荧光PCR检测军团菌方法的优化及应用

军团菌病(Legionellosis)是由军团菌(Legionella)引起的一种急性呼吸道疾病[1-2].有超过20个血清型的军团菌可以引起人类疾病[3].目前军团菌检测方法主要是培养检测法[4]和针对嗜肺军团菌检测的PCR法,这两种方法在实际应用中均存在一定的局限性.     

新疆维稳民兵情绪状态心理应激应对方式的相关性研究

目的 探讨维稳民兵情绪状态、应对方式、心理应激三者间的关系,为制定有针对性的心理应激干预措施提供理论依据.方法 采用随机整群抽样法抽取832名新疆维稳民兵应用正性负性情绪量表、简易应对方式问卷和军人心理应激自评问卷进行测评分析,并使用AMOS 21.0进行路径分析.结果 维稳民兵军人心理应激自评问卷评分与简易应对方式问卷的消极应对维度分、正性负性情绪量表的正性情绪及负性情绪因子分呈显著正相关(P＜0.05或0.01).回归分析显示,维稳民兵心理应激的影响因素为负性情绪、消极应对,共解释总变异的29.1％;消极应对的影响因素为正性情绪、负性情绪,共解释总变异的10.6％.路径分析显示,负性情绪对心理应激有直接效应(路径系数为0.56),负性情绪通过消极应对对心理应激的间接效应值为0.0261,占总效应(0.5861)的4.5％;正性情绪通过消极应对间接影响心理应激,间接效应值为0.0099.结论 负性情绪、消极应对是维稳民兵心理应激的两个重要影响因素;消极应对对情绪状态与心理应激具有中介作用.     

从310例心理咨询病例分析谈健康教育者的责任

随着社会医学模式由生物医学向生物——心理——社会医学模式的转变,社会、心理致病因素对人类健康的影响,越来越为当今世界医学界所关心。预防心因性疾病,加强心理治疗在人民群众中的呼声日益提高,日益迫切。为适应客观的需要,近年来北京等一些城市相继开展了心理咨询服务。长春市凯旋医院在1988年10月开设了心理咨询门诊,至今已接诊600余人,收到很好的效果。本文     

驻疆官兵心身健康水平与职业倦怠的相关性

目的调查新疆部队官兵(以下简称"驻疆官兵")心身健康水平与职业倦怠的相关性,为维护其心理健康提供理论依据。方法采用分层整群随机抽样方法,抽取驻疆官兵1939名,进行简易军人心身健康量表和军人职业倦怠量表进行测评。结果 (1)军官心身健康总分及骨骼肌症状、心血管症状、消化症状、焦虑症状得分显著高于义务兵(P0.05或0.01);2年军龄官兵心身健康总分及消化症状、言语症状得分显著低于3~5年、≥6年军龄官兵(P0.05)。(2)驻疆官兵心身健康与职业倦怠量呈显著正相关(P0.01)。(3)自我评价、成就感、躯体化、消极怠工、人际关系进入心身健康总分回归方程,可解释"心身健康"67.0%的变异量。结论驻疆军官心身健康水平显著低于士兵,职业倦怠是影响驻疆官兵心身健康的重要因素。     

TaqMan-探针实时荧光定量PCR同时检测立克次体目中7种重要病原菌

目的 建立及优化检测立克次体目中7种重要病原菌的TaqMan-探针实时荧光定量PCR（qPCR）方法,可同步检测并明确感染类型。方法 根据普氏立克次体、莫氏立克次体和斑点热群立克次体ompB基因、恙虫病东方体groEL基因、查菲埃立克体16S rRNA基因、嗜吞噬细胞无形体gltA基因和贝氏柯克斯体com1基因序列合成引物和探针,优化反应体系及反应程序至同一方案,对该方法灵敏度、特异性和重复性等进行评价,并使用该方法对模拟样本和实际样本进行检测。结果 7种病原菌标准曲线的Ct值与模板拷贝数均呈良好的线性关系（均R²>0.990 0）,所建立方法最低检测限均为1×10拷贝数/μl且具有良好的特异性。96份蜱虫核酸提取物样本中,1份样本检出贝氏柯克斯体,3份样本检出斑点热群立克次体;80份不明原因发热患者血标本DNA中,1份样本检出恙虫病东方体,2份样本检出斑点热群立克次体。结论 本研究基于TaqMan-探针qPCR方法,将7种病原菌反应体系及反应程序优化至同一方案,克服目前不同立克次体目病原菌采用不同的反应体系和反应程序的缺点,可将临床样本中立克次体目的7种重要病原菌精确定位检测至种,明确感染病原菌类型并缩短检测时间,有助于对患者的精准诊治。     

