超声内镜引导下细针穿刺活检用于探明结肠和直肠黏膜下和黏膜外肿块

背景和目的:据报道,超声内镜引导下细针穿刺活检(EUS-FNA)对于胃肠道及胰腺的黏膜下或黏膜外病变是一种有效的组织学诊断技术。本研究旨在评估EUS-FNA用于诊断位于或临近结肠和直肠肠壁病变的价值。患者与方法:共22例病变位于或临近结肠或直肠肠壁的患者接受了EUS-FN A检查。患者被分为两组:一组患者曾患恶性肿瘤(前阳性组,n=11);另一组患者未曾患恶性肿瘤(前阴性组,n=11)。对于4例病变位于乙状结肠近端的患者,采用导丝和外套管进行EUS-FNA。研究评价了EUS-FNA对于取得充足组织样本及检测恶性和良性肿块的成功率,并且将其检测成…     

多聚抗原肽免疫磁珠在制备单表位抗体中的应用

目的： 建立用多聚抗原肽（multiple antigen peptides, MAP）包被磁珠制备单表位抗体的方法.方法： 通过Fmoc法固相化学合成UreB的8分支单表位MAP, 将其作为免疫原免疫小鼠, 获得多克隆抗血清.将MAP以共价偶联的方式包被磁珠制备免疫磁珠（immunomagnetic beads, IB）, 通过IB从多克隆抗血清中纯化单表位抗体, 荧光偏振（fluorescence polarization, FP）法鉴定抗体的特异性, SDS-PAGE鉴定抗体纯度, 紫外分光光度法测定其回收率.结果： 合成的MAP具有较强的免疫原性, 免疫小鼠后得到的抗体滴度高达1∶ 12 800.MAP制备免疫磁珠的最佳包被浓度为100 mg/L, 包被效率最高可达79%.应用MAP免疫磁珠从抗血清中纯化得到的单表位抗体, 经鉴定与其他抗原表位无反应性, 其纯度为95%, 抗体的回收率为5.8%.结论： MAP包被的磁珠可快速分离纯化出针对某一抗原表位的特异性抗体, 其性质类似单克隆抗体.这一方案在快速制备少量高特异性抗体中具有广阔的应用前景.     

内镜下十二指肠腺瘤套扎切除术随访

背景与目的:一般认为十二指肠息肉癌变少见。常有局部切除后息肉复发的报道,因此许多学者提出外科根除这些肿瘤的治疗手段。本研究旨在确定内镜下十二指肠腺瘤切除术的远期效果。患者与方法:在1990年1月至2003年4月期间,回顾性分析了一组患有非壶腹十二指肠绒毛肿瘤但无息肉综合征的患者。结果:研究期间,21例患者在常规内镜检查时发现十二指肠息肉。在总共20例十二指肠腺瘤患者中,18例(男性6例,女性12例;平均年龄67岁,极差50～81岁)被纳入本次研究。肿块为27.5±12m m(极差8～50m m)。在这20例肿瘤患者中,18例为混合型,1例为管状,还有1例为…     

带myc标签的人HER2基因真核表达载体的构建及其生物学功能

目的构建人类HER2基因的真核表达载体,并对其促进乳腺癌细胞增殖效果及靶向药物敏感性进行验证。方法采用PCR技术扩增出HER2基因,将其插入到pXJ-40-myc载体中,酶切和测序验证后,将其转染到乳腺癌ZR75-1细胞中,Western blot法检测其表达情况;CCK8法测定细胞生长曲线;加入靶向药物曲妥珠单克隆抗体后,观察转染细胞对药物的反应。结果酶切和测序结果证实表达质粒构建成功;Western blot法结果显示,myc-HER2蛋白在转染细胞中成功表达;转染myc-HER2的乳腺癌细胞较空载体细胞生长较快;加入曲妥珠单克隆抗体后,转染myc-HER2的细胞生长明显受到抑制。结论成功构建了带myc标签的HER2基因真核表达载体,为进一步研究曲妥珠单抗的耐药奠定了实验基础。     

