经内镜颈前微创入路颈椎手术的解剖学研究

目的：研究经颈前路建立内镜微创入路的安全性、可行性及其对手术器械的要求。方法：使用Metrx椎间盘镜手术系统，共对5具C3-7椎体间的10个间隙进行内镜辅助下的颈椎前路减压操作。通过颈右前外侧约2cm的皮肤切口，经血管鞘与内脏鞘间放入直径18mm的工作套筒并将其通过可曲自由臂固定在手术床边。内镜固定在工作套筒上。在内镜辅助下行颈椎间盘切除及椎体后缘骨质刮除术。结果：未发现手术入路周围重要软组织结构的损伤；使用环锯、垂体钳、刮匙减压的5个间隙及单纯使用垂体钳、刮匙减压的5个间隙的间盘组织切除均较干净。由于工作套筒过长，垂体钳、刮匙等减压器械的可操作空间较小，环锯组椎体后缘有明显骨赘形成的6个椎体，3个发现有部分的骨赘被刮除，其余3个椎体的后缘骨赘无改变；单纯使用垂体钳、刮匙组，椎体后缘有明显骨赘形成的8个椎体仅3个发现有部分的骨赘被刮除，其余5个椎体的后缘骨赘无改变。未发现硬膜囊损伤。结论：内镜下的颈椎前路减压是可行的，工作套筒及用于减压的器械的有待改进。     

急诊病房住院患者临床特征及卫生经济学指标分析

目的探讨2668例急诊病房住院患者的临床病例特点,为急诊医护工作提供参考依据。方法选取2015年1月至2018年6月于宣武医院急诊科病房住院的2668例患者,回顾性地采集研究数据,包括性别、年龄、共病受累系统、住院费用、住院时间、住院前及出院前自理生活能力评分。结果1)男性患者入院平均年龄小于女性[(67.2±17.1)岁vs(70.7±17.2)岁](P<0.01)。2)2408例(90.25%)入院患者罹患3种以上共病,共病受累系统主要为呼吸、循环、内分泌。3)患者入院前生活能力评分显著低于出院前生活能力评分(69.42±25.09 vs 78.12±26.13)(P<0.001)。4)Barthel评分与住院时间、住院费用、白蛋白减低、贫血呈负相关。结论急诊病房病种复杂,涉及多学科多专业,病情危重多变,应在临床诊治和护理过程中给予综合、全面的评估,提高患者的治愈率。     

人组织激肽释放酶基因对2型糖尿病大鼠血压的影响及机制

目的：探讨人组织激肽释放酶（HK）基因对2型糖尿病大鼠血压的影响及其机制。方法:高脂高糖饮食加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病动物模型。以重组腺相关病毒为载体介导HK基因（HK组）或对照基因LacZ（LacZ组）在糖尿病大鼠体内表达，观察实验动物血压变化及离体主动脉对乙酰胆碱（Ach）依赖性血管舒张反应和一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、内皮素受体A（ETA-R）表达。 结果:(1) HK组第2周开始出现血压下降，并一直持续到实验结束（12周时），而LacZ组血压无明显下降。(2) LacZ组离体主动脉对乙酰胆碱（Ach）依赖性血管舒张反应明显低于HK组。(3) HK组大鼠主动脉NO2-/NO3-浓度明显高于LacZ组，而ET-1和ETA-R mRNA明显低于LacZ组。 结论:重组腺相关病毒介导HK基因表达明显降低2型糖尿病大鼠血压，改善内皮依赖性血管舒张功能，原因可能与增加动脉NO释放，减少ET-1和ETA-R的表达有关。     

颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定

目的:研究颅脑手术患者废弃脑组织中神经干细胞的培养与鉴定,为立体定向自体神经干细胞移植治疗脑出血、脑梗塞及颅脑损伤后遗症提供临床前基础。方法:通过改进原代培养方法,从颅脑手术患者废弃脑组织中培养和鉴定神经干细胞(NSCs)。收集颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织各约500 mg以上,按改良方法进行原代培养并传代,通过免疫荧光检测NSCs标志物巢蛋白(Nestin)的表达,传代培养5代时开始进行诱导分化。结果:培养约3～10 d后,多数患者废弃脑组织中均可见干细胞球生长,经Nestin免疫荧光检测均呈阳性表达。选取第6代诱导分化后的贴壁细胞分别经β-Tubulin(神经元标志物)、Sox10(少突胶质细胞标志物)与GFAP(星形胶质细胞标志物)免疫荧光检测,可见少量神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞阳性表达。取第3代与第6代细胞行免疫印迹鉴定,第3代细胞仅见Nestin与少量β-Tubulin表达,第6代细胞可见不同程度的Nestin、β-Tubulin、Sox10及GFAP等表达。结论:本研究成功从颅脑手术患者不同脑区废弃脑组织中分离培养获得成人NSCs,并可向神经元及神经胶质细胞分化,使立体定向自体神经干细胞移植促进神经功能修复从实验室到临床应用成为可能。     

