尿液基细胞学和核基质蛋白22对膀胱癌诊断的临床价值

目的 探讨尿液基细胞学和核基质蛋白22（nuclear matrix protein22,NMP22）对膀胱癌诊断的临床价值.方法 对208例膀胱癌疑似患者的尿液进行液基细胞学检查,对42例膀胱癌疑似患者的尿液进行NMP22检测,同时,将两种方法结果与组织病理学诊断结果对照,评估它们对膀胱癌的临床诊断价值.结果 尿液基细胞学和NMP22的敏感度分别为71.6%和80%,特异度分别为99.3%和72.7%,阳性预测值分别为97.7%和72.3%,阴性预测值分别为89.6%和80%.结论 在膀胱癌临床诊断中,尿液基细胞学是一种无创伤性、特异度高、阳性预测值好的诊断方法,液基细胞学与核基质蛋白22联合可提高对膀胱癌诊断的敏感度.     

尿液基细胞学和核基质蛋白22对膀胱癌诊断的临床价值

目的探讨尿液基细胞学和核基质蛋白22(Nuclear matrix protein22,NMP22)对膀胱癌诊断的临床价值。方法对208例膀胱癌疑似患者的尿液进行液基细胞学检查,对42例膀胱癌疑似患者的尿液进行NMP22检测,同时,将两种方法结果与组织病理学诊断结果对照,评估它们对膀胱癌的临床诊断价值。结果尿液基细胞学和NMP22的敏感度分别为71.6%和80%,特异度分别为99.3%和72.7%,阳性预测值分别为97.7%和72.3%,阴性预测值分别为89.6%和80%。结论在膀胱癌临床诊断中,尿液基细胞学是一种无创伤性、特异度高、阳性预测值好的诊断方法,液基细胞学与核基质蛋白22联合可提高对膀胱癌诊断的敏感度。     

沉默BIRC7基因的Jurkat稳定细胞系建立

 【目的】 通过RNA干扰技术(RNAi)建立稳定性BIRC7基因沉默的Jurkat实验细胞模型。 【方法】应用pSilencer 4.1-CMV neo 构建BIRC7 shRNA 表达载体，采用脂质体将载体导入Jurkat 细胞，利用G418筛选出稳定表达shRNA 细胞后，行RT-PCR 和Western blot 等技术检测细胞BIRC7表达水平。 【结果】成功筛选出分别携带二种重组shRNA表达的Jurkat细胞系。与对照组细胞相比，转染BIRC7 shRNA的细胞BIRC7 mRNA表达下降约＞70％，BIRC7蛋白表达减少＞60％。生长曲线显示生长速度减慢，细胞倍增时间延长。细胞凋亡率增加。【结论】稳定转染重组BIRC7 shRNA表达载体能有效干扰BIRC7基因表达，表明RNAi技术可以成为研究BIRC7基因功能的有效工具。BIRC7有可能成为白血病治疗的潜在新靶点。     

沉默BIRC7基因的Jurkat稳定细胞系建立

【目的】通过RNA干扰技术（RNAi）建立稳定性BIRC7基因沉默的Jurkat实验细胞模型。【方法】应用pSilencer4．1-CMVneo构建BIRC7shRNA表达载体，采用脂质体将载体导人Jurkat细胞，利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后，行RT-PCR和Westernblot等技术检测细胞BIRC7表达水平。【结果】成功筛选出分别携带二种重组shRNA表达的Jurkat细胞系。与对照组细胞相比，转染BIRC7 shRNA的细胞BIRC7 mRNA表达下降约〉70％，BIRC7蛋白表达减少〉60％。生长曲线显示生长速度减慢，细胞倍增时间延长，细胞凋亡率增加。【结论】稳定转染重组BIRC7 shRNA表达载体能有效干扰BIRC7基因表达，表明RNAi技术可以成为研究BIRC7基因功能的有效工具。BIRC7有可能成为T-淋巴母细胞性白血病／淋巴瘤治疗的潜在新靶点。     

短发夹RNA诱导survivin基因缄默对Jurkat细胞凋亡和增殖的影响

目的研究应用载体表达短发夹 RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰技术抑制人 T 淋巴细胞白血病细胞株 Jurkat 细胞 survivin 基因的表达,探讨 survivin 基因表达缄默对 Jurkat 细胞凋亡和增殖的影响。方法构建针对 survivin 基因的 shRNA 重组质粒并转染至 Jurkat 细胞,分别用多重 PCR和 Western blot 法检测瞬时转染和稳定转染细胞 survivin 基因 mRNA 和蛋白表达水平的变化;流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞凋亡指数的变化,绘制细胞生长曲线,探讨 survivin shRNA 转染对细胞生长和增殖的影响。结果多重 PCR 结果示与无功能(对照组)shRNA 处理组和磷酸盐缓冲液处理组比较,survivin shRNA 瞬时转染和稳定转染细胞 surivivin 基因 mRNA 表达均显著下降,抑制率分别为66.675% 和60.69%(P<0.05);Western blot 结果显示 survivin shRNA 瞬时转染和稳定转染细胞survivin 蛋白表达水平亦显著降低,抑制率分别为63.41% 和60.18%(P<0.05)。流式细胞术检测瞬时转染和稳定转染细胞的凋亡率显著增加,分别为(22.41±2.83)% 和(20.73±2.56)%(与对照组比较,P均<0.05),细胞倍增时间显著延长。生长曲线显示稳定转染细胞的生长显著减慢。结论shRNA 重组质粒介导的 RNA 干扰能明显抑制 Jurkat 细胞 survivin 基因 mRNA 和蛋白产物的表达,诱导细胞凋亡和生长抑制。     

