IL-21在肝癌细胞株H22细胞中的表达及其活性

摘 要　目的：构建小鼠IL-21（mIL-21）真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1,转染肝癌H22细胞,探讨其生物学活性。方法：RT-PCR法扩增mIL-21基因,构建mIL-21真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1,并经DNA测序证实。脂质体法介导mIL-21-pcDNA3.1转染H22细胞,RT-PCR和Western boltting鉴定其表达,MTT法检测mIL-21-pcDNA3.1对T细胞增殖和NK细胞杀伤活性的影响。结果：DNA序列分析证实构建的mIL-21-pcDNA3.1正确无误,RT-PCR和Western boltting证实转染的H22细胞中有mIL-21的表达。MTT法显示,转染mIL-21的H22细胞培养上清刺激T细胞增殖的刺激指数（stimulation index,SI）为3.412±0.312,联合ConA的刺激指数为4.673±0.450,均显著高于转染空质粒组的1.465±0.103和未转染组的1.447±0.245,(P<0.01）。转染mIL-21的H22细胞培养上清NK细胞杀伤率为(81.66±4.26)%,显著高于转染空质粒组的（34.74±5.52)%和未转染对照组的（33.61±1.42)%。结论：mIL-21-pcDNA3.1载体在H22细胞中的表达可显著增强T细胞增殖及NK细胞的杀伤功能,为其在抗肝癌治疗中的应用奠定了基础。     

鞘内注射TNP-ATP对骨癌痛大鼠机械痛敏的影响

目的 观察骨癌痛大鼠鞘内注射P2X受体抑制剂TNP-ATP后的患侧后肢机械缩足反射阈值(MWT)和双后肢负重差值变化.方法 雌性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8):Sham组、Model组、ddH2O组和TNP-ATP组.Sham组左胫骨髓腔注射PBS液5 μl,其他3组分别注射Walker256细胞悬液5 μl(2×107个/ml).建模后5 d,所有大鼠皆鞘内置管;建模后7 d,ddH2O组鞘内注射ddH2O 10 μl,TNP-ATP组鞘内注射TNP-ATP(30 nmol)10 μl ,其余两组不进行鞘内注射.在建模前、建模后3、6、9、12 d用Von Frey丝测定大鼠患侧后肢机械缩足反射阈值,用负重仪测大鼠双后肢负重差值.结果 与Sham组比较,Model组和ddH2O组建模后第6～12 d左后肢痛觉超敏,MWT值进行性下降,双后肢负重差值进行性增加.TNP-ATP组鞘内给药后患侧后肢MWT升高,双后肢负重差值减小.结论 鞘内注射TNP-ATP能减轻但不能完全抑制大鼠胫骨癌痛引起的机械痛敏.     

浅谈静吸复合全麻的护理配合

吸入麻醉是将吸入麻醉药通过机械回路进行通气送入患者的肺泡,形成麻醉药气体分压,弥散入血后,对中枢神经系统直接发生抑制作用,配合静脉用药,从而产生全身麻醉效应。吸入麻醉易于调控,因而安全、有效,能满足各种手术需要。静吸复合全麻有一定时间的诱导期。由于诱导期用药剂量大,机体状态的变化及麻醉药对心血管的作用影响剧烈,易出现躁动、喉痉挛等并发症。因此,做好静吸复合全麻的护理十分重要。现报告如下。     

宝鸡地区成年健康人群血清胱抑素C参考区间调查

目的 建立宝鸡地区成人血清胱抑素C(Cys-C)的参考区间。方法 对健康成人男性720例、女性722例采集静脉血标本,采用颗粒增强散射免疫比浊法测定其血清Cys-C的浓度。结果 宝鸡地区健康成年人Cys-C水平男性高于女性(t=11.625,P<0.05)。男性、女性Cys-C水平均随年龄升高而增高(男:F=48.908,P<0.05; 女:F=59.801,P<0.05)。该地区健康人群血清Cys-C的参考区间男性:44岁以下为0.56～0.98 mg/L,45～59岁为0.59～1.08 mg/L,60～74岁为0.69～1.24 mg/L,75岁以上为0.72～1.28 mg/L; 女性:44岁以下为0.52～0.98 mg /L,45～59岁为0.56～0.99 mg/L,60～74岁为0.59～1.12 mg/L,75岁以上为0.69～1.22 mg/L。结论 健康人群血清Cys-C浓度存在着年龄和性别差异,应建立自己实验室健康人群血清Cys-C的参考范围。     

