济南市柯萨奇病毒A组6型手足口病流行病学特征分析

摘要:目的　分析济南市柯萨奇病毒A组6型手足口病（HFMD）的流行病学特征,为该病的诊治与防控提供科学依据。方法　选取2013年济南市临床诊断为HFMD的病例为对象,采集患者发病1周内的粪便、咽拭子等标本,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法进行病原学鉴定;对判定为柯萨奇病毒A组6型（CVA6）的手足口病确诊病例,采用描述流行病学方法进行流行病学特征分析。结果　2013年接受病原学检测的HFMD患儿共计848例（包括19例重症病例）,670例检测到肠道病毒（79.01%）。CVA6阳性141例（包括2例重症）,占阳性病例的21.04%（141/670）,在HFMD确诊病例的病原构成中居第3位;其中包括2起暴发、7起聚集性手足口病疫情。141例感染CVA6的HFMD患儿中,男女比例为1.71∶1（89/52）;病例年龄主要集中于3岁以下儿童（73.76%）,尤其是1岁以下患儿（26.95%）,两例重症病例均不到1岁;全市各县（市、区）全年均有发病,流行高峰期集中于7-11月（69.59%）。结论　CVA6是手足口病的重要病原体之一,可引起重症、暴发及聚集性疫情,应加强监测与研究。     

济南市急性脑膜炎／脑炎症候群监测病例相关病毒特异性抗体检测结果分析

急性脑膜炎／脑炎症候群（AMES）是一组严重危害人类健康、引起急性中枢神经系统损害的感染性疾病。起病急，病程凶险，病死率高，常留有严重后遗症，多发生于〈15岁儿童。     

健康6月龄内儿童肺炎链球菌携带状况及耐药特征分析

目的 了解济南地区健康6月龄内儿童鼻咽部肺炎链球菌携带血清型及耐药特征,为肺炎球菌疫苗推广接种提供数据。方法 2019年11月—2020年4月采集济南地区216例健康6月龄内儿童鼻咽拭子,经分离培养获得疑似肺炎链球菌菌株;利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和奥普托欣敏感试验鉴定后,采用多重PCR方法明确肺炎链球菌血清型;进一步采用微生物药敏分析仪进行药物敏感性检测。结果 216例健康6月龄内儿童肺炎链球菌携带率为5.1%(11/216),共携带7种血清型：15B、23F、6B、8、18C、19F和13。13价肺炎球菌多糖结合疫苗血清型覆盖率为54.5%,23价肺炎球菌多糖疫苗覆盖率为90.9%。19种抗生素中红霉素和阿奇霉素耐药率为100.0%;耐药率80.0%以上的有四环素、克林霉素、甲氧苄胺嘧啶/磺胺甲噁唑;头孢呋辛和青霉素(口服)的耐药率超过50.0%。万古霉素、利奈唑胺、左氧氟沙星、氯霉素和莫西沙星未发现耐药菌株。11例儿童鼻咽部肺炎链球菌分离株显示多重耐药,耐药种类3～6种。结论 济南地区健康6月龄内儿童鼻咽部定植的肺炎链球菌具有多种血清型,且抗生素耐药现象较严重。     

2009-2013年济南地区重症手足口病病原学及流行病学分析

] 目的了解2009-2013年济南地区重症手足口病(HFMD)病原及流行特征,为防控提供科学依据。方法对辖区哨点医院送检的138例重症HFMD病例标本,应用RT-PCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)、非EV71和CVA16的其它肠道病毒(EV);并采用描述流行病学方法对重症HFMD病例进行流行病学分析。结果138例重症HFMD病例中,有132例感染了肠道病毒,阳性率为95.65%。其中感染EV71的有114例,占阳性病例的86.36%;感染CVA16的有9例 (6.82%),感染其他EV的9例 (6.82%)。HFMD重症病例呈散发,主要集中于5~8月份 (74.64%),病例人群男性明显高于女性(х²=48.75, P<0.01),其中3岁以下幼儿是重症病例发生主要年龄段 (84.06%)。结论重症HFMD具有明显的人群特征,EV71是重症及死亡病例的主要病毒类型;应关注高危人群,早期识别重症并及时干预治疗是降低病死率的关键。     

2015年济南市环境中禽流感病毒监测与分析

目的 通过对济南市涉禽环境禽流感病毒监测,了解H5、H7和H9亚型禽流感病毒在外环境分布情况,为禽流感的防控提供科学依据。方法 2015年按季度采集济南市3类涉禽场所不同种类环境样本1 260份,采用实时荧光定量PCR法检测禽流感病毒核酸,使用Epi Info统计分析数据。结果 甲型流感病毒(Influenza A virus, FluA)在活禽农贸市场和大型家禽养殖场阳性率分别为29.67%和2.86%,集中散养户未检出FluA,3类场所检出率差异有统计学意义(χ2 = 55.77,P ＜ 0.001)。活禽农贸市场H9和H5亚型检出率分别为16.11%和6.67%,未检出H7亚型,3种亚型检出率差异有统计学意义 (χ2 = 18.18,P ＜ 0.001)。FluA在案板涂抹物、清洗禽类污水、禽类饮水、笼具涂抹物和禽粪检出率分别为50.00%、37.90%、20.66%、13.21%和13.11%,不同种类标本FluA的检出率差异有统计学意义(χ2 = 54.69,P ＜ 0.001)。采样季度对FluA检出率差异无统计学意义(χ2 = 0.53,P ＞ 0.05)。结论 济南市环境中存在H5和H9亚型禽流感病毒,以H9亚型为主;活禽农贸市场是感染禽流感的危险场所。应加大对活禽农贸市场的消毒力度,加强对禽流感病毒的持续监测。     

