失血致低血容量性休克大鼠心脏G蛋白表达及纳络酮的影响

目的：探讨纳络酮对失血致低血容量性休克大鼠的治疗作用及其对休克大鼠心脏组织Ｇ蛋白含量的影响。方法：颈总动脉放血,使平均动脉压降至６ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）稳定１小时完成失血致低血容量性休克大鼠模型。２１只大鼠随机均分为：休克组（ＨＳ组）、纳络酮治疗组（ＮＡＬ组）和正常对照组（ＮＳ组）。在观察动脉血压、血气等指标的同时,采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ技术测定大鼠伤后６小时心脏组织中Ｇｓａ、Ｇ     

糖皮质激素的"非基因组效应"及其临床应用前景

糖皮质激素用于临床疾病的治疗具有悠久的历史,对于糖皮质激素作用的机制,最经典的理论就是基因组模式,即糖皮质激素与细胞浆中的受体结合,在分子伴侣蛋白如热休克蛋白系列的参与下转位到细胞核内,通过与靶基因上的负性激素反应原件或正性激素反应原件结合,通过下调（与负性激素反应原件结合）或上调基因的表达发挥生理或药理学效应,例如通过下调炎症介质的表达抑制炎症反应。但在研究中发现,糖皮质激素的某些效应极其迅速,用常规的基因组机制似乎难以解释,于是逐渐提出了糖皮质激素非基因组效应的概念,     

大、小剂量TGF-β1刺激大鼠皮肤成纤维细胞24h后检测c-Ski和Smad3的表达及其生物学意义

目的：探讨大、小剂量转化生长因子β1（TGF-β1）刺激大鼠皮肤成纤维细胞24h后检测c-Ski和Smad3的表达及其生物学意义.方法：大、小剂量TGF-β1刺激体外培养的大鼠皮肤成纤维细胞,24h后采用WesternBlot和荧光实时定量PCR观察c-Ski,Smad3,CyclinD蛋白和c-Ski,Smad3mR-NA水平的变化情况; pcDNA3.0-LacZ报告基因免疫组化染色来确定转染效率,BrdUELISA法检测c-Ski和Smad3质粒分别转染或转染同时加大、小剂量TGF-β1刺激后细胞增殖的变化.结果：不同剂量TGF-β1刺激24h后,小剂量刺激可显著提高c-Ski,CyclinD的表达水平,而Smad3表达水平无显著变化; 大剂量刺激可显著提高Smad3的表达水平和显著降低CyclinD的表达水平,c-Ski表达水平无显著变化.转染c-Ski可以促进细胞增殖,但同时降低了大、小剂量TGF-β1调节细胞双向增殖的幅度; 转染Smad3可以抑制细胞增殖同时也降低了大、小剂量TGF-β1调节细胞双向增殖的幅度.结论：大、小剂量TGF-β1刺激24h后引起Smad3和c-Ski表达不同变化决定了细胞的增殖状态,这也是大、小剂量TGF-β1双向调节细胞增殖作用的可能机制之一.     

妊娠期大鼠胎盘组织中Rho/ROCK蛋白动态变化特点

目的研究Rho亚家族蛋白(RhoA、B、C)与Rho激酶即ROCK(ROCKⅠ、Ⅱ)在大鼠不同孕期胎盘中的表达水平及其动态变化特点。方法正常受孕的20只雌性大鼠分为孕7、10、13、15、18 d组;各组孕鼠正常饲养,并分别于妊娠第7、10、13、15、18天剖宫取胎盘,测量胎盘湿重及胎盘直径,并记录胎盘个数;采用Western blot及免疫组化法测定胎盘组织中RhoA、B、C与ROCKⅠ、Ⅱ蛋白的表达水平。结果随着孕龄增加,大鼠胎盘的质量和直径都在增加;Westernblot及免疫组化法检测结果显示,RhoA、RhoC的表达水平在孕13、15、18 d组显著高于孕7、10 d组(P<0.01),而RhoB表达水平无明显差异(P>0.05)。ROCKⅠ、ROCKⅡ在孕18 d组表达显著高于孕7、10、13、15 d组(P<0.01)。结论 RhoA、RhoC、ROCKⅠ、ROCKⅡ在大鼠胎盘组织中的表达呈上升趋势,而RhoB则无明显变化;Rho/ROCK信号通路在正常妊娠不同时期的大鼠胎盘组织中发挥重要作用。     

c-ski原癌基因及其生物学活性

c-ski是v-ski细胞内的同源物,在不同类型的组织和细胞中分布广泛。过量表达的ski可促进鸡胚成纤维细胞增殖,诱导其肌肉分化,但却抑制小鼠胚胎成纤维细胞增殖。c-ski还可调节多种核因子的转录活性,参与神经系统发育、造血细胞的增殖和分化、肿瘤发生、组织再生等多种生理病理过程。现综述c-ski的主要研究进展。     

