端粒酶活性及其hTR表达在诱导大肠癌分化细胞中的变化

目的 观察全反式维甲酸（ＡＴＲＡ０和１，２５－二羟维生素Ｄ３（ＶＤ３）大肠癌细胞株诱导分化过程中粒酶活性的变化，并对其ＲＮＡ组分ｈＴＲ进行检测。方法 ＡＴＲＡ和ＶＤ３对大肠癌细胞进行诱导分化，在进行细胞活力测定，细胞增殖测定，流式细胞仪（ＦＣＭ）分析细胞周期及碱性磷酸酶比活性测定的时时，分别在诱导后第２天，第４天和第６天用ＴＲＡＰ法检测其端粒酶活性的变化，并同时用ＲＴ－ＰＣＲ的方法对端粒酶的ＲＮＡ     

中国畲族人群DYS287位点多态性的研究

目的：分析Y染色体特异的Alu插入位点DYS287的遗传多态性。并对江西，浙江和福建三省不同地区的畲族人群Alu插入频率进行比较。方法：以中国畲族群体的117名男性个体为研究对象，采用PCR-SSP法扩增后琼脂糖凝胶电泳分离的方法检测结果。结果：我国畲族人群中Alu插入的基因频率为17.1%，江西，浙江入福建三省不同地区的畲族人群中Alu插入频率无显著差异。结论：DYS287位点作为一种稳定，可靠的遗传标记可以为研究民族间的遗传关系及其起源提供可靠的证据。     

免疫磁珠与DNA倍体检测肿瘤患者外周血中癌细胞的初步临床应用

DNA异倍体是恶性肿瘤的重要标志之一[1-2],检测外周血中肿瘤DNA异倍体为无创性肿瘤诊断开辟了一条新途径[3].流式细胞术 (FCM)-DNA倍体分析技术具有特异性强的优点,但该方法在外周血中检测的阳性率不高[4].本研究先用免疫磁珠(IMB)阴性分选富集癌细胞,后用FCM-DNA倍体检测外周血中癌细胞,现报告如下.     

免疫磁珠与荧光定量逆转录聚合酶链反应在胃癌患者外周血癌细胞检测中的应用价值

目的研究免疫磁珠和荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测胃癌患者外周血癌细胞的应用价值。方法将不同浓度的人胃腺癌细胞系MGC803细胞加入到健康人血中,经淋巴细胞分离液收集单核细胞后,等分4份。其中1份直接用于提取RNA(方法Ⅰ)、其他分别用阴性磁珠(方法Ⅱ)、阳性磁珠(方法Ⅲ)及联用阴性和阳性磁珠(方法Ⅳ)富集癌细胞。然后,以癌胚抗原(CEA)mRNA作为分子标志物进行荧光定量RTPCR检测其相对拷贝数;并检测45例胃癌、30例胃溃疡患者和30名健康人外周血CEAmRNA。结果方法Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ测得的CEAmRNA相对拷贝数与癌细胞数间有良好的相关性(方法Ⅱ和ⅢP<005;方法ⅣP<001),尤以Ⅳ方法为佳,可检测出每毫升血中含有的1个胃癌细胞。Ⅰ～Ⅳ方法检测胃癌患者阳性率分别为4222%、5333%、5111%和6444%;方法Ⅳ与方法Ⅰ比较,差异有显著意义(P<005)。用方法Ⅳ检测30例胃溃疡患者均为阴性,而其他3种方法检出2例阳性;30名健康人中4种方法均未检出扩增产物。结论免疫磁珠与荧光定量RTPCR法可提高胃癌患者外周血CEAmRNA的检出率。     

中国畲族人群DYS287遗传多态性的研究

背景DYS 287位点是位于Y染色体长臂Yq11的一个Alu序列插入多态(Y chromosomal Alu insertion polymorphism,YAP),关于中国畲族人群DYS287遗传多态性的研究尚缺乏.目的揭示中国畲族群体DYS287位点多态性的分布规律,以及畲族人群与其他少数民族在此位点多态性方面的差异和联系,为医学遗传学、人类学和法医学等的研究提供可靠数据和科学依据.设计前瞻性研究.地点、对象和方法在江西、浙江、福建三省畲族世居区内随机选择无血缘关系、三代为畲族的男性个体117例,抽取静脉血5mL,倒至用肝素溶液浸泡过的纱布中,室温条件下自然干燥,制成血纱块.提取DNA后,采用PCR-SSP法对此位点进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳检测结果.主要观察指标①将电泳后的凝胶置于紫外检测仪下观察是否有455bp扩增片段.②不同地点的采样例数、YAP+例数,Alu插入频率比较.结果117例畲族男性个体中有20例为YAP+,PCR扩增片段为455bp,YAP+频率为17.1%;江西、浙江和福建三省不同地区的畲族人群Alu插入频率(即YAP+频率)分别为18.18%,18.06%,13.04%,YAP+频率比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论DYS287位点作为一种稳定、可靠的遗传标记可以为研究民族间的遗传关系及其起源提供可靠的证据.     

