硝普钠对小鼠神经干细胞增殖的抑制作用

目的：探讨外源性一氧化氮对小鼠神经干细胞增殖的抑制作用。方法：用含生长因子的培养基，原代培养神经干细胞。第5d时，取部分原代培养细胞于培养基中加入不同浓度的硝普钠进行培养。24h后用Griess还原法检测细胞上清液中一氧化氮的释放量。将这些细胞中的一半进行四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）试验，另一半细胞换成无硝普钠的条件培养基继续培养24h，再行MTT试验。另取原代培养细胞经硝普钠作用24h后，行血清诱导分化试验。结果：24h后细胞上清液中一氧化氮释放量随硝普钠浓度的增加而增加；MTT试验反映经硝普钠作用后的神经干细胞活细胞数较对照组明显减少，其减少的程度与硝普钠浓度呈正相关；经硝普钠作用后的神经干细胞，在去除硝普钠后仍可保持旺盛的增殖能力并能被血清诱导分化为神经细胞样细胞。结论：外源性一氧化氮对培养状态下的小鼠神经干细胞增殖有抑制作用。     

小鼠神经干细胞体外培养、鉴定及电镜观察

我们在成功分离培养鼠神经干细胞的基础上[1,2 ] ,对神经干细胞的生长发育特性进行电镜观察。一、材料与方法1.材料 :一级昆明E12 13孕小鼠(本校动物中心提供 ) ,改良的Eagle培养液 (DMEM /F12 ) ,胎牛血清 ,表皮生长因子 (EGF) ,均购于Gibco公司 ;N 2添加剂 (N2 supplement)、Nestin抗体、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)抗体、神经丝蛋白 2 0 0 (NF 2 0 0 )抗体 ,购自Sigma公司 ;免疫组织化学检测系统购自博士德公司。透射电子显微镜 (日立 F75型 )。2 .细胞的分离培养及传代 :无菌条件下剖腹取胎鼠 ,在解剖显微镜下分离胎鼠大脑半…     

护理干预对预防手术室感染的效果评价

目的 分析临床护理对预防手术室感染的重要性,为今后制订感染控制措施提供参考.方法 选择我院2010年12月至2011年11月收治的神经外科手术患者102例作为观察组,在进行手术治疗的同时实施优质的临床护理,将2009年12月至2010年11月收治的98例患者作为对照组,仅接受常规的治疗及护理.将2组感染发生率进行比较.结果 观察组患者中发生感染12例占11.76％,显著低于对照组的18.37％.结论 优质的临床护理对预防手术室感染具有重要作用,在临床护理工作中应予以推广.     

外源性一氧化氮对小鼠神经干细胞增殖的抑制作用

目的: 探讨外源性一氧化氮(NO)对小鼠神经干细胞(NSC)增殖的抑制作用. 方法: 用含表皮生长因子(EGF)的条件培养基原代培养NSC,在培养基中加入不同浓度的硝普钠(SNP)作为NO的体外供体. 24 h后用Griess还原法检测细胞上清液中NO的释放量;取一半细胞进行MTT试验,另一半细胞换成无SNP的条件培养基继续培养24 h,再行MTT试验. 另取经SNP抑制24 h后的NSC进行血清诱导分化试验和免疫组化试验检测其NOS表达. 结果: 24 h后细胞上清液中NO释放量随SNP浓度的增高而增加;MTT试验反映经SNP作用后的NSC活细胞数较对照组明显减少(P<0.01);经SNP作用后的NSC在解除抑制后仍能保持旺盛的增殖能力并能被诱导分化为神经细胞样细胞,这些NSC表达nNOS和eNOS,而不表达iNOS. 结论: 外源性NO对培养状态下的小鼠NSC有抑制作用.     