高表达衔接蛋白Src羧基端激酶结合蛋白对Jurkat细胞形态及功能的影响

背景：衔接蛋白分子的联动和协同有效调控T细胞的信号转导,形成级联放大或限制,最终实现T细胞复杂的免疫功能。蛋白分子Src羧基端激酶结合蛋白正是衔接蛋白的一种,其主要是通过负反馈调节Src家族激酶活性。而这种负反馈调节作用依赖于Src羧基端激酶结合蛋白的Y317,可能涉及Src羧基端激酶的SH2结构域。 目的：探索衔接蛋白Cbp对Jurkat细胞形态及功能的作用。 方法：构建仅表达增强绿色荧光蛋白的融合蛋白和Src羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的融合蛋白的病毒颗粒。将Jurkat细胞分为未转染组、阴性对照组和Src羧基端激酶结合蛋白组,后2组转染仅表达增强绿色荧光蛋白的病毒和转染Src羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的病毒。 结果与结论：细胞转染效率大于95%, Src羧基端激酶结合蛋白定位于细胞膜上。转染Src羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白病毒的Jurkat细胞,皱缩细胞增多,大小均一性较差,细胞坏死凋亡的数量增加,细胞中Src羧基端激酶结合蛋白基因表达上调,Src羧基端激酶表达下降,而酪氨酸蛋白激酶表达增加。提示Jurkat细胞转染Src羧基端激酶结合蛋白后,可使细胞存活率下降,细胞信号转导功能减弱。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

北京市社区无社会保障老年女性居民健康状况分析

目的 了解2009—2012年北京市社区无社会保障老年女性居民躯体健康指标变化趋势,为在该人群中开展健康管理服务,提高其健康水平提供参考依据。方法 分别于2009—2012年在北京市海淀区永定路街道选取60岁以上无社会保障老年女性居民,其中2009年为518名,2010年为455名,2011年为449名,2012年为504名。收集调查对象健康体检资料,躯体健康指标来自于北京市海淀区统一的“无社会保障老年人体检表”,包括年龄、腰围、收缩压、舒张压、脂肪肝、糖尿病、空腹血糖受损（IFG）、超重、肥胖、肝囊肿、肾囊肿、胆囊结石、眼动脉硬化和代谢综合征等。结果 2009—2012年,无社会保障老年女性居民脂肪肝、糖尿病、超重、肝囊肿、肾囊肿、胆囊结石、眼动脉硬化患病率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。2009—2012年,无社会保障老年女性居民年龄、腰围、收缩压、舒张压比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;高血压、IFG、肥胖、代谢综合征患病率呈下降趋势（P＜0.05）。将调查对象按照年龄分为60～64岁,65～69岁,70～74岁和＞74岁;2009—2012年,高血压发生率在60～64岁、65～69岁、70～74岁中呈下降趋势（P＜0.05）,IFG患病率在60～64岁、70～74岁、＞74岁中呈下降趋势（P＜0.05）,肝囊肿患病率在70～74岁中呈下降趋势（P＜0.05）,胆囊结石患病率在＞74岁中呈下降趋势（P＜0.05）,代谢综合征患病率在65～69岁、70～74岁中呈下降趋势（P＜0.05）。将调查对象按照体质指数（BMI）分为体质量偏低、体质量正常、超重和肥胖;2009—2012年,脂肪肝患病率在体质量正常和超重人群中呈上升趋势（P＜0.05）,高血压患病率在体质量偏低和超重人群中呈下降趋势（P＜0.05）,IFG、眼动脉硬化患病率在体质量正常和超重人群中呈下降趋势（P＜0.05）,代谢综合征患病率在肥胖人群中呈下降趋势（P＜0.05）。结论 北京市无社会保障老年女性居民腰围呈现逐年增大趋势,中心性肥胖患病率逐年增高;但超重、肥胖、脂肪肝、高血压、糖尿病、IFG、代谢综合征患病率呈现总体下降趋势;考虑可能与健康体检发现问题后采取一定的健康干预措施有关。但是,该人群慢性疾病防控形势仍然比较严峻,建议加强健康管理干预措施。     