中国嗜肺军团菌分离株脉冲场凝胶电泳分型分析以及数据库的建立

目的 对分离的262株嗜肺军团菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,初步建立中国嗜肺军团菌的PFGE分型数据库.方法 采用PFGE技术,对2004-2009年中国11个省(市)分离的嗜肺军团菌用AscⅠ酶切,BioNumerics软件分析PFGE图谱,并建立分子分型数据库.结果 262株嗜肺军团菌的PFGE图谱共分为108种不同的PFGE带型,相似性系数在16%～100%之间,通过聚类分析,可以分为差异明显的不同簇.不同省份、年份和血清型的菌株之间有交叉带型.结论 中国环境分离的嗜肺军团菌菌株基因组变异较大,同时也具有克隆化特征,且可能有多个克隆系存在.

Abstract：

Objective To analyze the molecular types of Legionella (L.) pneumophila strains isolated in China,and to develop the PulseNet-China Database of L.pneumophila.Methods Pulsed field gel electrophoresis (PFGE) was used to analyze 262 L.pneumophila strains collected from 11 provinces between 2004 and 2009 in China.Different kinds of genomic DNA in different L.pneumophila strains were isolated and separated after digesting with Asc Ⅰ.BioNumerics software was used to analysis the PFGE fingerprints.Results L.pneumophila strains isolated in China were quite different regarding their PFGE patterns.There were 108 PFGE types among the 262 strains tested in this study.The similarity value of these strains was in the range of 16%-100% and the same types were discovered in different provinces and years.Conclusion L.pneumophila strains isolated in China were with high genetic variations.There might be different clones existed in China.The development of PulseNet China Database was thus of great significance in monitoring the L.pneumophila strains in the future.     

下呼吸道感染病原体检测方法研究进展

下呼吸道感染(lower respiratory tract infection, LRTI)是常见的呼吸系统疾病,包括肺炎、慢性支气管炎等多种感染类型,以抗生素治疗为主,尽快确定下呼吸道感染的病原体并采取针对性治疗可以大大降低下呼吸道感染死亡率,因此病原体的快速检测对疾病准确诊断和及时治疗相当关键。目前下呼吸道感染病原体检测技术较多,高通量、自动化和快速检测成为其主要发展趋势。本文介绍了下呼吸道感染检测标本类型和下呼吸道感染常见及非常见病原体,并着重对目前常用的病原体检测方法尤其是多种病原体同时检测方法进行综述,旨在指导临床根据疾病采集相应的样本类型,选择适宜的检测方法,快速确定感染病原体并及时治疗。     

102株侵袭性肺炎链球菌血清型分布特征及耐药谱分析

目的 了解侵袭性肺炎链球菌菌株血清群/型分布特征和菌株耐药性情况。方法 选用本科室保存的102株侵袭性肺炎链球菌菌株(来自内蒙古、宁夏、四川及辽宁)。合成23种肺炎链球菌血清群/型特异性引物,采用多重PCR方法扩增进行初筛,扩增阳性的用荚膜肿胀方法进行复核验证。并选用24种抗生素进行药物敏感性实验。结果 102株侵袭性肺炎链球菌共分为21个血清群,主要流行血清群/型(株数由高到低)依次为19、6、14、23、35/42、34、3、22A、15、1、18、4、5、7B、8、10A、11A、13、17A、20、33F。含10株以上的是19群、6群、14群。24种抗生素中,莫西沙星、吉米沙星、头孢曲松、多西环素未发现耐药菌株。其余20种抗生素均有耐药菌株出现。耐药率大于90%的抗生素从高到低依次为:阿奇霉素、地红霉素、克拉霉素、红霉素;耐药率小于10%的依次为:万古霉素、青霉素(注射)、利奈唑胺、美罗培南、利福平、左氧氟沙星、阿莫西林/克拉维酸、头孢吡肟。结论 我国侵袭性肺炎链球菌分离株以19群、6群、14群最多见;23价肺炎疫苗覆盖血清群但不包含的血清型(6A、6C、6D、15C、23B、22A、18A、7B、17A)和非疫苗相关的13群、34群、35/42群也占有一定比例。治疗由肺炎链球菌引起的感染首选吉米沙星、莫西沙星、头孢曲松、多西环素等抗生素。