肾移植受者早期尿TGF-β1对远期肾功能影响的临床研究

目的探讨肾移植受者术后早期尿中转化生长因子β1(TGF-β1)浓度与远期肾功能的关系。方法2000年3月~2003年3月期间,对肾移植术后满1年、肾功能正常的患者检测血、尿TGF-β1浓度,并对上述患者进行至少3年的随访,对随访期内肾功能不全的患者通过活检明确是否为慢性移植肾肾病(CAN)。比较术后1年时不同尿TGF-β1浓度患者在3年随访期内肌酐清除率(Ccr)减损量;比较在随访期内诊断为CAN的患者与非CAN患者在肾移植1年时的血、尿TGF-β1浓度。结果共有267例患者完成了为期3年的全程随访,上述患者术后1年时尿TGF-β1浓度为:135.1~442.8pg/mg.Cr,其中尿TGF-β1浓度高的患者在3年随访期内Ccr减损量明显大于尿TGF-β1浓度低的患者(P<0.01);非CAN与CAN患者在肾移植1年时,尿TGF-β1相对浓度分别为(182.4±42.5)pg/mg.Cr、(395.5±32.7)pg/mg.Cr,二者比较差异有统计学意义,P<0.01,血TGF-β1浓度分别为(32.0±4.9)ng/ml、(31.9±4.8)ng/ml,二者比较差异无统计学意义,P>0.05。结论肾移植后早期检测尿TGF-β1对远期肾功能具有一定的预测作用。TGF-β1可能在CAN的发生过程中起着重要的作用。     

供体树突状细胞与脾细胞介导肾移植受体淋巴细胞反应的比较

目的探讨用供体骨髓源性树突状细胞(dendritic cells,DC)介导肾移植受体淋巴细胞反应的可行性。方法肾移植前分别取供体骨髓和脾脏(n=13),分离单个核细胞,液氮冻存备用;术后1、3、6、9个月以冻存的骨髓细胞分离CD34 细胞培养DC并复苏脾细胞分别作为刺激细胞,观察活细胞比率,健康志愿者以及受体淋巴细胞对DC和脾细胞刺激的反应。结果与术前相比,随术后时间延长,脾细胞中活细胞比率呈进行性降低(94%~14.8%),各组DC活细胞比率为92.2%~95.3%;健康志愿者以及受体淋巴细胞对脾细胞刺激的反应均进行性降低,健康志愿者淋巴细胞对DC刺激的反应波动在稳定水平(13 870±1 461~14 303±1 794,P>0.05),受体淋巴细胞对DC刺激的反应波动在13 650±1 678~7 796±1 083。结论供体骨髓源性DC具有稳定的细胞活力和刺激能力,作为术后长时间内介导肾移植受体淋巴细胞反应的刺激原,明显优于供体脾细胞。     

肾移植患者神经钙蛋白阻滞药的肾毒性

目的:了解减少或停用神经钙蛋白阻滞药能否改善肾移植后慢性移植物肾病患者的肾功能.方法:1999年1月～2001年5月期间,对病理诊断为慢性移植物肾病(Ⅰ级)肾功不全的93例肾移植患者随机分为A、B两组,A组(50例):在1～2周内将其神经钙蛋白阻滞药(环孢素或他克莫司)减少至原剂量的三分之一或完全停用,同时适当增加硫唑嘌呤或霉酚酸脂的用量;B组(43例):环孢素A或他克莫司未作大幅度减量、而是仅适当增加硫唑嘌呤或霉酚酸脂的用量.对两组患者进行至少3年的随访,比较其移植肾功能、观察两组急性排斥反应有无差异等.结果:3年后A组有31例(62.0%)患者移植肾功能得以好转或不再继续恶化,而B组除4例(9.3%)移植肾功能维持在原有水平外,其他患者肾功能均进行性恶化;3年后A组肾功能明显好于B组;B组3年后尿蛋白定量明显增多,而A组无明显改变;两组急性排斥反应发生率无显著差异.结论:大幅度减少甚至停用神经钙蛋白阻滞药可使部分肾移植后慢性移植物肾病患者的肾功能得以改善或者阻止其进行性恶化.这种药物调整是安全的.     