人工骨合成中生物矿化条件对胶原-磷酸钙复合物组成及微观结构的影响

背景：骨组织工程材料的研究是组织工程研究中最有成就的领域之一，但人工骨的合成机制研究尚有许多问题不清楚；目的：探讨人工骨合成过程中胶原与磷酸钙的作用机制。设计：单一样本实验。单位：红河学院材料研究室。材料：实验于2003-07／08在红河学院材料研究室完成。胶原（10g／L醋酸溶液）；氯化钙、磷酸二氢钠、氢氧化钠、Tris、盐酸等；去离子水。方法：采用液氮冻结-冷冻干燥法．制备胶原-磷酸钙复合物A，B，以及矿化过程中不同时间的状态样品；用紫外分光光度计测定胶原-磷酸钙生物矿化动力学曲线，根据曲线规律，确定制备电镜样品时的不同取样时间；根据电镜照片和能谱数据进行机制分析。主要观察指标：胶原-磷酸钙复合物的形貌及其结构随时间的变化规律。结果：①在搅拌条件下，通过缓慢中和法生成的胶原-磷酸钙复合物A为束状或针状。②在静态条件下进行生物矿化，形成的胶原-磷酸钙等复合物B在矿化初期为层状结构，与纯胶原的自组装结构相似，碳、氧、磷、钙4种元素的摩尔比依次为：7．26：20：0：2；矿化末期的结构呈致密的条状，有一定的纹理，有很细的沟纹，碳、氧、磷、钙4种元素的摩尔比依次为：11．02：22．5：1．06：2。结论：胶原生物矿化早期，胶原首先与钙离子配位，并按胶原自组装方式形成载钙的层状胶原模板，然后磷酸根在已成形的模板上同钙离子生成磷酸钙；通过控制搅拌条件和作用时间，能够获得到网状结构和针状结构的胶原复合物材料。     

滇南狸尾豆叶的化学成分研究

目的:研究滇南狸尾豆叶的化学成分.方法:对滇南狸尾豆叶乙醇提取物的乙酸乙酯部分采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法分离纯化;根据波谱学数据和理化性质进行结构鉴定.结果:分离得到11个化合物,分别鉴定为:柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(1),(2S)-5,7 -dimethoxy-4'-hydroxyflavan(2),dalbergioidin(3),5,7-dihydroxy-2'- methoxy-3',4'-methylenedioxyisoflavanone (4),5,7,4 '-三羟基黄酮(5),5,7-dihydroxy-2',4'-dimethoxyisoflavanone(6),5,7,2',4'-tetrahydroxyisoflavone(7),大黄素(8),水杨酸(9),胡萝卜苷(10),正二十四烷(11).结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到.     

特异性微小RNA抑制剂对胃癌细胞增殖的影响

目的： 探讨特异性微小RNA抑制剂对胃癌细胞增殖的影响。方法: 设计并合成4种微小RNA（miR-17、miR-21、miR-106a和miR-421）的2’-甲氧修饰的RNA寡核苷酸（微小RNA抑制剂）,用脂质体分别转染到SGC-7901和MGC-803胃癌细胞,然后用实时定量逆转录-聚合酶链反应技术检测微小RNA的表达情况,最后用MTT方法检测胃癌细胞的增殖情况。结果: 4种微小RNA抑制剂均有效抑制了SGC-7901和MGC-803细胞中相应微小RNA的表达;除miR-21抑制剂未见抑制胃癌细胞的增殖外,其它3种微小RNA抑制剂均以剂量依赖方式抑制胃癌细胞的增殖且对SGC-7901的效果优于MGC-803。结论: 微小RNA的特异性抑制剂能有效抑制胃癌细胞的增殖,采用这种技术为研究胃癌的发病机制提供了新方法。     

人DNA指纹的研究及其应用

1988年,作者根据DNA指纹是人基因组中重复序列的RFLP的原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因同源序列高于90％的事实,选用鼠MBP CDNA3’-端的与人基因组中该类重复序列几乎完全同源的0.81kb片段作探针,检测用Hae Ⅲ酶解的人DNA限制性片段(RF),在人群中可检出22条谱带,受检的无血缘关系的个体之间没有两个人的谱带是完全相同的,显示这一方法的高度个体特异性。这是国内首次用自己的力量找出检测DNA