应用萃取-超滤两步法从过期人血中提纯人血红蛋白

目的：建立一种有效的实验方法，从过期的全血及血液制品（少浆全血；浓缩红细胞；洗涤红细胞）中，提取人天然无基膜血红蛋白（SHFb）。方法：采用甲苯萃取法有效去除血液中的有形成分（细胞膜等），再采用Millipore超滤装置分离提纯人血红蛋白，得到SFHb，然后建立合理的实验方法（电泳、紫外－可见光扫描、反相高效液相，库尔特血液分析系统和ABO血型凝集试验等），确定纯化产品的产率、浓度、纯度。结果：应用上述方法，测得SFHb的浓度为15．2g/dl；纯度为98．3％；血型 凝集实验：阴性；紫外扫描图谱、反相高效液相峰谱与对照品吻合；聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示，产品呈均一分布，90％电泳迁移率近似Marker(45KD);15%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示确定了血红蛋白蛋白质的亚基组成及分子量,电泳迁移率与对照品完全一致。     

老年胃癌患者与幽门螺旋杆菌感染关系的研究

目的：探讨幽门螺旋杆菌（Hp)感染与老年胃癌患者之间的关系。方法：对613例老年患者均经胃镜活检及病理诊断，进行Hp阳性率显著性检验及统计学处理。结果：Hp在慢性胃炎－萎缩性胃炎－肠增生－胃癌这一模式中的感染率不同，且呈逐渐增高的趋势。结论：说明Hp感染与胃癌的发生密切相关。     

人体铁代谢指标与冠心病的相关性研究

目的探讨血清铁、铁蛋白、转铁蛋白、可溶性转铁蛋白受体(sTFR)与冠心病的相关性。方法选择因胸痛症状入院行冠状动脉造影检查证实为冠心病的患者21 9例,按血管累及支数分为女性单支病变组(35例)、双支病变组(35例)、3支病变组(35例);男性单支病变组(38例)、双支病变组(38例)、3支病变组(38例);另选无冠心痛患者70例,分为男性对照组35例和女性对照组35例。对不同病变组患者进行铁4项指标及血脂检测。结果与对照组比较,男性、女性不同病变组血清铁、铁蛋白、转铁蛋白和sTFR明显升高(P0.05,P0.01);与单支病变组比较,双支病变组、3支病变组血清铁、铁蛋白和转铁蛋白明显升高(P0.01);男性、女性(除铁蛋白外)铁4项指标与TC、LDL、载脂蛋白B显著相关(P0.05)。结论男性和女性铁负荷增高与冠心病的发生、发展密切相关;铁超负荷程度越大,冠状动脉病变程度越严重;铁超负荷可能是冠心病的又一新的危险因素。     

液质联用设备于代谢组学研究中的质量控制及变异度分析

采用超高效液相色谱-质谱联用(HPLC-LTQ Orbitrap XL MS)平台分析不同Child-Pugh分级肝硬化病人和健康人群血清标本的代谢轮廓,检测过程中以各样本上样液等体积混合制成质控样本,随机插入到样本队列进行检测,将质控数据进行主成分分析并建立PCA模型(R2X=84.8%,Q2=70.8%)以评判液质联用分析平台在整个分析过程中的稳定性。以所有待测样本提取出的代谢物离子为X变量,以待测样本上样顺序为Y变量建立正交偏最小二乘投影模型(R2X=50.3%,R2Y=82.5%,Q2=71%),液质联用平台的性能随时间的"偏移性"作为重大的干扰因素将极大的影响样本检测的结果。     

不同原位肝移植模型大鼠的CD4~+CD25~+调节性T细胞数量变化的研究

目的建立稳定的大鼠原位肝移植模型,并检测大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例的变化。方法采用近交系成年雄性BN、LEW大鼠,改良"二袖套"法建立肝移植模型31例。术前随机分为3组:排斥组(LEW→BN,n=9),耐受组(BN→LEW,n=11),同基因组(BN→BN,n=11)。存活的受体分别于术后5 d、10 d、30 d取外周血,分离外周血中的单个核细胞,由流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg比例。并于相应时间点每组随机各处死2只,取肝脏标本观察病理学变化。每组选取5例来观察生存期,存活>100 d时各处死2只,取肝脏标本。结果中位生存期:排斥组14 d,耐受组112 d,同基因组129 d。耐受组与同基因组术后未见明显排斥反应。术后7 d,排斥组肝脏病理Banff评分Ⅲ级。肝移植早期,排斥组和自发耐受组的外周血中CD4+CD25+Treg比例均增加,术后10 d耐受组CD4+CD25+Treg比例明显高于同基因组(P<0.01)。术后30 d,耐受组CD4+CD25+Treg比例仍维持在较高水平。结论 BN与LEW大鼠组合可建立稳定可靠的急性排斥模型与自发耐受模型。CD4+CD25+Treg可能参与自发免疫耐受的形成。     