大鼠肾移植三种尿路重建术式的比较

目的 对大鼠肾移植3种尿路重建术式进行比较,筛选出稳定性好、并发症少的手术方案.方法 以3种术式进行大鼠同系肾移植尿路重建:A组,供/受体输尿管端端吻合术(n=14);B组,供体膀胱瓣-受体膀胱吻合术(n=15);C组,供体输尿管-受体膀胱浆肌层隧道术(n=17).对各组尿路重建时间、尿路并发症以及血肌酐动态指标进行比较.结果 A、B、C 3组手术时间分别为(6±2.0)min、(14±2.5)min、(7±2.0)min, A组与C组差异无统计学意义, B组用时分别与A组、C组差异有统计学意义(P＜0.05);术后,A组输尿管梗阻发生率最高(21.4%),B组尿漏发生率最高(13.3%);C组术后尿路并发症总发生率最低,为11.8%,A、B两组术后尿路并发症总发生率分别为28.5%和26.1%,与C组之间差异均有统计学意义(P＜0.05);血肌酐监测显示A组术后40d与C组差异有统计学意义(P＜0.05),术后60d与B、C两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 供体输尿管-受体膀胱浆肌层隧道吻合术后尿路并发症少,对移植肾恢复影响小,是大鼠肾移植尿路重建的较理想方案.     

应用CD4+CD25+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究

目的 应用供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应.方法 以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4 CD25 T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞及CD4 CD25 Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12).观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平.结果 FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4 CD25 Treg细胞纯度为65.22%.所分选之CD4 CD25 Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%.移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P＜0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生.     

肾移植后早期检测尿转化生长因子β的临床意义

目的:探讨肾移植受者术后早期尿转化生长因子β1(TGF-β1)是否与远期移植肾功能有关联. 方法:1999-08/2001-04肾移植术后满1 a、肾功能正常的患者检测血、尿TGF-β1浓度,并对上述患者进行3 a以上的前瞻性观察,对观察期内肾功不全的患者明确是否为慢性移植肾肾病(CAN). 3 a后共有126例患者完成了全程随访,将其肾功能与3 a前的尿TGF-β1浓度作相关性分析,判断二者是否相关;比较术后1 a时尿TGF-β1不同浓度患者在3 a观察期内肌酐清除率(Ccr)损失量有无差异、CAN病例数有无差异;共有15例诊断为CAN的患者,比较CAN患者与非CAN (n-CAN)患者于肾移植1 a在血、尿TGF-β1等方面有无差异. 结果:术后1 a尿TGF-β1浓度为138.1～437.5 ng/g;尿TGF-β1浓度与3 a后的Ccr之间有相关性(r=0.429, P<0.01);尿TGF-β1浓度高的患者在3 a观察期内Ccr损失量明显大于尿TGF-β1浓度低的患者;n-CAN与CAN患者在肾移植1 a时,尿TGF-β1分别为(184.4±38.7)和(399.0±37.5) ng/g(P<0.01),血TGF-β1分别为(33.3±5.4)和(32.7±5.1) μg/L(P>0.05). 结论:TGF-β1可能在CAN的发生过程中起重要作用,CAN患者在肾功能异常前尿TGF-β1已显著升高,肾移植后早期检测尿TGF-β1对远期肾功能具有预测作用.     

