高效液相色谱法同时测定元胡止痛片中欧前胡素、延胡索乙素与异欧前胡素的含量

目的：建立元胡止痛片中欧前胡素、延胡索乙素与异欧前胡素的HPLC含量测定方法。方法：采用Agilent ZORBAX SB-C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺调pH值至6.5）（61∶39）; 检测波长：280nm; 流速：1.0ml/min。结果：欧前胡素在0.0474～0.2844μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999）; 延胡索乙素在0.0205～0.1230μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9998）,异欧前胡素在0.0750～0.4500μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.0000）,平均回收率分别为98.6%、97.5%、96.8%。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于元胡止痛片的质量控制。     

皮瓣肌皮瓣联合移植修复严重小腿软组织缺损1例

1资料与方法 1．1临床资料患者,男性,69岁,因左胫骨骨折内固定术后,钢板螺钉外露并周围皮肤溃疡和坏死13年,要求修复而入院。入院检查：创面位于左小腿,有约8cm长钢板和螺钉外露,其溃疡创面约16cm×10cm大小,溃疡周围约有3～5cm的坏死及发暗的皮肤,创面异味重,刨周肿张,且见创面下缘有菜花状肉芽生长（见彩图1）。X线片示“左胫骨骨折已愈合”,创面可疑癌变的肉芽组织病理为“炎性改变”。既往有原发性高血压病史10余年,坚持服药。检查血常规,肝、肾功能和电解质均正常范围,胸片和心电图无明显异常。     

冠心病秽浊痰阻证与血管性血友病因子的相关性研究

目的 探讨血浆血管性血友病因子(vWF)水平与冠心病秽浊痰阻证之间的关系.方法 应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)检测85例冠心病秽浊痰阻证患者、93例冠心病非秽浊痰阻证患者及89名健康对照者的血浆vWF水平.结果 血浆vWF水平冠心病秽浊痰阻证组高于冠心病非秽浊痰阻证组,亦明显高于健康对照组,3组vWF水平差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 冠心病秽浊痰阻证与血浆vWF水平升高密切相关.     

脱细胞猪皮在面部水泡型皮损创面的应用

面部位于人体的突出部位，易于烧伤、烫伤，发生率高，且烧伤后的创面患者及家属重视非凡，加之不易包扎，给治疗者带来了一定的压力。面部水泡型皮损，治疗方法不一，用药不同，到目前为止没有最好的方法，我们自2007年8月份以来，将脱细胞猪皮用于面部水泡型皮损暴露治疗，收到良好的效果，汇报如下：     

HPLC法测定元胡止痛片中欧前胡素的含量

目的建立HPLC法测定元胡止痛片中欧前胡素的含量。方法色谱柱Agilent ZORB-AX SB-C18(5μm;4.6mm×150mm),流动相为乙睛-水(60:40);检测波长300nm。结果欧前胡素在0.04~0.36μg范围内呈良好的线性关系,r=0.99997;平均回收率为98.54%(n=6),RSD为1.21%。结论本方法分离良好,结果准确。     

狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立和阳性对照的制备

目的 建立狂犬病病毒实时荧光定量PCR检测方法,制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)的假病毒颗粒阳性对照.方法 在RV的N基因保守区设计引物和探针,建立反转录实时荧光定量PCR检测方法,克隆得到噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因(MS2),将其重组到质粒pET-28b(+)中,再将RV的N基因片段重组到MS2下游,经原核表达得到RV假病毒颗粒.结果 实时荧光定量PCR检测RV重组质粒最低检测限为15拷贝/μl,重组表达质粒经原核表达可形成耐RNase的RV病毒样颗粒.结论 建立了反转录实时荧光定量PCR检测RV核酸的方法,成功构建了可耐受RNase且无传染性的RV阳性对照.     

人血管抑素A K(1-3)基因的克隆表达、纯化及活性鉴定

目的 克隆人Angiostatin K(1-3)基因,获得有活性的重组人血管抑素蛋白,为进一步开发应用奠定基础.方法 以人新鲜肝脏组织为材料,通过RT-PCR得到人Angiustatin基因的AK(1-3)片段.构建重组质粒pET30a-Angiostatin,转化表达菌Rosetta(DE3),对转化子进行诱导表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的 产物,并验证其活性.结果 获得了人Angiostatin基因AK(1-3)片段的正确序列,表达和纯化了人血管抑素蛋白,表达量占菌体总蛋白的30%,纯化后证明表达产物具有较高纯度(达到90%).结论 Anginstatin K(1-3)可在原核融合蛋白表达载体中表达,且得到有活性的目的 蛋白.     

人血管抑素A K(1-3)基因的克隆表达、纯化及活性鉴定

目的 克隆人Angiostatin K(1-3)基因,获得有活性的重组人血管抑素蛋白,为进一步开发应用奠定基础.方法 以人新鲜肝脏组织为材料,通过RT-PCR得到人Angiustatin基因的AK(1-3)片段.构建重组质粒pET30a-Angiostatin,转化表达菌Rosetta(DE3),对转化子进行诱导表达,利用Ni-NTA亲和层析纯化目的 产物,并验证其活性.结果 获得了人Angiostatin基因AK(1-3)片段的正确序列,表达和纯化了人血管抑素蛋白,表达量占菌体总蛋白的30%,纯化后证明表达产物具有较高纯度(达到90%).结论 Anginstatin K(1-3)可在原核融合蛋白表达载体中表达,且得到有活性的目的 蛋白.     

LMWH对烧伤创面微循环影响的实验研究

目的　　研究低分子肝素对烧伤创面微循环的影响。方法　通过复制豚鼠深II度烫伤模型 ,采用印度墨汁灌注的方法 ,在光镜下观察实验组和对照组烫伤后不同时相段创面印度墨汁充盈灌注情况。结果　豚鼠深II度烫伤后 ,随着时间延长创面真皮进行性缺血 ,创面加深 ,且与烫伤后皮肤微循环中微血栓形成时血流停止有关。实验组印度墨汁充盈度增加 ,与对照组比较伤后 0h无差异性 (P >0 .0 5 ) ,6h有显著差异 (P <0 .0 0 2 ) ,12h、2 4h、48h、72h各时相均有极显著差异性 (P <0 .0 0 1)。结论　低分子肝素能有效地改善豚鼠深II度烫伤后早期创面的微循环。     

癌症患者心理干预治疗在放疗过程中的作用

目的:探讨心理干预治疗在放疗过程中的作用.方法:将153例癌症患者分成干预组、对照组,分别采用Zung氏焦虑自评量表和抑郁状态量表在患者放疗前、中进行评定分析.结果:干预组放疗后抑郁分和焦虑分显著低于放疗前(P＜0.001);对照组放疗后抑郁分和焦虑分均比放疗前增高(P＜0.001).结论:对癌症患者在放疗前及放疗过程中进行心理干预治疗有十分重要的作用.