人源腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段及其全抗体的研制

目的 运用噬菌体表面表达技术，获得基因工程抗腺病毒伴随病毒抗体Fab、IgG。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞。提取总RNA，逆转录cDNA，聚合酶链反应扩增人IgG Fab轻、重链基因，利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的腺病毒伴随病毒为固相抗原筛选抗体Fab段，并在E.coli中进行分泌性表达。通过ELISA和间接免疫荧光试验、筛选和鉴定Fab抗体，并进行序列测定。然后将其重链和轻链基因克隆到全抗体表达载体pAC-L-Fc上。转染昆虫sf-9细胞，利用杆状病毒，昆虫细胞系统实现全抗体的分泌型表达，免疫沉淀试验鉴定它的抗蛋白。结果 分离到一株Fab克隆AAVs-31，腺病毒伴随病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性，间接免疫荧光试验呈阳性，序列分析结果表明是一新的序列，所获得的基因为人源IgG Fab基因。由Gamma链和Kappa链组成。表达的全抗体ELISA反应、免疫荧光反应和间接免疫荧光试验均为阳性，免疫沉淀试验结果显示它结合病毒颗粒，不结合任一VP1、VP2、VP3单独衣鞘蛋白。结论 用噬菌体表面表达技术首次获得了抗腺病毒伴随病毒Ⅱ型单克隆抗体Fab段，并在真核系统中表达了其全抗体，它们识别的可能是衣鞘蛋白组装时形成的表位。     

经鼻内窥镜选择性鼻中隔粘膜下切除术

目的：探讨经鼻内窥镜选择性鼻中隔粘膜下切除术的意义及手术方法。方法：根据不同的手术目的对204例需要行鼻中隔手术的病人，经鼻内窥镜实施选择性鼻中隔粘膜下切除术。结果：采用该技术对单纯性鼻中隔偏曲患者手术临床治愈率100％，其手术有效治愈头痛、鼻阻及鼻出血等鼻中隔偏曲临床症状，达到临床治疗目的。未出现鼻腔粘连、鼻中隔穿孔等并发症。有2例形成鼻中隔血肿，经放置引流管处理后治愈。对于解除高位鼻中隔偏曲解剖异常引发的鼻窦炎，手术后效果良好。取鼻中隔软骨做为修补材料手术效果满意。结论：经鼻内镜选择性鼻中隔粘膜下切除术目的性强、方法灵活、创伤小、并发症少、手术效果确切。     

毛果芸香碱和布林佐胺滴眼液对兔眼表组织的影响

目的：探讨抗青光眼药物毛果芸香碱和布林佐胺滴眼液及各自的防腐剂三氯叔丁醇和氯化苯甲烃胺（BAC）对兔眼表组织的影响。方法:选取新西兰大白兔15只，分为正常对照组（3只）、毛果芸香碱组（A组，6只）和布林佐胺组（B组，6只）。用药组右眼使用青光眼药物毛果芸香碱或布林佐胺滴眼液，左眼使用对应的防腐剂三氯叔丁醇或BAC，连续用药30 d。取球结膜组织行苏木素－伊红（HE）染色计数结膜上皮层炎症细胞数；角膜行扫描电镜检测并进行上皮损害分级评分。结果:与正常对照组比较，布林佐胺滴眼液（P<0.01）和防腐剂BAC（P<0.01）导致球结膜上皮层炎症细胞浸润增多；毛果芸香碱滴眼液（P>0.05）和三氯叔丁醇（P>0.05）引起的球结膜炎症细胞增多不明显。布林佐胺滴眼液导致球结膜炎症细胞增加的程度较毛果芸香碱滴眼液严重（P<0.01）。青光眼药物和防腐剂均可导致兔角膜上皮超微结构的损伤，表现为角膜上皮细胞六边形结构变为不规则、边界不清、细胞膜皱缩、细胞间距增宽、上皮细胞表面的微绒毛丢失、细胞空洞和暗细胞增加。布林佐胺滴眼液和BAC引起的角膜损害较毛果芸香碱滴眼液（P<0.01）和三氯叔丁醇明显（P<0.05）。各组左右两眼的球结膜炎症细胞数和角膜损害评分均无显著差异。结论:布林佐胺滴眼液和防腐剂BAC使用1个月后可导致兔球结膜炎症细胞增加和角膜上皮细胞损伤，毛果芸香碱滴眼液和三氯叔丁醇主要引起角膜上皮超微结构的变化；防腐剂是引起眼表损伤的主要原因。布林佐胺滴眼液对兔眼表的损伤较毛果芸香碱滴眼液严重。     