TGF-β1与慢性移植肾肾病关系的临床研究

目的:探讨移植肾转化生长因子β1(TGF-β1)与慢性移植物肾病的关系。方法:对152例肾功能正常的肾移植患者检测尿TGFβ1含量,所得相对浓度为157.0～520.7(pg/mg·Cr),分别选出浓度最高和最低的各25例患者构成A组、B组。检测两组血TGF-β1浓度;两组中分别有15例和12例患者进行了移植肾穿剌活检,比较活检组织中TGFβ1mRNA和TGFβ1蛋白的表达;3年后,比较两组肾功能有无差异,对肾功能不全者作移植肾穿剌活检,明确移植肾在病理上是否为非特异性损害(即慢性移植肾肾病的改变)。结果:两组患者血TGFβ1浓度没有明显差异;A组活检组织中TGF-β1mRNA表达量和TGFβ1免疫荧光强度分别为(1.38±0.28)×106和(10.80±2.31)×106,明显高于B组,后者分别为(0.88±0.25)×106和(6.41±1.57)×106;3年后,A组肌酐清除率(Ccr)为(79.2±11.2)ml/min、有7例患者肾功不全,与B组比较有显著差异;肾功不全的患者,移植肾穿剌活检均证实为慢性移植肾肾病。结论:TGF-β1与慢性移植物肾病的发生有着密切的关联;肾移植后检测尿TGF-β1对远期肾功能具有预测作用。     

血管紧张素转换酶抑制剂在肾移植中的应用

目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂依那普利对同种异体肾移植患者移植肾远期功能的保护作用。方法2000-01~2001-06对肾移植术后时间达1年、移植肾功能正常、尿TGF-β1相对浓度≥250.0 pg/mg.Cr的22例患者(A组)连续使用依那普利(5mg/d)1年以上,与同期内、相同条件、未服用依那普利的23例患者(B组)作对比,观察两组肾功能的动态变化;3年后比较两组患者血和尿TGF-β1相对浓度、肌酐清除率(Ccr)减少量和肾功不全的病例数有无差异;比较A组服用依那普利前后,移植肾组织中TGF-β1mRNA表达量有无变化;观察服用依那普利的不良反应。结果B组Ccr进行性降低;在3年随访期内,A组Ccr减少(5.1±4.6)m l/m in,有2例(9.1%)患者肾功能不全,均明显低于B组(P<0.01、0.05),后者分别为(13.7±9.5)m l/m in和9(39.1%)例;3年后A、B两组尿TGF-β1浓度分别为(325.3±46.3、507.7±53.1)pg/mg.Cr,A组明显低于B组(P<0.01);两组血TGF-β1浓度差异无统计学意义(P>0.05);A组服用依那普利1年后,TGF-β1mRNA表达量由(1.57±0.31)降为(0.94±0.27);使用依那普利无不良反应发生;A、B两组中肾功不全者,穿剌活检证实均为慢性移植物肾病。结论依那普利对同种异体肾移植患者移植肾具有保护作用,其作用机理可能与降低移植肾内TGF-β1的分泌有关。     

CD4+CD25+调节性T细胞诱导移植免疫耐受研究进展

器官移植作为终末期疾病的替代治疗,目前已广泛应用于临床,并逐步成为慢性脏器功能衰竭治疗的金标准.但由于排斥反应的存在,严重威胁着移植器官的功能发挥和长期存活.     

内支架法原位端-端吻合大鼠移植肾静脉

目的 建立一种省时、高效的大鼠肾移植静脉吻合方法.方法 建立同种异体肾移植动物模型.根据移植肾静脉重建方式不同进行模型分组:实验组(n=32):内支架法原位端一端吻合;对照组Ⅰ(n=25):原位端.端吻合;对照组Ⅱ(n=22):cuff管套扎法吻合;对照组Ⅲ(n=20):与受体下腔静脉端侧吻合.比较各组移植肾静脉手术操作时间、手术并发症发生率.结果 实验组供肾静脉切取用时同对照组Ⅲ间差异有统计学意义[(9.08±0.88)main比(12.07±0.88)min,P<0.05];修整用时与对照组Ⅱ间差异有统计学意义[(4.97±0.58)win比(8.14±0.64)min,P<0.05];对照组Ⅱ术后静脉血栓发生率最高,同实验组间差异有统计学意义(X2=4.77,P<0.05);实验组静脉吻合口狭窄的发生率最低,同对照组Ⅰ间差异有统计学意义(x2=3.90,P<0.05).结论 应用内支架法行移植肾静脉端.端吻合操作时间短、并发症少,可有效解决大鼠肾移植静脉重建的问题.