2,3-吲哚醌抑制人神经母瘤细胞增殖

运用台盼蓝拒染法测定人神经母瘤细胞(SH-SY5Y细胞)生长曲线,Hoechst33258核染色形态学检测细胞凋亡,流式细胞仪检测2,3-吲哚醌对SH-SY5Y细胞凋亡率的影响.结果2,3-吲哚醌作用48 h后开始抑制SH-SY5Y细胞生长,并且细胞核出现核裂解、浓缩等典型凋亡形态学改变,凋亡率升高,诱导细胞凋亡呈现时间和剂量依赖关系.提示2,3-吲哚醌可用于肿瘤的治疗.     

术中腿部按摩对预防血管外科患者下肢深静脉血栓形成的作用

目的探讨术中腿部按摩对预防血管外科患者下肢深静脉血栓(deep venous thrombosis,DVT)形成的作用效果。方法根据计算机产生随机数将94例患者分为对照组46例,实验组48例。对照组手术前后实施常规护理,实验组在对照组基础上,术中实施腿部按摩,观察和比较两组患者DVT发生情况。结果实验组患者DVT发生率为2.08%(1/48),对照组为15.22%(7/46),两组比较,χ2=3.654,差异有统计学意义(P0.05)。结论通过预防前移,在术中对患者实施腿部按摩,能有效地降低血管外科患者DVT的发生。     

脑卒中病人Na^＋—K^＋—ATPase活性及SOD水平检测

目的 探讨脑卒中的发病机制及其诊断参考指标。方法 采用化学比色法及邻苯三酚自氧化法对３４例脑卒中病人和３１例正常人红细胞（ＲＢＣ）膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性及ＲＢＣ内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）水平进行了测定。结果 脑卒中病人ＲＢＣ膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性及ＲＢＣ内ＳＯＤ水平显著低于正常对照组（ｔ＝３．３１０，Ｐ〈０．０１，ｔ＝２．４６２，Ｐ〈０．０５）。结论ＲＢＣ膜Ｎａ＾＋－Ｋ     

hTERT转录调控区克隆及在人癌细胞的转录特异性分析

目的　通过克隆人癌细胞中端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因上游转录调控区并观察其在不同人癌细胞和正常细胞中的转录活性 ,探讨人hTERT基因在细胞癌变中的激活机制。方法　用PCR方法克隆HeLa和PG癌细胞hTERT基因转录调控区 ,并进行DNA序列测定 ;将转录调控区重组于荧光酶报告载体 ,瞬时转染人癌细胞HeLa、PG、2 93和正常人二倍体细胞 2BS后 ,测定荧光酶活性以确定调控区转录活性。结果　于人HeLa和PG癌细胞分别克隆hTERT基因转录起始点附近 6 36bp(- 5 31～ 90 )和 95 0bp(- 5 31～ 40 4 )的转录调节区 ,其序列与GenBank人hTERT启动子序列相同。将两转录调控区分别重组于荧光酶报告载体pGL2 ,得到pGL2 6 36和pGL2 95 0 ,并同时构建了pGL2 X(- 5 31～ - 2 72 )和pGL2 S (第一内含子区 )。瞬时转染细胞后发现 :pGL2 6 36和pGL2 95 0在癌细胞中的转录活性明显增高 ,而在人二倍体 2BS细胞中几无转录活性。重组体pGL2 S和pGL2 X在端粒酶阳性肿瘤细胞中的转录活性明显降低 ,pGL2 S的转录活性略高于pGL2 X。结论　人HeLa和PG癌细胞中hTERT转录调控区无基因突变并高度保存 ;hTERT调控区具有癌细胞特异性转录调节活性 ,表明hTERT转录水平的激活与端粒酶阳性及细胞癌变密切相关 ;hTERT上游 2 72为其核心     

端粒酶hTERT基因在男性不育症病人睾丸组织中的表达及其意义

目的 :研究端粒酶hTERT基因在男性不育症病人睾丸组织中的表达及其意义。　方法 :应用核酸原位杂交技术检测 4 7例男性不育症病人和 10例正常睾丸组织中端粒酶hTERT基因的表达和定位 ,并应用HPIAS 10 0 0高清晰度图像处理系统对hTERT阳性信号进行图像分析。　结果 :端粒酶hTERT基因阳性表达与生殖细胞 (精原细胞、精母细胞、精子细胞 )的分布定位一致 ,并且其表达强度与男性不育症病人睾丸组织中的生殖细胞的数量和密度显著相关 ,在唯Sertoli细胞综合征病人睾丸组织中无端粒酶hTERT基因的表达。　结论 :端粒酶活性的缺乏可能是生殖细胞发育停滞的原因之一     

肿瘤病人血清中癌细胞凝集因子单克隆抗体的制备

目的 通过制备癌细胞凝集因子的单克隆抗体，进一步研究该凝集因子的结构、功能、组织来源，并建立检测试剂盒打下了基础。方法 采用杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，经ＥＬＩＳＡ法结合癌细胞凝集抑制实验选出阳性克隆。结果 融合阳性率７８．１％；筛选出的杂交瘤细胞染色体数目为９６－１０６条，ＳＰ２＝０骨髓绞炙６８条，小鼠脾细胞为４０条，得到的ＭｃＡｂ亚类分别是ＩｇＧ１（Ｅ９）和ＩｇＧ２α（Ｅ１     

乳腺癌细胞来源的外泌体对乳腺癌BT549细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的 研究乳腺癌细胞来源的外泌体对乳腺癌BT549细胞的增殖、侵袭和迁移的影响.方法 使用超速离心的方法对人乳腺癌BT549细胞培养液中的外泌体进行提取和纯化,以通用透射电子显微镜观察外泌体的形态和大小,蛋白免疫印迹实验鉴定外泌体的标志蛋白,以CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验检测外泌体对BT549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.结果 透射电子显微镜下外泌体的形状为椭圆形,外包被一层磷脂膜,直径40～110 nm;蛋白免疫印迹实验结果显示外泌体内标志蛋白TSG101以及外标志蛋白CD63均明显富集;CCK-8实验结果显示共培养24 h后,实验组的BT549细胞增殖力较对照组明显增强(F=12.99～50.95,P<0.001);细胞划痕实验结果显示外泌体明显促进了BT549细胞的迁移(t=8.93,P<0.01);Transwell实验结果显示实验组BT549细胞迁移数较对照组明显增多(t=4.77,P<0.01).结论 乳腺癌细胞来源的外泌体能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,表明肿瘤来源外泌体可作为交叉信号的传递平台,在促进肿瘤的生长和肿瘤转移方面发挥自分泌作用.