胸水ADA、TB—DNA和IFN-γ的联合检测对结核性胸膜炎的诊断价值评估

目的评价朐水中腺苷脱氨酶（ADA）、结核分枝杆菌脱氧核苷核酸（TB—DNA）和干扰素γ（IFN-γ）的联合检测在结核性胸膜炎的临床诊断意义。方法对172例疑似结核性胸膜炎患者的胸水标本进行ADA、TB—DNA和IFN一1检测。结果172例患者的胸水中,71例确诊为结核性胸膜炎,TB—DNA的灵敏度、特异度为40．85％、99．01％;ADA为61．97％、74．26％;IFN-γ为77．5％、95．2％。TB—DNA或IFN-γ组合的灵敏度和特异度最好,具有很好的诊断价值。ADA和IFN-γ组合的灵敏度最高,与其他2种方法有显著性差异。3种方法联合检测的敏感性和准确性高于2种方法联合检测,具有较高的临床应用价值。结论胸水ADA、TB—DNA、IFN-γ 3种方法联合应用,是一种快速、灵敏度和特异度很高的诊断结核性胸膜炎的方法。     

常规生化检查在初诊多发性骨髓瘤患者中的应用价值

目的 探讨常规生化指标在多发性骨髓瘤(MM)中的应用价值.方法 回顾性分析天津市第三中心医院2004年1月至2010年5月收住院的63例初诊MM患者的临床资料,根据同时检测的血清清蛋白水平对血钙进行校正,然后对MM患者进行Durie-Salmon(DS)分期,分析常规生化指标与MM分期的关系.结果 经血清钙校正后Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者分别为15例、9例和39例,各期之间球蛋白、清蛋白、β2-微球蛋白及血沉的差异均具有统计学意义(P<0.05),而乳酸脱氢酶和C反应蛋白的差异没有统计学意义(P>0.05).β2-微球蛋白与C反应蛋白呈正相关,与清蛋白、乳酸脱氢酶、血沉则无明显相关(P>0.05).结论 球蛋白、清蛋白和β2-微球蛋白的浓度在MM不同分期之间呈梯度分布,可以为MM分期提供辅助信息,反映MM的病情严重程度.     

肝细胞肝癌患者尿液代谢轮廓分析及潜在生物标志物筛选

目的对肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）患者尿液代谢轮廓进行分析,建立疾病区分模型并筛选出具有潜在诊断价值的特征代谢标志物。方法采用超高效液相色谱与质谱联用代谢组学研究平台对27。例HCC患者,31例肝硬化患者及22例健康志愿者尿液样本进行分析,利用Mzmine2．7软件对数据进行数据前处理及归一化;利用SIMCA—P＋12.0.1．0软件进行主成分分析（prinei-pal component analysis,PCA）及正交偏最小二乘（orthogonal partial leastsquares discriminant analysis,OPLS—DA）聚类分析,构建疾病区分模型;筛选特征代谢物,并利用SPSS17．0软件进行数据统计分析。结果构建了HCC与肝硬化及健康对照尿液代谢轮廓的PCA（R2X：66．9％,Q2=35．4％）及OPLS—DA疾病区分模型（R2X=59．4％,R2Y=92．1％,Q2=82．8％）,并且筛选18个对比HCC组与肝硬化组或健康对照组存在显著差异的特征离子,并鉴定了其中的15个。3葡萄糖苷、四氢醛固酮3葡萄糖甘酸等15种特征代谢离子在HCC组与肝硬化组差异均有统计学意义（P均〈0．05）,5-a-双氢睾酮葡糖苷酸等12种特征离子在HCC组与健康对照组间差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论利用代谢轮廓分析方法所找到的尿液中特征代谢物具有很好的区分HCC患者与肝硬化及健康人群的能力,可以作为潜在肝脏疾病的诊断标志物及其新的治疗靶点,在临床领域可做进一步研究。     

应用ROC曲线评价酒精性肝病实验室诊断指标的价值

目的探讨缺糖转铁蛋白(CDT)和GGT、ALT、AST对酒精性肝病(ALD)的诊断价值。方法选取38例ALD患者,40例非酒精性肝病(NALD),40例嗜酒者和40例健康人用离子交换色谱与免疫比浊法结合检测CDT,使用TBA-120FR全自动生化分析仪检测GGT、AST、ALT,用ROC曲线进行分析。结果CDT诊断ALD的ROC曲线下面积(AUC)为0.894,敏感性为0.821,特异性为0.797,而GGT这三者分别为0.804、0.800、0.633,ALT分别为0.533、0.314、0.541,AST分别为0.525、0.343、0.574。结论CDT、GGT对ALD的实验室诊断具有一定的价值,其中CDT优于GGT是最好的辅助诊断指标。     

降钙素原的临床应用

随着细菌耐药性、重症感染患者的增加，如何快速诊断炎症显得愈发重要。常规用于诊断炎症治疗过程的指标如体温、WBC计数、血沉或C反应蛋白(CRP)等，因其都不是十分可靠的指标，是非特异性参数，临床医生迫切需要一种快速、准确反应炎症的指标来确诊。近年来发现，在全身严重细菌感染、败血症及多种器官功能失调综合征的辅助诊断方面，降