N-乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助治疗婴幼儿支气管肺炎的疗效分析

目的 探讨氧气雾化吸入N-乙酰半胱氨酸辅助治疗婴幼儿支气管肺炎的临床效果。方法 选取2012年1月-2013年12月潍坊医学院附属潍坊市人民医院新生儿科收治的支气管肺炎患儿120例为研究对象,按照随机数字表法将其分为对照组与治疗组,各60例。所有患儿在抗感染、平喘及退热等药物治疗的基础上行氧气雾化吸入,治疗组氧气雾化吸入药物为N-乙酰半胱氨酸雾化液,对照组为盐酸氨溴索。观察患儿体征（体温、气促、咳嗽、肺部啰音）及有无不良反应,并记录体征消失时间、住院时间。结果 治疗组总有效率为95.0%（57/60）,对照组总有效率为83.3%（50/60）,差异有统计学意义（χ2=4.227,P＜0.05）。治疗组患儿体温恢复正常时间、气促消失时间、咳嗽消失时间、肺部啰音消失时间和住院时间均短于对照组（P＜0.05）。治疗组不良反应发生率为1.7%（1/60）,对照组不良反应发生率为5.0%（3/60）,差异无统计学意义（χ2=1.034,P>0.05）。结论 氧气雾化吸入N-乙酰半胱氨酸辅助治疗婴幼儿支气管肺炎能提高治愈率,缩短病程,无明显不良反应,值得临床推广应用。     

原发性甲状旁腺功能亢进症致高血钙危象诊断及治疗分析

目的 探讨原发性甲状旁腺功能亢进症致高血钙危象的临床表现、实验室检查及影像学检查结果、治疗及转归。方法 选取2005年1月-2015年1月新疆医科大学第一附属医院收治的10例原发性甲状旁腺功能亢进症致高血钙危象患者,入院时随机血钙水平均≥3.75 mmol/L。回顾性分析患者的临床表现、实验室检查及影像学检查结果、治疗及转归。结果 10例患者血钙水平4.02～5.20 mmol/L,平均（4.48±0.42）mmol/L;8例患者血磷水平偏低（0.50～0.94 mmol/L）,2例患者血磷水平处于参考范围低值。甲状旁腺素（PTH）水平305～2 500 ng/L,平均（1 369±682）ng/L;碱性磷酸酶水平68～1 445 U/L,平均（381±405）U/L。1例未行99Tcm-甲氧基异丁基异腈（MIBI）显像检查,1例99Tcm-MIBI显像阴性,但2例患者均有典型超声、实验室检查结果及临床表现,术后均证实为有功能腺瘤。其余患者99Tcm-MIBI显像均阳性。10例患者入院后均及时给予扩容、利尿、降钙等内科治疗,所有患者在每日补液量4 000～6 000 ml的基础上,根据病情给予利尿剂、降钙素及双磷酸盐等治疗,缓解患者高钙症状,在3～5 d内血钙水平维持在相对安全的范围内,且生命体征平稳后,在准确定位的基础上给予手术治疗。术后10例患者血清PTH水平均明显下降,全身疼痛、烦渴、恶心及呕吐等症状在1周内明显改善;8例患者血钙水平在术后3～7 d内恢复正常,余2例患者术后1～2 d内发生低钙血症,给予钙剂及活性维生素D3治疗,1周后血钙水平正常,低钙血症症状消失。结论 原发性甲状旁腺功能亢进症致高血钙危象患者血钙水平升高,PTH水平亦升高,一旦诊断明确,若无手术禁忌证,应积极完善术前准备并尽早手术治疗。手术是其最有效治疗方法。     

血清TPOAb和TGAb阳性在正常人群中的临床分析

目的研究正常人群血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和甲状腺球蛋白抗体(TGAb)阳性的特点。方法采用化学发光法检测2014年5月~10月731例正常人群的血清TPOAb和TGAb,分析其甲状腺自身抗体的特点。结果731例正常人群TPOAb和TGAb同时阳性占25.03%,仅TPOAb阳性占7.93%,仅TGAb阳性占4.51%,且女性普遍高于男性。结论正常人群血清TPOAb和(或)TGAb存在一定阳性率。     

胚胎解冻移植周期移植日和移植后3天血清雌孕激素水平对临床结局的影响

目的探讨胚胎解冻移植周期血E2、P及其比值与自然周期解冻移植结局的关系。方法对北京大学第三医院自2008年1月至2008年10月自然周期方案行胚胎解冻移植的742个周期进行总结分析。根据移植后的临床结局分为妊娠组（331例,又分宫内活胎组及妊娠结局不良组）及未妊娠组（411例）,分别于移植当日及移植后3天取血查血清雌二醇（E2）和孕激素（P）。结果本组解冻移植后临床妊娠率为33．42％;移植后妊娠与否与是否发生卵泡黄素化无关,P〉0．05;宫内活胎组移植日P／E2值为117．6±71．5,移植后3天的E2、P、P／E2分别为628．2±329．4,90．6±61．8,及161．2±104．9,明显低于未妊娠组,P〈0．05。结论自然周期胚胎解冻移植当日及移植后3天周期恰当的雌孕激素比例与胚胎解冻移植临床结局有关。