外源性一氧化氮对神经干细胞分化的促进作用

目的：探讨外源性一氧化氮(ectogenesis nitric oxide,NO)对培养状态下神经干细胞分化的影响．方法：用含EGF的条件培养基原代培养小鼠神经干细胞,在第5日时,实验组加入硝普钠(sodium nitroprussides NP)作为NO的体外供体,对照组不加SNP．24h后都换成含血清的培养基．比较两组细胞的分化情况．结果：在含血清培养基中培养24h后,两组细胞均发生分化,但实验组经SNP作用后,细胞分化速度较对照组明显加快,突起较长．结论：NO能促进神经干细胞的分化,并能促进细胞分化后轴突的发育．     

脑胶质瘤增殖及凋亡水平与病理级别的关系

目的:探讨脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的水平以及与脑胶质瘤病理级别的关系. 方法:选择83例脑胶质瘤标本,采用免疫组化SABC法和TUNEL法分别检测PCNA蛋白的表达和凋亡细胞,计算脑胶质瘤增殖指数(PI)和凋亡指数(AI),评定脑胶质瘤日常生长水平(ODG). 结果:脑胶质瘤PI,AI及ODG分别为(28±19)%,(1.0±0.8)%和(12±10)%,三者均随脑胶质瘤病理级别的增高而升高(P<0.01),三者在恶性胶质瘤均显著高于良性胶质瘤(P<0.01). 结论:PI,ODG及AI能较为客观地反映脑胶质瘤细胞恶性增殖和凋亡的水平,可作为判定脑胶质瘤病理级别有价值的参考指标.     

含紫杉醇方案化疗的护理体会

紫杉醇 ,属抗肿瘤植物类药 ,又称特素 ,其作用机制为加强微管系统的稳定性及形成 ,从而抑制细胞的有丝分裂 ,抑制肿瘤生长。我院从 2 0 0 1年 5月～ 2 0 0 2年 8月应用紫杉醇治疗恶性肿瘤患者 2 6例 ,对治疗过程中出现的毒副作用给予了及时处理 ,保证了化疗的正常进行 ,现将护理体会报告如下 :1　临床资料2 6例患者 ,女性 2 4例 ,男性 2例 ,年龄 34～ 5 6岁 ,全部经病理或CT证实为恶性肿瘤 ,其中乳腺癌 18例、卵巢癌 4例、肺癌4例。所有病人均采用紫杉醇 +卡铂方案化疗。2　治疗方法使用紫杉醇 135～ 175mg/m2 溶于 5 %葡萄糖或生理盐水5 0…     

胶质瘤中P13K、AKT2和NDRG2 mRNA的表达及相关性

目的:研究胶质瘤中蛋白激酶P13K、AKT2 mRNA表达与NDRG2 mRNA表达的相关性,寻找与NDRG2相互作用的上下游分子.方法:用实时定量PCR技术检测29例脑胶质瘤及相应瘤旁组织中P13K、AKT2和NDRG2 mRNA表达量.结果:29例脑胶质瘤NDRG2 mRNA表达明显低于瘤旁组织(P＜0.05),且不同病理分级间表达有显著性差异(P＜0.05),其中Ⅳ级NDRG2 mRNA表达量明显低于Ⅱ级和Ⅲ级胶质瘤(P=0.007,P=0.03);AKT2,P13K mRNA表达在胶质瘤及瘤旁组织之间无明显差异(P＞0.05).AKT2,P13K mRNA表达与NDRG2 mRNA表达的相关性无统计学意义(P＞0.05).结论:NDRG2可能与胶质瘤的发生发展及恶性演变有关,在mRNA表达水平,还不能认为P13K、AKT2与NDRG2之间有相关性.     