人FHL1各LIM结构域融合蛋白的原核表达、纯化及活性检测

目的构建人FHL1各LIM结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4融合蛋白,并对其活性进行检测。方法用PCR法从FHL1真核表达载体中扩增FHL1的LIM1/2、LIM1、LIM2、LIM3和LIM4基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体,重组质粒转化大肠杆菌Rossate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用Western blot法检测融合蛋白表达,通过GST pull-down技术检测纯化蛋白与已知结合蛋白雌激素受体α(ERα)的相互作用。结果构建得到FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;在Rossate菌中诱导表达出与预期大小相符的目的蛋白,经Western blot法检测,融合蛋白成功表达;纯化得到GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4五个融合蛋白,GST pull-down证明FHL1全长以及FHL1-LIM1/2、-LIM2蛋白可以和ERα相互作用。结论成功克隆FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因,并获得了活性良好的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4蛋白,为研究FHL1在乳腺癌中的作用奠定了实验基础。     

超声内镜辅助集合技术用于慢性梗阻性胰腺炎的胰管引流

由慢性胰腺炎引起胰管机械性梗阻的患者,可发生反复发作性疼痛和胰腺炎。本文报道了一种利用超声内镜(EUS)辅助集合技术的新方法,该技术可使得起初行内镜逆行胰胆管造影(ERCP)时经乳头引流失败的患者,得以实现胰管引流。在EUS引导下,使用19号针施行经胃胰管穿刺,将一根0.035英寸的导丝导入胰管内,并通过乳头。利用侧视十二指肠镜将这根导丝拉入十二指肠内。利用常规技术行乳头切除,并行可塑性修复。患者的耐受性较好,且无更多并发症发生。利用集合技术的EUS辅助胰管引流术,对于有慢性胰腺炎症状且无法经乳头插管的患者而言,是一种较好…     

放射性标记的端粒酶靶向RNA探针在肝肿瘤细胞中的摄取研究

[目的]探讨99mTc标记的端粒酶靶向小干扰RNA（siRNA）在肝肿瘤细胞中的摄取情况,以期将来用于体内肿瘤显像。[方法]通过双功能螯合剂用99mTc标记hTERT靶向和对照siRNA探针,测定6h内血清放化纯,比较脂质体转染和非转染条件下两组的HepG2细胞摄取率。[结果]99mTc标记的siRNA在室温和37℃条件下具有很好的血清稳定性（放化纯〉94%）。实验与对照组探针的HepG2细胞摄取率均随着时间延长不断增加,且在脂质体转染条件下的细胞摄取较非转染高。[结论]hTERT靶向siRNA标记探针的血清稳定性高且可被肿瘤细胞特异摄取,具有潜在的体内肿瘤显像的应用价值。     

放射诱导基因Gadd 45在健康人群中表达水平的 检测及其意义

目的 考察Gadd 45基因在健康人群个体间表达的差异,评估Gadd 45发展成为一种新的辐射生物剂量计的可行性。方法 采集20例健康献血员血液样本,提取白细胞RNA进行反转录,以β-actin作为内对照基因,建立实时定量聚合酶链式反应(PCR)方法,并以此方法探讨人群中Gadd 45基因表达水平的差异。结果 20例受试者血液标本中的Gadd 45表达水平之间存在较大差异,且其表达水平与性别无关。结论 放射诱导基因Gadd 45的表达可能不适合做生物剂量计。     

功能训练对住院精神分裂症患者社会功能及生活质量的影响

精神分裂症是一种病情反复、迁延难治的重性精神病.长期靠抗精神病药物控制的精神分裂症患者都残留着社会功能障碍,有研究显示这是影响其预后的主要因素[1].也有研究显示,长期住院会导致患者明显的社会功能缺陷,影响患者的生活能力、个人卫生能力及缺乏社会兴趣等社会功能[2].