小鼠急性柯萨奇B_3病毒性心肌炎电生理的表现

用常规细胞内微电极技术及实时微机数据处理系统,对柯萨奇B_3病毒(CB_3V)感染的BALB/c小鼠(早期7d、14d)作心肌电生理参数及动作电位波形研究。发现在病毒感染早期,心肌细胞的静息电位(RP)、动作电位振幅(APA)、超射(Os)、O相最大上升速率(Vmax)均数值除感染7d组Os值无差异,其余均显著低于同期正常对照组:而动作电位时程APD50和APD90均数值除感染14d组APD90无差异外,均显著延长。动作电位异常波形多达十种,占感染组的65％以上。提示CB_3V感染对心肌造成的损害,可产生多种心电活动异常,并成为形成各种形式心律失常的基础。     

β-榄香烯、丝裂霉素C及热休克对小鼠H22肝癌细胞HSP 70表达的影响

为了进一步阐明肿瘤疫苗的特异性主动免疫治疗机理,采用β-榄香烯、丝裂霉素C(MMC)及热休克在体外单独及复合处理小鼠H22肝癌细胞,经间接免疫荧光染色,流式细胞仪分析,结果显示.上述处理因素均能明显地诱导H22细胞表达HSP70(以阳性率增高表示).在单因素中,以β-榄香烯效果最佳,阳性率为69.16%,MMC次之;在复合因素中.以β-榄香烯与MMC复合处理的效果最佳,阳性率为95.13%;三种因素联合处理的效果为85.34%.提示瘤苗的抗肿瘤免疫作用是与HSP70表达程度有关.     

AG490阻断STAT3信号通路对人胶质瘤细胞增殖和周期的抑制作用

目的 探讨AG490阻断STAT3信号通路对人胶质瘤细胞增殖和细胞周期的影响.方法 用不同浓度的AG490作用于体外培养的人胶质瘤细胞株U87、U251;用免疫荧光细胞化学染色观察肿瘤细胞STAT3和激活态p-STAT3的表达;Western blot验证AG490对STAT3信号通路的阻断情况;Sulforhodamine B染色观察肿瘤细胞增殖的改变;流式细胞技术分析细胞周期的变化. 结果 STAT3蛋白在胶质瘤细胞胞浆中表达,而P-STAT3则在细胞核中表达.AG490作用胶质瘤细胞后可使p-STAT3表达下降,而STAT3表达不受影响.AG490阻断STAT3信号通路后,胶质瘤细胞的增殖受到显著抑制,该抑制作用与剂量及时间存在一定关系.AG490作用后胶质瘤的细胞周期出现阻滞.结论 应用AG490阻断STAT3通路能够导致胶质瘤细胞增殖的抑制和细胞周期的阻滞.针对STAT3信号通路的研究可能为胶质瘤的治疗提供更加有效的方法.     

干扰素α治疗肝细胞癌的若干问题与对策

肝细胞癌(以下简称肝癌)的发生率在世界范围内都呈上升趋势;虽经数十年的努力,5年总体生存率并无显著提高,绝大多数患者仍在1年内死亡.在我国,由于庞大的乙型肝炎感染人群,作为其转归之一,肝癌位列所有癌症死亡原因的第二位.     

阻断信号传导和转录活化因子3对胶质瘤细胞侵袭性特征的影响

目的 观察用AG490阻断人胶质瘤细胞株中信号传导和转录活化因子3(STAT3)信号通路对肿瘤细胞侵袭性特征的影响.方法 体外培养的人胶质瘤U251、U87细胞株,应用AG490阻断STAT3信号通路;以Western blot检测STAT3和其激活状态p-STAT3蛋白在AG490作用前后的表达情况;通过Transwell细胞侵袭实验了解肿瘤细胞体外侵袭能力的变化;用明胶酶谱法检测肿瘤细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9的表达;用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)了解血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的变化.结果 AC490作用后胶质瘤细胞内p-STAT3表达下降,其程度随AG490浓度升高而增强,差异有统计学意义(P<0.01).而STAT3蛋白的表达不受AG490影响,与对照组比较差异无统计意义(P>0.05),说明AG490的作用机制是通过抑制STAT3蛋白的磷酸化激活过程从而阻断STAT3信号通路.AG490作用后,U251细胞的体外侵袭力下降,差异有统计学意义(P<0.01).STAT3信号通路阻断后,胶质瘤细胞MMP-2、MMP-9的表达下调,差异有统计学意义(P<0.01).VEGF mRNA表达也相应下降(P<0.05).结论 应用AG490阻断STAT3信号通路能够抑制胶质瘤细胞的体外侵袭能力,STAT3信号通路有可能成为控制胶质瘤侵袭性生长的有效靶点.     