纤维蛋白胶释放血管内皮生长因子加速损伤动脉血管内皮化

背景：血管去内皮化，血栓形成和内膜增生极大的限制了血管治疗方法的临床效果。目的：利用含血管内皮细胞生长因子的纤维蛋白胶作用于球囊损伤血管内膜来评估其对血管内皮化、细胞增殖和内膜增生的影响。设计：随机对照、重复测量设计。单位：解放军第四军医大学西京医院血管外科及神经外科研究所。材料：实验于2002-10／2004-06在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所完成。15只健康杂种犬（雌雄不限，体质量12．5～18．9kg）由西京医院动物实验外科提供。方法：损伤犬双侧颈动脉，一侧为纤维蛋白胶／血管内皮细胞生长因子／肝素处理组，另一侧为生理盐水对照组。损伤后10，30和90d观察对比内膜损伤和处理的结果。切片应用BioquantBQ0S／2计算机形态测量仪测量血管内膜和中层厚度。5-溴脱氧尿苷掺人免疫组化切片用于计算细胞增殖率，40倍光镜下计算5-溴脱氧尿苷阳性细胞数。电镜检查血管腔内表面内皮细胞覆盖率。主要观察指标：内皮细胞覆盖情况、新生内膜和中层厚度及细胞增殖率。结果：所有犬均存活至标本收集时，无脱失值。①内皮细胞覆盖率：在10d和30d时，处理侧颈动脉的内皮细胞覆盖率明显高于对照侧[（66．73&;#177;30．783l％，（40．8&;#177;27．74）％，P=0.04；（96．67&;#177;10.29）％，（82．07&;#177;22．82）％，P=0．0481。②增殖率：10d时，血管各层细胞增殖达到高峰，90d恢复正常。和对照组相比，处理组在30d对新生内膜和血管中层内侧半中层及血管中层的细胞增殖率明显增强[（7．41&;#177;6．75）％．（3．56&;#177;2．72）％；（2．81&;#177;2．65）％，（0．83&;#177;059）％；（2．06&;#177;1．81）％，（0．62&;#177;0．31）％．P〈0．051。③新生内膜厚度：和对照组相比，处理组在30d和90d时双侧近端和中段的内膜厚度／中层厚度比值明显增加（0．18&;#177;0．22。0．10&;#177;0．06；0．21&;#177;0．23，0．14&;#177;0．14；0．12&;#177;0．08，0．09&;#177;0．08；0．29&;#177;0．40，0．12&;#177;0．12，P〈0．05，P〈0．01），但远端没有变化。结论：纤维蛋白胶能将细胞因子释放入动脉血管壁并保持生物学活性。纤维蛋白胶释放血管内皮细胞生长因子加肝素能有效加速损伤血管内皮化但伴有平滑肌细胞增殖和内膜增生。     

纤维蛋白胶释放血管内皮生长因子加速损伤动脉血管内皮化

背景血管去内皮化,血栓形成和内膜增生极大的限制了血管治疗方法的临床效果.目的利用含血管内皮细胞生长因子的纤维蛋白胶作用于球囊损伤血管内膜来评估其对血管内皮化、细胞增殖和内膜增生的影响.设计随机对照、重复测量设计.单位解放军第四军医大学西京医院血管外科及神经外科研究所.材料实验于2002-10/2004-06在解放军第四军医大学西京医院神经外科研究所完成.15只健康杂种犬(雌雄不限,体质量12.5～18.9 kg)由西京医院动物实验外科提供.方法损伤犬双侧颈动脉,一侧为纤维蛋白胶/血管内皮细胞生长因子/肝素处理组,另一侧为生理盐水对照组.损伤后10,30和90d观察对比内膜损伤和处理的结果.切片应用Bioquant BQ OS/2计算机形态测量仪测量血管内膜和中层厚度.5-溴脱氧尿苷掺入免疫组化切片用于计算细胞增殖率,40倍光镜下计算5-溴脱氧尿苷阳性细胞数.电镜检查血管腔内表面内皮细胞覆盖率.主要观察指标内皮细胞覆盖情况、新生内膜和中层厚度及细胞增殖率.结果所有犬均存活至标本收集时,无脱失值.①内皮细胞覆盖率在10 d和30 d时,处理侧颈动脉的内皮细胞覆盖率明显高于对照侧[(66.73±30.78)%,(40.8±27.74)%,P=0.04;(96.67±10.29)%,(82.07±22.82)%,P=0.048].②增殖率10 d时,血管各层细胞增殖达到高峰,90d恢复正常.和对照组相比,处理组在30 d时新生内膜和血管中层内侧半中层及血管中层的细胞增殖率明显增强[(7.41±6.75)%,(3.56±2.72)%;(2.81±2.65)%,(0.83±0.59)%;(2.06±1.81)%,(0.62±0.31)%,P＜0.05].③新生内膜厚度和对照组相比,处理组在30 d和90 d时双侧近端和中段的内膜厚度/中层厚度比值明显增加(0.18±0.22,0.10±0.06;0.21±0.23,0.14±0.14;0.12±0.08,0.09±0.08;0.29±0.40,0.12±0.12,P＜0.05,P＜0.01),但远端没有变化.结论纤维蛋白胶能将细胞因子释放入动脉血管壁并保持生物学活性.纤维蛋白胶释放血管内皮细胞生长因子加肝素能有效加速损伤血管内皮化但伴有平滑肌细胞增殖和内膜增生.