白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6基因全长cDNA的快速扩增

根据本室已获得的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP6家族成员cDNA序列片段，设计一对特异性引物．以上述蚊株总RNA为模板，分别进行5’-cDNA末端快速扩增(5’-RACE)和3’-cDNA末端快速扩增(3’-RACE)，所获得的产物经1．2％琼脂糖凝肢电薄，显示：5’-RACE产物达I.5kb，3’-RACE产物达500bp，扣陈两重叠部分的已知cDNA片段(250bp)，则该CYP6家族成员生长cDNA长度达1．75kb，与其它昆虫中已知的CYP6家旅全长cDNA长度相似；然后再分别切胶回收，并以此(RACE产物)为模板，用上述双引物进行PCR鉴定，结果显示2个RACE产物均包含有已知的250bp cDNA片段，提示所得的RACE产物为该CYP6家族成员生长cDNA。     

恙虫病东方体感染免疫及其疫苗研究进展

恙虫病东方体是恙虫病的病原体,机体对恙虫病的免疫机制主要是细胞免疫,抗体在恙虫病免疫中也起一定作用,目前尚无预防恙虫病的理想疫苗。     

3株弓形虫GRA7基因的保守性鉴定

目的　比较弓形虫不同地理株 (RH株、ZS2株、GT株 )GRA7基因的异同。　方法　从弓形虫不同地理株的基因组DNA中扩增出GRA7基因 ,对目的基因用限制性内切酶 (Esp3I、CfrI、MboI)酶切并比较。将目的基因克隆至pGEX 4T 1质粒 ,转化大肠埃希菌JM 10 9,进行测序并比较。　 结果　PCR扩增出 3株弓形虫的目的基因片段 ,大小均在 5 0 0～ 75 0bp之间 ;经 3种限制性内切酶酶切 ,其大小均与理论值相符 ;3株弓形虫GRA7基因序列相同。　 结论　弓形虫不同地理株GRA7基因具有高度保守性     

日本血吸虫成虫低密度脂蛋白受体研究

目的　研究日本血吸虫成虫低密度脂蛋白受体 ,为以后的疫苗研究提供依据。　方法　自人工感染家兔的肠系膜下静脉取日本血吸虫成虫 ,用非离子去污剂TritonX 10 0抽提出日本血吸虫成虫表膜蛋白 ,反相高效液相色谱(HPLC)进行分离纯化后 ,收集各主要分离蛋白峰 ,以12 5I标记的人血浆低密度脂蛋白 (LDL)作为放射性配体 ,经放射性自显影及放射性受体配体结合分析鉴定能与人血浆12 5I LDL特异结合的蛋白。并以SDS PAGE及等电聚焦电泳确定其纯度、分子量及等电点。　结果　在日本血吸虫雌、雄成虫虫体表膜均存在可与人血浆12 5I LDL特异性结合的蛋白分子 ,此蛋白是日本血吸虫成虫低密度脂蛋白受体 ,在HPLC上保留时间为 10 .5min ,SDS PAGE显示其分子量约 6 0～6 5kDa ,等电点为 6 .7。　结论　日本血吸虫雌、雄成虫虫体表膜均存在人血浆低密度脂蛋白受体     

恙虫病的实验室诊断技术及新进展

恙虫病的实验室诊断对恙虫病的防治工作有着重要的实际意义。该文主要介绍了多种实验室常用的恙虫病诊断技术及研究进展。     

日本血吸虫重组抗原保护性免疫力的诱导

采用日本血吸虫重组抗原加福氏佐剂免疫小鼠,攻击感染后,不仅可减少虫负荷(减虫率为29.2％—51.0％),还可降低血吸虫雌虫的产卵量(减卵率为52.1％—74.3％),抗体滴度在初次免疫后3wk即显著升高,并持续维持较高水平。结果表明,经大肠杆菌表达的日本血吸虫重组抗原能够诱导抗攻击感染的保护性免疫力,可望作为混合多价疫苗的候选组分。     

辐照旋毛虫肌肉幼虫免疫对日本血吸虫感染的保护作用

目的　观察辐照旋毛虫肌肉幼虫 (TsML)免疫小鼠对日本血吸虫攻击感染的保护效果。　方法　用60 Co照射的TsML经腹腔免疫小鼠 15只 ,另设TsML匀浆和生理盐水免疫组作为对照。在两次加强免疫后 (1次 /周 ) ,分别用日本血吸虫尾蚴攻击感染。感染后第 40d解剖小鼠 ,计算虫荷 ,并对肝组织中的虫卵和雌虫子宫内的虫卵进行计数。同时采用数字图像处理技术对成虫形态结构进行测量分析。　结果　 1)辐照TsML免疫组与生理盐水对照组比较 ,小鼠虫荷数、肝组织和雌虫子宫内的虫卵数显著减少 ;免疫小鼠体内血吸虫虫体及睾丸、卵巢发育受到明显影响 ;2 )TsML匀浆免疫组的减虫效果较差 ,减卵效果及虫体、睾丸、卵巢发育与辐照TsML免疫组相似。　结论　辐照TsML和匀浆TsML免疫均能诱导小鼠产生对日本血吸虫攻击感染的保护作用 ,且辐照TsML较匀浆TsML具有更好的保护效果。     

巢式RT-PCR分析日本血吸虫组织蛋白酶L1(SjCL1)的基因5''末端序列

目的：测定日本血吸虫组织蛋白酶L1（SjCL1)基因的5'端序列。方法：从日本血吸虫成虫中提取总RNA，以该RNA为模板，进行巢式RT－PCR，扩增SjCL1基因5'端序列。将其与pMD18-T载体连接得到含SjCL1基因5' 端序列的重组质粒，并测定上述DNA插入片段的序列。结果：通过巢式RT－PCR扩增出332bp SjCL1基因5'端序列，测序后，与报道的SjCL1基因部分序列拼接后，可得到一个编码317个氨基酸的完整开放阅读框。结论：使用巢式RT－PCR技术，扩增得到SjCL1基因的5'端序列。为进一步对其进行功能研究奠定了基础。     

三例喉兽比翼线虫病

目的 :研究 3例患者因吃未熟透的龟血及内脏而感染何种寄生虫。方法 :采用涂片法及饱和盐水漂浮法检查粪便 ,采用涂片和沉淀法检查 2 4 h痰液 ,采用支气管纤维镜 (支纤镜 )检查气管和支气管。对虫体及虫卵活体和用洋红染色制成玻片标本进行测量和鉴定。结果 :粪涂片及漂浮法均阴性 ,2 4 h痰中查见虫卵和虫体 ,支纤镜及服药后均获虫体。结论 :鉴定为喉兽比翼线虫。     

白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株基因组中CYP6基因片段的分离与鉴定

目的 获得白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株ＣＹＰ６基因家族中某个成员的一个基因片段。方法 根据家蝇ＣＹＰ６Ａ１、ＣＹＰ６Ｄ１以及致倦库蚊ＣＹＰ６Ｅ１同源区氨基酸序列,设计１对筒并引物,进行ＰＣＲ,获得与设计的细胞色素Ｐ４５０基因片段大小相符合的基因片段。将该片与ＰＵＣ１９质粒重组,并克隆至ＪＭ１０９大肠杆菌中,经筛选后测序;将推导的氨基酸序列进行同源性分析,并用ＰＣ／ＧＥＮＥ软件绘制和系统树。结果 获得了１