2010年济南地区人肠道病毒71型VP1区基因特征的分析

[目的]研究济南地区肠道病毒71型（EV71）的基因特征。[方法]对2010年济南地区手足口病病人的粪便、咽拭子等标本,通过RT—PCR扩增EV71VP1基因片段;选取EV71阳性的18株进行VP1全基因序列测定,用DNAS—TAR、Mega．4．0软件进行同源性分析,并构建系统进化树。[结果]与EV71A型和B型代表株亲缘性较远,核苷酸（氨基酸）同源性分别为81．8％～82．7％（83．7％～85．ooA）和94．3％～94．9％（97．3％～97．6％）;与C型代表株亲缘性较近,核苷酸（氨基酸）同源性为87．5％～99．1％（98．3％～100．0％）;18株EV71之间在VP1区核苷酸和氨基酸水平上有一定差异,同源性分别为97．1％～100．0％和99．3％～100．0％。构建系统进化树表明,18株EV71与C4亚型处于同一簇,属EV71型C4基因亚型。[结论]20LO年济南地区流行的EV71属肠道病毒71型属C4基因亚型。     

济南市2008-2011年急性脑膜炎/脑炎综合征监测病例乙脑IgM抗体检测结果分析

目的了解济南市急性脑膜炎/脑炎综合征(acute meningit is/encephalitis syndrome,AMES)监测病例中流行性乙型脑炎病毒(japanese encephalitis virus,JEV)感染情况,探索其流行特征、发病情况,为科学防控乙脑疫情和制定防制策略提供依据。方法选取济南市辖区内省、市、县级医院各2所作为哨点监测医院,收集2008-2011年AMES病例血清和脑脊液样本,采用酶联免疫吸附试验检测流行性乙型脑炎病毒IgM抗体。将检测结果等数据录入AMES项目数据库(Epi Data),并应用Epi Info进行统计学分析。结果 2008-2011年共检测AMES监测病例1 829例,其中86.77%(1 587/1 829)和70.53%(1 290/1 829)的病例分别采集了血清和脑脊液样本,检出乙型脑炎病毒IgM抗体阳性病例229例,总阳性率为12.52%;血清和脑脊液样本抗体阳性检出率分别为10.78%(171/1 587)和8.92%(115/1 290);经统计学分析,地区间血清阳性检出率差异有统计学意义(χ2=9.99,P<0.01)。男性病例多于女性,男性病例1 179例,占64.46%,女性病例650例,占35.54%,男女性别比为1.81∶1;全年均有发病,但以7～10月为发病高峰;从年龄组看,70.42%(1 288/1 829)的病例数为<15岁年龄组,其检出阳性数占总阳性数的62.45%(143/229)。血清检测<15岁年龄组与15岁以上年龄组比较差异有统计学意义(χ2=6.18,P<0.05);各年龄组两两比较差异有统计学意义(χ2=14.58,P<0.05)。结论济南市乙脑IgM抗体阳性病例占AMES监测病例的12.52%,是引起AMES病例的主要病原体,应加强实验室鉴别检测,使乙脑与AMES中其他病种区分开来,为疾病预防和临床诊治提供重要依据,以减轻社会和病人家庭的疾病负担。     

人PCAN1基因启动子的克隆及其上游调控区域的鉴定

目的克隆人前列腺癌基因1（PCAN1）5′上游2.6?kb启动子片段,构建pGL3 p2.6?kb载体, 测定其启动子活性,初步鉴定该片段内的DNA调控区域。方法采用PCR法从人基因组DNA中扩增PCAN1基因5′上游2.6?kb启动子片段,并构建到荧光素酶报道基因载体pGL3 basic中,构成pGL3 p2.6?kb;瞬时转染前列腺癌细胞LNCaP,通过双荧光素酶活性检验测定PCAN1启动子活性。 使用Erase a system对pGL3 p2.6kb载体中2.6?kb片段进行一系列5′侧翼缺失,产生12个缺失体,分别瞬时转染LNCaP细胞,通过检测荧光素酶的活性观察缺失突变对PCAN1启动子活性的影响。结果克隆的PCAN1 2.6?kb启动子片段经测序鉴定正确无误; pGL3 p2.6?kb转染LNCaP细胞后,双荧光素酶活性测定结果显示2.6?kb片段具有明显的启动子活性;5′缺失突变分析显示,PCAN1基因上游-1?599?bp?至-1?541?bp、-347?bp至-84?bp的缺失,与2.6?kb?片段相比,启动子活性分别升高2.24倍和2.53倍,-1?541?bp?至-1?226?bp的缺失,与2.6?kb片段相比,启动子活性降低2.11倍。结论 克隆的人PCAN1基因5′上游2.6?kb片段具有较强的启动子活性,PCAN1基因上游2.6?kb区域内分别存在2个负调控区和1个正调控区。