小鼠颌下腺神经生长因子的提取及活性鉴定的初步研究

对神经生长因子（Nerve Growth Factor,NGF）提取纯化、活性鉴定进行了研究。将小鼠颌下腺组织匀浆、离心,取其上清,在不同pH和离子强度,依次通过两个离子交换纤维素层析柱,制得 2.5 S NGF纯品。其分子量约43.5 kD,3种主要组分的等电点分别为8.85、9.10和9.20。用鸡胚背根培养法证明其具有刺激神经生长的作用。     

BALB/c、C57BL/6小鼠糖皮质激素效应差异机制研究

目的 观察BALB／c和C57BL／6两株小鼠的糖皮质激素(Gc)效应差异，并对其分子机制进行初步探讨。方法 采用放免测定、Western blot和EMSA方法检测两株小鼠即时应激前后血清皮质醇浓度、脑组织糖皮质激素受体(GR)表达和脑组织GRE结合效率。结果 BALB／c和C57BL／6小鼠存在Gc-GR信号通路效应差异，C57BL／6小鼠应激前、后GRE结合效率(P＜0．01)和GR胞核／胞装比值(P＜0．01)均高于BALB／c小鼠，但两株小鼠应激前后血清皮质醇浓度(P＞0．05)和胞装内GR含量(P＞0．05)相差不显著。结论 GR核转位量导致的GRE结合差异在两株小鼠Gc—GR效应差异中扮演了重要角色。     

白细胞腺苷A2A受体基因缺失小鼠模型的建立

目的建立选择性外周血自细胞腺苷A2A受体基因缺失的小鼠模型。方法分别采用一次9．5GyX线照射和2次6．2GyX线间隔照射对小鼠进行清髓处理，将腺苷A2A受体基因敲除的小鼠骨髓细胞移植到清髓性处理的野生型小鼠体内，使其白细胞的腺苷A2A受体选择性缺失，并对移植效果进行鉴定。结果通过基因型鉴定发现骨髓移植6周后受体小鼠的白细胞性染色体基因PCR产物电泳条带为300和330bp；腺苷A2A受体阳性细胞率为10．21％，而野生型小鼠为96．72％；2次分割放疗结合大于6×10。个骨髓细胞的移植量可以得到满意的小鼠存活率（91％）。结论成功地建立了选择性缺失白细胞腺苷A2A受体基因的小鼠模型。     

c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响

目的 研究原癌基因c—ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响，并探讨其可能的机理。方法 采用Annexin—V—FITC—PI标记的方法。通过流式细胞仪检测2—8Gy的软X线照射对培养的大鼠皮肤成纤维细胞凋亡的影响；观察转染c—ski基因后细胞凋亡的变化；并采用Western blot检测c—ski对凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果 软X线照射以剂量依赖的方式增加细胞凋亡，并且随着时间的延长进一步增加，大约在36h时达到峰值。转染c—ski基因使4Gy照射24h后的成纤维细胞凋亡率显著下降。转染c—ski基因48h后，Bax的表达和对照组差异无统计学意义，而Bcl-2的表达显著增加。结论 c—ski可降低成纤维细胞的辐射敏感性，促进Bcl-2的表达可能是其机理之一。     

不同剂量C-ski基因转染对兔眼小梁切除术后的影响

目的通过观察兔眼小梁切除术后,不同剂量C-ski基因重组质粒转染对眼压、滤过泡、滤过道炎症细胞、Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维、肌成纤维细胞的影响,了解C-ski基因对滤过道抗瘢痕化的作用。方法36只新西兰大白兔,随机分为4组,每组9只,分别对兔右眼行小梁切除术,于术毕辅以结膜下注射0.01mol/L的PBS溶液0.1ml(A组)、C-ski基因重组pcDNA3.0质粒100μg(B组)、300μg(C组)和500μg(D组)进行治疗,并于术后第1、3、5、7、14、21、30天观察滤过泡情况并测量双眼眼压,第7、14、30天分批处死家兔(每次每组3只),取右眼制作石蜡切片,分别进行HE、天狼星红、免疫组化染色,观察炎症细胞、Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维、肌成纤维细胞情况。结果A组与B组的两眼眼压差、滤过泡、Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维、炎症和肌成纤维细胞数量在各个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。D组双眼眼压差在第7～21天与A组比较,差异有统计学意义(P<0.05),Ⅰ型胶原量在第14天后与A组间比较,差异有统计学意义(P<0.05),C组各项测量指标在各个时间点与B、D组比较,差异均无统计学意义。结论将不同剂量的C-ski基因重...