趋化因子受体4核阳性以及血管内皮生长因子C和细胞角蛋白19的表达水平与肝细胞癌淋巴结转移风险的关系

目的 探讨趋化因子受体4(CXCR4)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)和细胞角蛋白19(CK-19)蛋白在肝细胞癌(HCC)肿瘤组织中的表达,以及与淋巴结转移和患者预后的关系.方法 收集123例术后出现淋巴结转移和145例术后无淋巴结转移的HCC石蜡包埋组织,制备组织芯片;采用免疫组化半定量法检测CXCR4、VEGF-C和CK-19蛋白的表达水平,并分析3种蛋白的表达与HCC淋巴结转移和其他临床病理因素之间的关系.结果 T分期、细胞核CXCR4蛋白的表达、VEGF-C蛋白的表达和CK-19蛋白的表达是HCC发生淋巴结转移的独立因素.细胞核CXCR4蛋白、VEGF-C蛋白高表达和CK-19蛋白阳性能预测HCC的淋巴结转移.123例有淋巴结转移的HCC患者中,细胞核CXCR4蛋白高表达和低表达患者的中位生存时间分别为15.1和24.5个月;VEGF-C蛋白高表达和低表达患者的中位生存时间分别为15.1和31.1个月;CK-19蛋白阳性和阴性患者的中位生存时间分别为12.0和19.2个月.细胞核CXCR4蛋白、VEGF-C蛋白高表达和CK-19蛋白阳性患者的预后均明显差于相应的低表达组和阴性组(均P<0.05).有无门脉癌栓、T分期、细胞核CXCR4蛋白和VEGF-C蛋白的表达以及CK-19蛋白的表达是伴淋巴结转移的HCC患者的独立预后因素.结论 细胞核CXCR4蛋白、VEGF-C高表达和CK-19蛋白阳性与HCC淋巴结转移和预后差有关,并可作为HCC淋巴结转移的独立预后因素.     

酪丝缬肽诱导高转移性肝癌细胞HCCLM3凋亡及机制研究

目的：观察酪丝缬肽（tyroservatide,YSV）诱导高转移性人肝癌细胞HCCLM3的凋亡,分析YSV对肿瘤细胞凋亡相关基因Bax与Bcl-2的影响。方法：建立人肝癌细胞HCCLM3的体外培养体系,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测YSV对体外培养的HCCLM3的增殖抑制作用,流式细胞仪检测对照组与YSV剂量组的凋亡率,实时定量PCR法检测YSV对肝癌细胞中Bax与Bcl-2 mRNA表达,Western blotting检测YSV对Bax与Bcl-2蛋白表达的影响。结果：YSV可显著地抑制肝癌细胞HCCLM3的生长,当药物剂量10mg·L-1,作用72h时,抑制率为41.34%（P〈0.05）。YSV不同浓度组随着药物作用时间的延长肝癌细胞凋亡率呈升高趋势。实时定量PCR结果显示YSV能上调促凋亡基因Bax mRNA的表达,同时下调凋亡抑制基因Bcl-2 mRNA的表达。Western blotting在蛋白水平上进一步证实了实时定量PCR的结果。结论：YSV可在基因及蛋白水平上调促凋亡基因Bax的表达,同时下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达,进而实现其诱导肝癌细胞HCCLM3的凋亡。     

补肾健脾方抑制裸鼠高转移原位肝癌切除术后肿瘤复发以及对索拉非尼的增效减毒作用

  目的：探究补肾健脾方对人肝癌高转移原位移植瘤裸鼠切除术后肿瘤复发的影响以及对索拉非尼的增效减毒作用  方法：剥取人肝癌高转移原位移植裸鼠模型(HCCLM3)肝癌瘤体,切1 mm×1 mm×1 mm大小,原位植入实验裸鼠肝脏内,术后常规无菌饲养。术后第15天开腹行新生肿块切除术,术后同前饲养。将实验裸鼠分为补肾健脾方组(A组)、索拉非尼组(B组)、联合用药组(C组)、模型对照组(D组),每组7只;于第2次手术后第3天开始,根据裸鼠体质量给予相应干预,均灌胃给药,连续给药4周,每天1次。记录给药前1天、给药后第7天、第14天、第21天、第28天(D0、7、14、21、28)裸鼠体质量以及给药后每天饲料消耗量,共28 d。最后一次给药结束48 h后处死裸鼠,采集血液、瘤体标本,测量瘤重、瘤体体积,并检测血常规指标,包括白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)  结果：①瘤重和瘤体体积:与D组比较,A、B、C组均能显著减轻复发瘤体重量并缩小体积(P<0.001);C组比A组更能降低瘤重及其体积(P<0.05)。②鼠重:与A组比较,B、C、D组差异均有统计学意义(P<0.05);与D0比较,D7、D14、D21、D28各组裸鼠体质量均有不同程度的降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体质量下降值从小到大依次为A组(0.60±1.75)g,C组(1.29±1.63)g,D组(1.57±1.84)g,B组(2.14±2.40)g。③饲料消耗量:A组、B组、C组和D组每组裸鼠饲料消耗总量组间比较差异显著(P<0.001);与A组比较,B、C、D组差异有统计学意义(P<0.001);D组与C组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后A组裸鼠饮食量呈上升趋势,C组呈缓慢上升后稳步下降趋势,B和D组饲料消耗量减少最为明显。④血常规:各项指标4组组间比较均有统计学差异(P<0.05)。血象4个指标可见,A组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05),WBC、RBC、HGB水平A组均略高于D组,A组与B、C两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);各项指标B组水平最低,相较于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05),C组指标水平均略高于B组(P>0.05)  结论：补肾健脾方能够抑制肝癌复发瘤体生长,增强机体对索拉非尼的耐受程度,减轻其对血液系统的毒性反应,稳定机体日常饮食摄取和体质量,对索拉非尼有增效减毒作用。     

磺化异麦芽寡聚糖对肝癌细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的：探讨磺化异麦芽寡聚糖（isomalto oligosaccharide sulfate,IMOS）对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法：分别采用细胞计数、荧光面积和流式细胞仪评价IMOS对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。结果：在体外,IMOS能显著抑制HCCLM3、HepG2、Be-l7402和HCCLM3-RFP细胞的增殖并诱导细胞凋亡。结论：IMOS是一种潜在的抗肝癌药物,可在人肝癌裸鼠移植模型中进一步开展抗肝癌疗效的评价。