液基细胞学结合分子生物学对膀胱癌诊断的价值

目的探讨液基细胞学、液基细胞学联合免疫细胞化学标记物角蛋白20（CK20）、核基质蛋白22（NMP22）检测对膀胱癌诊断的价值。方法对208例膀胱癌疑似患者的尿液进行液基细胞学检查,对46例有非典型尿路上皮细胞的膀胱癌疑似患者涂片同时进行免疫细胞化学标记物CK20检测,对42例膀胱癌疑似患者的尿液进行NMP22检测,将它们的结果与组织病理学诊断结果对比,评估它们对膀胱癌的临床诊断价值。结果液基细胞学、液基细胞学联合CK20或NMP22的检测敏感度分别为71.6%、83.3%、80%,特异度分别为99.3%、75%、72.7%,阳性预测值分别为97.7%、86.2%、72.3%,阴性预测值分别为89.6%、70.6%、80%。结论在膀胱癌临床诊断中,尿液基细胞学是一种无创伤性、特异度高、阳性预测值好的诊断方法。液基细胞学与免疫细胞化学结合或与NMP22结合可提高对膀胱癌诊断的敏感度。     

液基细胞学与免疫细胞化学对膀胱癌诊断价值的比较

[摘要] 目的 探讨液基细胞学与液基细胞学联合免疫细胞化学标记物角蛋白20（cytokeratin 20，CK20）对膀胱癌诊断中的临床价值。方法 对208例膀胱癌疑似患者的尿液进行液基细胞学检查，对46例有非典型尿路上皮细胞的膀胱癌疑似患者涂片同时进行免疫细胞化学标记物CK20检测，将两种方法结果与组织病理学诊断结果对照，评估它们对膀胱癌的临床诊断价值。结果 液基细胞学和免疫细胞化学的敏感度分别为71.6%、83.3%，特异度分别为99.3%、75%，阳性预测值分别为97.7%、86.2%，阴性预测值分别为89.6%、70.6%。结论 在膀胱癌临床诊断中，尿液基细胞学是一种无创伤性的特异度高、阳性预测值好的诊断方法。液基细胞学与免疫细胞化学结合可提对高膀胱癌诊断的敏感度。     

非霍奇金淋巴瘤中p53、MDM-2和p21表达的意义

目的研究非霍奇金淋巴瘤(NHL)中p53、MDM-2和p21表达及联合表达的情况,探讨它们在NHL发生发展中的作用和在临床病理诊断工作中的应用价值。方法应用组织芯片、免疫组化及原位凋亡检测等技术对190例NHL中p53、MDM-2、p21和Ki-67的表达以及凋亡进行检测并统计分析。结果 (1)p53、MDM-2和p21在B-NHL中的阳性表达率分别为36.00%、8.00%和17.33%,在T/NK-NHL中的阳性表达率分别为40.00%、18.55%和24.35%;(2)MDM-2主要在侵袭性较高的NHL中表达,p53+/MDM-2+表型的NHL具有较高增殖指数,其中9例ALCL有5例为ALK阴性;(3)p53与p21阳性表达在T/NK-NHL中显著正相关(P=0.010)。结论 (1)MDM-2表达可能参与恶性程度较高类型NHL的发生发展;(2)p53+/MDM-2+和p53+/p21+表型可能与侵袭性较高NHL的高度恶性、侵袭性及不良预后相关。     

金樱子水-醇提取物保护IgA肾炎肾脏功能的实验研究

目的探索金樱子（RLM）水醇提取物对实验性IgA肾炎大鼠肾脏功能的保护作用。方法建立IgA肾炎大鼠模型，将36只动物随机分成正常组、模型组和RLM治疗组，采用放免法检测肾组织匀浆中TXB2和6K—PGF1α的含量及血清尿素氮、血清肌酐含量。结果TXB2与6K—PGF1α在3组中的比值分别为0．937，1．314，0．694，与模型组相比较，RLM治疗组TXB2表达含量下降，6K—PGF1α表达含量升高（P〈0．05），血清尿素和肌酐清除率增加。结论RLM可以通过调节TXB2与6K—PGF1α的平衡，增加血清尿素和肌酐清除率达到保护肾功能的作用。     

RNA干扰致基因表达沉默细胞模型的建立

目的探讨siRNA和shRNA在基因功能研究中的应用。方法用化学方法合成siRNA,以及用常规的分子克隆方法构建shRNA表达载体。以人类K562细胞为实验对象,采用lipofectamine将MDM2基因的siRNA和shRAN表达载体导入细胞后,用多重RT鄄PCR和Westernblot检测目标基因MDM2的表达水平。结果K562细胞瞬时转染MDM2siRNA48h后,MDM2蛋白质表达下降超过60%;稳定转染shRNA表达载体后,MDM2基因在mRNA和蛋白质表达水平下降超过70%。实验结果表明成功地建立了MDM2表达下调的实验细胞模型。结论siRNA和shRNA都能有效地导致目标基因表达沉默,在基因功能研究中瞬时转染和稳定转染需要配合使用以获得更理想的实验结果。