人CCAAT增强子结合蛋白α基因影响骨肉瘤细胞生长活性研究

目的：构建带Myc(pXJ-40)标签的CCAAT增强子结合蛋白α(CCAATenhancerbindingproteinα,C/EBPα)的真核表达载体,并检测其对骨肉瘤细胞生长的影响。方法应用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR )技术从人乳腺文库中扩增出C/EBPα全长编码区基因;将扩增基因克隆到Myc载体中,并将重组质粒转染人胚胎肾293T细胞;Western blotting检测表达情况;另将重组Myc-C/EBPα质粒转染人骨肉瘤细胞系U2OS (实验组)、Myc空载体质粒转染U2OS细胞(对照组),生长实验检测C/EBPα对肿瘤细胞生长的影响。结果成功构建Myc-C/EBPα真核表达质粒,重组质粒转染人胚胎肾293T细胞后成功表达。生长实验显示Myc-C/EBPα转染的U2OS细胞的生长明显受限,随着培养时间延长,受抑制的程度逐渐增大,培养至第5天,Myc-C/EBPα转染的实验组细胞生长抑制率为58%,且细胞的生长速率OD＝0.495明显低于空白对照组1.179,差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 C/EBPα对骨肉瘤细胞的生长具有抑制作用。     

人组蛋白H3真核表达载体的构建及功能初步检测

目的构建带myc标签的人组蛋白H3基因真核表达载体,获得Myc-H3融合表达蛋白,并对其功能进行初步检测。方法采用PCR技术从乳腺文库中扩增人H3基因编码序列,将其正确插入pXJ-40-myc载体,重组质粒转染人胚肾293T细胞,Western blot法检测融合蛋白表达,通过免疫共沉淀技术检测融合蛋白与已知结合蛋白组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶(LSD1)和组蛋白甲基转移酶(EZH2)的相互作用。结果构建得到组蛋白H3基因的真核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;经Western blot法检测,融合蛋白成功表达;免疫共沉淀检测证实Myc-H3融合蛋白可以和已知相互作用蛋白LSD1及EZH2相互作用。结论成功构建组蛋白H3真核表达载体,该融合蛋白正确表达。     

热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(CHIP)对HER2的降解作用

<正>热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白(carboxylterminus of the Hsp70 interacting protein,CHIP)是Ballinger等[1]发现的同时具有辅助伴侣分子和E3泛素连接酶活性的特殊蛋白分子。作为辅助伴侣分子,它与Hsp90和Hsc/Hsp70相互作用,调节Hsp介导的蛋白质的异常折叠;而作为E3泛素连接酶,通过     

家属参与健康教育在40例精神分裂症患者中的效果分析

健康教育是疾病治疗的重要组成部分.由于精神分裂症患者的病残率高,复发率高,对其进行针对性健康教育,可改善患者的家庭和社会支持系统,减少疾病的复发,促进其心理社会功能的恢复.研究表明,健康教育能使人们在面临促进健康和疾病预防、治疗、康复等各个层次的健康问题时,有能力做出行为抉择,消除或减轻影响健康的危险因素,自愿采取有利于健康的行为和生活方式以促进健康和提高生活质量.     

结缔组织生长因子在雌激素信号通路参与肝纤维化发生中的作用

临床流行病学资料显示肝纤维的发生存在有显著性别差异.研究证实,雌激素通过雌激素受体信号通路直接参与调控肝纤维化的发生.结缔组织生长因子是一种重要的肝纤维化发生相关细胞生长因子,其可能作为雌激素受体共调节因子,直接调控肝纤维化的发生.     

急性胆管炎患者经鼻胆管引流或放置支架内镜下胆管引流

背景与目的:内镜胆管引流是一种常规的治疗急性胆管炎的方法。本文比较了急性胆管炎患者在胆管引流时放置鼻胆管引流(NBD)和放置支架的安全性和功效。患者与方法:150例需行内镜下胆管引流的重症胆管炎患者纳入本研究。在内镜下,患者被随机放置7-钫NBD或7-钫直翼支架。评估结果包括与内镜下逆行胰胆管造影(ER CP)相关的并发症以及临床结果。结果:150例患者中,75例被随机分到N BD组,75例分到支架组。胆汁阻塞最常见的原因是普通的胆管结石(n=102)和胰胆管恶性病变(n=37)。研究发现无论在NBD组(n=58)还是在支架组(n=59),胆管阻塞的部位…     

siRNA抑制ErbB2基因的表达及对乳腺癌细胞生长的影响

目的:设计并构建ErbB2的小干扰RNA,检测其对ErbB2蛋白表达的干扰效果,并检测其对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法:设计2条针对ErbB2的siRNA,并克隆到siRNA表达载体pSliencer 2.1-U6 neo上。经酶切和测序证明构建成功后,将其与pcDNA3-FLAG-ErbB2共转染于293T细胞,以及单转siRNA于乳腺癌SKBR3和ZR75-1细胞,通过Western blot分别检测siRNA对外源和内源ErbB2的干扰效果。通过结晶紫实验研究siRNA对ZR75-1生长的影响。结果:Western blot证明构建的两条ErbB2 siRNA均能有效抑制外源和内源ErbB2蛋白的表达,并抑制乳腺癌ZR75-1细胞的生长。结论:构建的siRNA能有效地抑制ErbB2蛋白的表达并抑制ZR75-1细胞的生长。     

内镜下氩离子修复胆道和胃肠道金属支架

背景与目的:本研究旨在评估氩离子修复胃肠道和胆道金属支架的可行性及其功效。患者与方法:共31例患者接受了氩离子修复体内的金属支架(女性14例,男性17例;平均73±12.2岁,极差46～96岁)。其中24例患者的有包膜或无包膜的U nistep W allstents支架放置在胆管(13例患有胰腺肿瘤,5例患有Vater壶腹周围癌,5例患有胆管癌,1例患有慢性钙化型胰腺炎);3例患者体内有无包膜的肠Unistep W allstents支架置于幽门十二指肠处;2例梗阻性结肠直肠癌患者体内置入无包膜的巴德记忆金属支架;2例食管癌患者的体内置入无包膜的U ltraflex支架。内镜下修复支…     

MicroRNA-155靶向的放射性标记探针对乳腺癌小鼠模型的活体显像

目的：microRNA-155（miR-155）显著高表达于乳腺癌、肺癌、肝癌等多种恶性肿瘤,本研究旨在构建靶向miR-155的放射性示踪探针对乳腺肿瘤的活体显像。方法：体外化学合成靶向miR-155的反义互补寡核苷酸探针（AMO-155）,并对其进行5′端乙酰基修饰及2′ 甲氧基修饰,进而与双功能螯合剂NHS MAG3偶联后,在氯化亚锡的还原作用下对其标记 99mTc,评价血清稳定性,并对乳腺癌荷瘤裸鼠进行活体显像,对比反义、无义及阻断组的显像差异,并通过实时定量PCR（quantitative real-time PCR, qRT-PCR）鉴定肿瘤的miR-155水平。结果：99mTc-AMO-155的制备标记率达97%（n=5）,放射化学纯度大于98%（n=5）,放射比活度约为3.75 GBq/μg。通过对比无义对照组及阻断组,99mTc-AMO-155能够在活体水平特异性地显示miR-155高表达的恶性肿瘤。此外,针对miR-155不同表达水平的肿瘤,99mTc-AMO-155亦可在活体水平反映其表达差异。结论：经化学修饰的99mTc标记的AMO-155探针具有良好的血清稳定性及活体肿瘤靶向识别作用,为肿瘤显像提供了潜在的新型探针。