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在3个中国婴儿型黑蒙性痴呆(Tay-Sachsdisease,TSD)家庭中鉴定了3种突变等位基因,这3家无血缘关系,也无亲近婚配。其中两种突变等位基因是新的,第三种则为曾报道过的突变(G1444A)。家庭1,DNA经PCR体外扩增后直接测序,发现为HEXA基因第5外显子的第547核苷酸处插入一个腺嘌呤所造成的移码突变,导致插入部位下游6bP处提前出现终止密码。用等位基因特异性寡核苷酸(ASO)杂交证明先证者为突变基因纯合子。家庭2,用单链构象多态性(SSCP)分析及将扩增的第13外显子直接测序,发现为第1453核苷酸T转换为C,造成第485位色氨酸为精氨酸取代,以T1453C(excon13)/W485R表示之(W代表色氨酸,R代表精氨酸)。此突变造成了一个Fnu4H1酶切位点。患儿则为此等位基因的纯合子。当T1453C定向致突变的αcDNA在COS-1细胞中表达时,未能测出氨基已糖苷酶(Hex)S的活性。家庭3的突变为第13外显子的1444核苷酸G转换为A,造成第482位谷氨酸为赖氨酸取代,以G1444A(exonl3)/E482K表示之(E代表谷氨酸,K代表赖氨酸)。此突变发生于一个GpG二核苷酸,以 相似文献
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从蝮蛇毒中提取磷酸二酯酶,用此酶免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Fo融合,以间接ELISA检测杂交瘤细胞培养上清液和小鼠腹水中的特异性抗体,其效价分别为1∶128和1∶51 200.抗原阻断试验结果表明,此抗体对蛇毒磷酸二酯酶具有特异性.该杂交瘤细胞株定为G_8,该株单抗属鼠IgG_(2a)亚型,经体外持续培养6个月,其分泌抗体性能稳定. 相似文献
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以Alcl3-滤膜洗脱法、Al2(SO4)3-滤膜洗脱法及Alcl3沉淀法浓缩实验性污染水样中的病毒,并以单层细胞病变法检测病毒,3法的病毒平均回收率分别为36.43%、50.53%和21.82%,并以第二法和第三法检测黄浦江水中的病毒,40价水样有8份检测出CoxB5病毒、ECHO4和ECHO12病毒共9株,文中叙述了所用方法的优点。 相似文献
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