神经调节素-1β对小鼠脑缺血再灌注损伤的干预作用及可能的机制

目的 研究神经调节素-1β(NRG-1β)对小鼠脑缺血再灌注后神经行为功能,脑梗死体积,脑组织含水量,神经细胞凋亡以及胶质细胞水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响和神经保护的作用机制.方法 应用线栓法建立小鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,经颈内动脉微量注射NRG-1β(2μg/kg)干预治疗,Bederson法评价动物的神经行为功能;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色,观察脑梗死体积;干湿重法测定脑组织含水量;免疫荧光染色检测神经细胞凋亡;免疫组织化学检测AQP-4的表达.结果 脑缺血再灌注损伤后,动物均表现神经行为功能障碍,缺血侧出现脑梗塞病灶,脑组织含水量、神经细胞凋亡数量和胶质细胞AQP-4表达均高于假手术组.与对照组相比较,NRG-1β治疗组缺血24h,动物神经行为功能损伤明显改善,凋亡神经细胞数明显减少,脑梗塞体积显著缩小(P<0.05);但脑组织含水量和AQP-4表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05).缺血再灌注22h、46h和70h组,上述5项指标较相应的对照组均有显著性差异(P<0.05).结论 NRC-1β可能通过下调脑缺血再灌注损伤诱导的胶质细胞AQP-4表达和抑制细胞凋亡,减轻脑水肿和缩小梗死体积,从而改善动物的神经行为功能.     

贵州省2012—2019年急性弛缓性麻痹病例监测分析

目的 分析贵州省2012—2019年急性弛缓性麻痹（acute flaccid paralysis,AFP）病例的流行病学特征,为开展AFP病例监测工作提供科学依据。方法 采用描述性流行病学方法对贵州省2012—2019年AFP病例监测数据进行分析。结果 贵州省2012—2019年共报告1 714例AFP病例,年均报告发病率为2.65例/10万,无明显季节性分布,男性发病率（3.14/10万）高于女性发病率（2.07/10万）,1～6岁儿童居多（55.43%）,以散居儿童（45.22%）和集体单位儿童（托幼机构、学校）（42.47%）为主;脊灰疫苗免疫史≥3剂次的病例占91.72%;AFP病例肠道病毒分离率为8.38%;27.48%的病例为短暂性肢体麻痹;16.45%的病例残留麻痹。结论 贵州省仍需保持AFP病例监测的高敏感性和及时性,保持常住儿童脊灰疫苗高覆盖率,提高流动儿童接种率,筑牢免疫屏障。随访时加强健康教育,促进病例肌力恢复,提高生存质量,保护成年后劳动生产力。     

人腺病毒55型致成人肺炎的临床特征及外周血淋巴细胞亚群分析

 目的 分析人腺病毒55型（HAdV55型）肺炎成年患者的临床及外周血淋巴细胞亚群特征。方法 回顾性纳入2016年12月—2018年5月某院收治的132例成人HAdV55型感染患者,包括38例肺炎患者（肺炎组）和94例上呼吸道感染患者（上感组）,比较两组患者的临床及影像学特征。应用流式细胞仪分析肺炎（31例）、上感患者（38例）及健康对照（10例）外周血淋巴细胞亚群分布,动态观察肺炎（5例）和上感患者（3例）外周血T淋巴细胞亚群变化。结果 与上感组比较,肺炎组患者咳痰比例更高,发热日数和住院时间更长,外周血白细胞和中性粒细胞计数降低,淋巴细胞比例和绝对计数升高（均P<0.05）,胸部CT显示肺部病变主要集中于右肺（21/38,55.3%）。淋巴细胞亚群分析表明,肺炎患者CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、NK细胞和B细胞比例均高于健康对照,与上感组患者比较,差异无统计学意义（P>0.05）。T淋巴细胞亚群动态分析显示,5例肺炎患者病程第3天CD3⁺T淋巴细胞计数降低,后逐渐升高,第18天恢复正常。结论 HAdV55型成人肺炎患者咳痰较上呼吸道感染常见,右肺容易受累,宿主细胞免疫功能紊乱,动态监测外周血淋巴细胞亚群有助于评估病情。