注射用重组人干扰素β1b的分离纯化及质量研究

目的:研制注射用重组人干扰素β1b(rhIFN-β1b)并对其质量进行鉴定.方法:采用高压匀浆破菌、离心分离包涵体、有机抽提、酸沉淀、Sephacryl S-200、Sephadex G-75等进行分离纯化,通过各种方法对终产品进行鉴定.结果:纯化的rhIFN-β1b比活性平均为2.59×107IU·mg-1,纯度超过99%,复性纯化后平均活性回收率为51.89%,其他各项技术指标均符合质量控制标准.结论:建立了大规模制备rhIFN-β1b的纯化工艺,研制出了符合规程要求的注射用rhIFN-β1b纯品,为临床研究奠定了基础.     

载体蛋白研究进展

现代生物技术的飞速发展,使传统的疫苗生产方式发生了根本的变化.疫苗研究领域变得异常活跃,从而使新型载体蛋白不断被发现,其作用机制得到全面研究.寻找安全、有效的载体蛋白是目前疫苗领域的课题之一.近年来的初步研究结果为载体蛋白的应用展现了广阔的前景.此文阐述了载体蛋白的作用机制和几种常用的载体蛋白.     

强效佐剂研究进展

许多佐剂具有炎症特性,缺乏特异性,并且具有毒性,因而其应用受到了限制.近年来,随着免疫学的发展,出现了大量潜在的新型佐剂,它们能以更加可控和特异的方式调节免疫应答,这将对现行及今后的疫苗策略产生重要影响.此文对于能靶向细胞、受体或信号通路等特定免疫组分的候选佐剂做一综述.     

重组人乳头瘤病毒16型L1蛋白在昆虫细胞中的表达及条件优化研究

目的 利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达人乳头瘤病毒16型(human papillomavirus 16,HPV16)L1蛋白,并确定含编码HPV16 LI蛋白基因杆状病毒的扩增及其相应目的 蛋白表达的最佳条件.方法 在不同感染复数(MOI)、不同时间条件下扩增病毒,以蚀斑试验检测病毒滴度,研究获得最高滴度病毒的最适条件;通过对相应蛋白进行表达条件的优化,以蛋白印迹法比较蛋白表达量,确定目的 蛋白表达的最佳条件.结果 确定了扩增含编码HPV16 L1蛋白基因杆状病毒及表达相应蛋白的最佳条件,即在sf9细胞系中,以MOI值为0.10接种病毒,扩增48 h后收获病毒;以细胞密度为(2-3)×106/ml,MOI值为10.0接种病毒,悬浮表达72 h收获目的 蛋白.蛋白印迹法检测结果证实,表达的目的 条带可与HPV16 LI蛋白的单克隆抗体发生反应.结论 建立了在昆虫细胞中表达HPV16 L1蛋白的最适条件,为下一步的纯化及免疫原性研究奠定了基础.     

载体蛋白研究进展

现代生物技术的飞速发展,使传统的疫苗生产方式发生了根本的变化.疫苗研究领域变得异常活跃,从而使新型载体蛋白不断被发现,其作用机制得到全面研究.寻找安全、有效的载体蛋白是目前疫苗领域的课题之一.近年来的初步研究结果为载体蛋白的应用展现了广阔的前景.此文阐述了载体蛋白的作用机制和几种常用的载体蛋白.     

不同佐剂对随机组合多表位恶性疟疾疫苗M. RCAg-1的免疫原性及体外抑虫率影响的研究

目的 研究弗氏佐剂及3种人用佐剂[Al(OH)3、Montanide ISA720、Montanide ISA51]对重组多表位蛋白M.RCAg-1(malaria random constructed antigen-1)在BALB/c小鼠及新西兰大白兔体内产生免疫效果的影响.方法 以弗氏佐剂、Al( OH)3佐剂、Montanide ISA720以及MontanideISA51佐剂分别与M.RCAg-1蛋白进行配伍,分别免疫BALB/c小鼠及新西兰白兔;采用ELISA法检测M.RCAg-1蛋白及其所组成各个表位特异的血清IgG含量;间接荧光免疫试验分析不同配伍组免疫血清对天然疟原虫抗原的识别;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测特异性鼠T淋巴细胞的活化;另借助生物传感器评价抗原与不同佐剂配伍组血清的亲和力,并用体外生长抑制试验(GIA)对恶性疟原虫的体外生长的影响进行评价.结果 不同佐剂可诱发不同水平的抗体滴度,Montanide ISA51佐剂配伍组的效果与弗氏佐剂组最为接近,并可使蛋白包含的11个表位肽能都较好诱发出特异性抗体,可有效激发以IFN-γ为主的细胞免疫应答,而且Montanide ISA51佐剂组免疫产生的抗体和M.RCAg-1蛋白质的亲和力高于其他两种佐剂;而Montanide ISA720佐剂和Al(OH)3佐剂免疫组不能诱发小鼠产生显著的IFN-γ反应(P＞0.05).Montanide ISA51配伍蛋白质免疫产生的IgG在浓度为2mg/ml时对3D7和Dd2的抑制率分别为60%和100%,Al(OH)3佐剂组免疫兔血清IgG体外抑虫率较低(10%左右),而Montanide ISA720佐剂免疫组血清不能有效抑制疟原虫生长.结论 通过比较3种人用佐剂和弗氏佐剂对BALB/c小鼠和新西兰兔的免疫辅助效能显示,Montanide ISA51佐剂能很好的辅助M.RCAg-1蛋白疫苗诱发动物体内的体液免疫和细胞免疫应答,可做为疫苗的候选佐剂之一.     

载体蛋白研究进展

现代生物技术的飞速发展,使传统的疫苗生产方式发生了根本的变化.疫苗研究领域变得异常活跃,从而使新型载体蛋白不断被发现,其作用机制得到全面研究.寻找安全、有效的载体蛋白是目前疫苗领域的课题之一.近年来的初步研究结果为载体蛋白的应用展现了广阔的前景.此文阐述了载体蛋白的作用机制和几种常用的载体蛋白.     

苯巴比妥治疗小儿高热惊厥的临床疗效及对脑神经因子的改善分析

目的：探讨苯巴比妥治疗小儿高热惊厥的临床疗效及对脑神经因子的改善效果。方法：选择2020年8月—2022年8月我院收治的小儿高热惊厥患儿108例，随机分为两组，各54例。对照组行地西泮治疗，试验组在此基础上给予苯巴比妥治疗。两组均持续治疗1周，对比两组临床疗效、治疗前后免疫功能、脑神经因子水平变化及并发症发生率、复发率情况。结果：试验组临床总有效率较对照组高(P<0.05);治疗1周后试验组CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平较对照组高，CD8⁺、NSE、S-100β、BDNF水平较对照组低(均P<0.05);两组并发症总发生率、疾病复发率相比，差异无统计学意义(P>0.05)。结论：苯巴比妥可有效控制小儿高热惊厥症状，联合地西泮可进一步提升患儿免疫功能，减轻脑损害。