水平均较炎症对照组显著降低(P0.05)。结论:重组AdTLR2能够使LPS所致炎症小鼠模型的生存时间相对延长,并能够降低炎症小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和IL-13的含量,提示AdTLR2在活体内可以分泌sTLR2蛋白发挥免疫调节作用并能降低血清中炎性细胞因子的水平,具有一定的抗炎作用。 相似文献
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目的 调查及分析包医一院住院患者抗生素使用情况.方法 选取2011年7月至2011年12月在包医一院住院的患者301例做为研究对象,回顾性分析所有患者的病例资料,调查抗生素使用率、使用率最高的抗生素种类、使用率最高的抗生素联用方案以及抗生素使用率最高的科室.结果 外科抗生素的使用率为93.2%,明显高于其他科室;头孢菌素类抗生素的使用率为81.0%,明显高于其他抗生素的使用率,以上比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 该医院各科室抗生素的使用率均高于国际制定的50%使用率标准,存在一定不合理性,尤其是外科患者,基本上全部给予抗生素治疗,应该加强抗生素的管理,降低抗生素滥用情况. 相似文献