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背景:前列腺素E2是蛋白酶激活受体信号转导通路中关键递质之一,在人胚肺成纤维母细胞的收缩、增殖和趋化运动中发挥重要的调节作用。但成纤维细胞三维立体培养过程中,蛋白酶激活受体对前列腺素E2释放的调节作用尚不清楚。
目的:观察在三维立体培养的人胚肺成纤维母细胞过程中,蛋白酶激活受体1和蛋白酶激活受体2对前列腺素E2释放的调节作用。
方法:自大鼠尾腱提取Ⅰ型胶原。体外培养人胚肺成纤维母细胞,应用免疫印迹法测定蛋白酶激活受体1、蛋白酶激活受体2的表达。将人胚肺成纤维母细胞包裹在含培养基的Ⅰ型胶原中漂浮培养作为体外组织重构模型,即人胚肺成纤维母细胞三维立体培养,分别应用蛋白酶激活受体1及蛋白酶激活受体2受体激动剂凝血酶、胰蛋白酶、SLIGKV-NH2、TFLLR-NH2刺激人胚肺成纤维母细胞,ELISA法测定培养上清液中前列腺素E2的含量。
结果与结论:蛋白酶激活受体1和蛋白酶激活受体2表达于三维立体培养的人胚肺成纤维母细胞。基础状态下三维立体培养的人胚肺成纤维母细胞可释放前列腺素E2;蛋白酶激活受体1非选择性受体激动剂凝血酶、蛋白酶激活受体2非选择性受体激动剂胰蛋白酶和蛋白酶激活受体1选择性受体激动剂SLIGKV-NH2均显著刺激前列腺素E2 产生(P < 0.01),而蛋白酶激活受体2选择性受体激动剂TFLLR-NH2呈剂量依赖地抑制前列腺素E2的释放(P < 0.01)。结果提示蛋白酶激活受体1和蛋白酶激活受体2参与调节三维立体培养的人胚肺成纤维母细胞前列腺素E2的释放。 相似文献
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背景:肺成纤维细胞不但是肺组织的结构支持细胞,还能够通过增殖、收缩、趋化及分泌细胞外基质等多种功能在肺组织的炎症损伤-修复过程中发挥关键作用。
目的:观察原代培养的人肺成纤维细胞在胰蛋白酶或糖皮质激素作用下增殖特性与骨架蛋白表达的变化。
方法:采用人肺成纤维细胞体外培养,胰酶处理24 h,终浓度分别为0,0.5,1.0,5,10 mg/L胰酶;地塞米松处理72 h,在有血清培养条件下进行,浓度范围10-9-10-6 mol/L。MTT法测定成纤维细胞增殖情况;免疫印迹方法测定细胞波形蛋白和肌动蛋白的表达。
结果与结论:胰蛋白酶在低浓度(0.1-0.5 mg/L)时刺激肺成纤维细胞增殖;而较高浓度(1-10 mg/L)明显抑制细胞生长。地塞米松对肺成纤维细胞增殖作用的影响不明显。胰蛋白酶显著上调肺成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白的表达,但对波形蛋白的表达无明显影响;地塞米松(10-9-10-6 mol/L)显著抑制波形蛋白的表达。结果表明在慢性阻塞性肺病等支气管肺慢炎症性疾病的发病过程中,胰蛋白酶和糖皮质激素可以通过参与成纤维细胞增殖和骨架蛋白的表达发挥作用。 相似文献
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醛固酮促进大鼠肺组织胶原的合成 总被引:7,自引:0,他引:7
利用肺组织切片与醛固酮(Aldosterone,ALD)共同孵育,观察ALD不同孵育浓度及孵育时间对^3H-脯氨酸(^3H-Proline)掺入量的影响,并观察正常及纤维化肺组织^3H-proline掺入量的差别。对正常大鼠肺组织,无ALD时,^3H-proline掺入量在4h至8h范围内无明显变化;^3H-proline掺入量与ALD呈剂量和时间依赖性增加关系。纤维化组动物肺组织^3H-proline掺入量较正常组增加,而ALD卵育使^3H-proline掺入量进一步增加,且2周纤维化组^3H-proline掺入量的增加程度最大。ALD能促进肺组织肺原合成,并且肺纤维化大鼠肺组织对ALD的反应性增加,ALD在肺纤维化的发生中可能起一定作用。 相似文献
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血管内皮生长因子基因对兔左冠状动脉前降支结扎心肌侧支循环建立的影响 总被引:8,自引:2,他引:6
目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)基因治疗心肌缺血是否有效。方法:构建真核表达载体质粒pcDNA3/VEGF121,然后将其直接注入兔左冠状动脉(冠脉)结扎的心肌;观察VEGF基因对缺血心肌侧支循环建立的影响。结果:在冠脉左前降支结扎48小时时,血清中谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、磷酸肌酸激酶活性,VEGF基因组分别为(226.5±87.5)U/L,(3320.5±392.2)U/L,(530.0±48.3)U/L;与对照组〔分别为(202.4±107.9)U/L,(3180.6±304.7)U/L,(549.2±45.6)U/L〕比较相差不显著,P均>0.05。结扎2周时,VEGFmRNA表达则VEGF基因组明显高于对照组。心室前壁缺血区单位面积内的血管数VEGF基因组和对照组2周时分别为(48±11)条和(28±7)条,4周时为(108±29)条和(36±12)条,P<0.01。电镜观察以VEGF基因组血管增生明显,呈束状。结论:VEGF基因导入缺血心肌后,不仅表达,而且具有促进血管增生、增加侧支循环的生物效应 相似文献
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本文报道1例28岁女性患者, 临床以间断咯血、咳嗽、咳痰起病。实验室检查未见血象及炎症指标的升高, 痰病原学无阳性发现。胸部影像学示右肺中叶及下叶支气管扩张伴感染, 右侧胸膜增厚。右下叶背段于支气管镜下行肺泡灌洗, 支气管肺泡灌洗液二代测序提示鸟胞内分枝杆菌。抗分枝杆菌治疗后患者症状较前好转, 影像学可见炎症范围较前缩小。进一步寻找支气管扩张原因, 患者体型高瘦, 四肢细长, 心脏彩超提示主动脉窦增宽, 完善外周血基因检测发现FBN1基因变异, 变异位点为c.4349G>A, 综上考虑马凡综合征。 相似文献