雷帕霉素抑制IgA肾病大鼠肾小球信号蛋白STAT3的活化

目的探讨雷帕霉素对IgA肾病大鼠肾组织p-JAK2、STAT3、p-STAT3和PCNA表达的影响。方法制备IgA肾病动物模型,分为对照组、IgA肾病组、氯沙坦(ls)和雷帕霉素(rapa)治疗组。监测大鼠的生化指标及用免疫组化、Western blot、RT-PCR等方法检测肾组织p-JAK2、STAT3、p-STAT3和PCNA的蛋白及mRNA的表达。结果IgA肾病大鼠较对照组24 h尿蛋白定量明显升高、血白蛋白降低、BUN以及Cr水平明显升高(P<0.01);IgA肾病大鼠p-JAK2、STAT3、p-STAT3和PCNA蛋白及mRNA水平也显著高于对照组;雷帕霉素能显著缓解上述改变(P<0.01)。结论雷帕霉素可能通过抑制IgA肾病大鼠肾小球JAK/STAT信号途径、直接抑制STAT3的活化以及抑制系膜细胞的增殖而减轻病变程度。     

氯沙坦联合阿魏酸钠治疗早期糖尿病肾病的临床研究

目的探讨氯沙坦和阿魏酸钠对糖尿病肾病患者血内皮素、血管紧张素Ⅱ及尿内皮素水平影响和临床疗效。方法39例2型早期糖尿病肾病患者随机分为氯沙坦治疗组(19例)和氯沙坦 阿魏酸钠治疗组(20例),正常对照组7例。治疗前后检测两治疗组患者血内皮素、血管紧张素Ⅱ、尿内皮素、24h尿白蛋白定量。结果治疗4w后,氯沙坦治疗组血、尿内皮素水平比治疗前降低(P<0.01),血AngⅡ变化不大。氯沙坦 阿魏酸钠治疗组血内皮素、AngⅡ水平,尿内皮素水平比治疗前降低(P<0.01),治疗后两组各指标变化差异有显著意义(P<0.01)。结论氯沙坦 阿魏酸钠治疗糖尿病肾病能降低糖尿病肾病患者血尿内皮素水平、血AngⅡ水平,起到保护肾脏的作用。     

JAK/STAT信号途径在高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的观察JAK/STAT信号途径对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),分别给予高糖和JAK抑制剂AG490干预,Western印迹检测α-SMA、E-Cadherin及STAT1、STAT3、p-STAT1和p-STAT3的表达;ELISA法测定上清液中TGF-β1、I型胶原的分泌,RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。结果与低糖组比较,高糖培养的HKC中α-SMA、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达明显上调;E-Cadherin表达明显下调;TGF-β1mRNA表达增加;上清液中TGF-β1、Ⅰ型胶原增加。AG490明显抑制α-SMA表达升高,减轻E-Cadherin表达;降低TGF-β1mRNA表达及TGF-β1、Ⅰ型胶原的分泌。结论JAK/STAT信号途径可能参与高糖诱导HKC转分化。     

氯沙坦及苯那普利对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响

糖尿病肾脏组织中细胞凋亡增多 ,并伴随着凋亡相关基因的改变[1] 。本研究观察了血管紧张素转换酶抑制剂(ＡＣＥＩ)苯那普利和血管紧张素Ⅱ受体 1拮抗剂 (ＡＴ1Ｒａ )氯沙坦对糖尿病大鼠肾功能及肾脏细胞凋亡的影响 ,以观察这两种药物的作用是否为部分通过影响肾脏细胞凋亡而实现的。一、材料与方法1.动物模型及分组 :选取体重 12 0～ 140ｇＳＤ大鼠 96只(河北省实验动物中心提供 ) ,所有动物均用戊巴比妥钠 (4 0ｍｇ/ｋｇ)腹腔注射麻醉 ,行右肾切除术 ,2周后切口完全愈合 ,将大鼠随机分为Ａ组 :右肾切除对照组 ;Ｂ组 :糖尿病 (ＤＭ)组 ;Ｃ…     

氯沙坦对Nestin在糖尿病大鼠肾组织中表达的影响

目的研究中间丝蛋白Nestin在糖尿病大鼠肾组织中的表达以及血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂(AT1Ra)氯沙坦的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分出正常对照组(N组)10只,余20只腹腔注射STZ制备糖尿病大鼠模型。模型制备成功后,再随机分为糖尿病组(DM组)10只和氯沙坦治疗组(DL组)10只。DL组大鼠每日给予氯沙坦20 mg/kg灌胃。干预8 w后,生化方法检测各组大鼠血糖、血尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白。电镜观察足细胞超微结构变化;免疫组织化学、流式细胞术、Wertern印迹检测肾组织中Nestin蛋白的表达。结果 DM组大鼠Nestin蛋白表达明显高于N组;氯沙坦治疗后,Nestin表达明显降低。相关性分析显示,Nestin蛋白表达水平与24 h尿蛋白量密切相关(P<0.01)。结论Nestin表达升高可能参与了糖尿病大鼠蛋白尿的发生,氯沙坦对肾脏的保护作用可能部分的是通过降低Nestin的表达而实现的。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白JAK2和STAT3表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦对糖尿病大鼠肾小球信号蛋白Janus酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）与信号转导子和转录激活子3（STAT3）表达的影响。方法雄性Wistar大鼠60只，随机分为正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组。腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱发糖尿病大鼠模型，每日灌胃氯沙坦10mg／kg。采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测肾小球细胞JAK2、STAT3和磷酸化STAT3（P-STAT3）蛋白的表达。免疫沉淀和Western blot检测磷酸化JAK2（p-JAK2）情况，逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测肾小球细胞JAK2和STAT3 mRNA的表达。结果在2周和4周时，糖尿病组较对照组肾小球JAK2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白及其JAK2和STAT3mRNA表达明显增强（P均〈0．01）。氯沙坦治疗组较糖尿病组P-JAK2和P-STAT3表达降低（P〈0．05）。氯沙坦对JAK2和STAT3蛋白及其mRNA的表达无明显影响。结论JAK2和STAT3信号蛋白可能参与了糖尿病早期肾脏的发病过程，氯沙坦对肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK／STAT信号途径的激活而实现的。     

热休克转录因子1在小鼠心脏淀粉样变疾病中的作用机制研究

目的:探讨热休克转录因子1(HSF1)在心脏淀粉样变疾病中的作用机制。方法:将30只HSF1敲除小鼠随机分为3个实验组,HSF1敲除型空白对照组、敲除型淀粉样变模型组及替普瑞酮治疗组;将20只野生型小鼠随机分为2个实验组,野生型空白对照组、野生型淀粉样变模型组,每组均为10只。进行淀粉样变诱导实验构建淀粉样变疾病模型。模型构建2个月后处死小鼠,通过刚果红染色、免疫组织化学染色、分子生物学检测,比较各个实验组心脏组织中热休克蛋白及淀粉样变沉积情况,以及肝脏、脾脏、胃、肠舌、皮肤组织中的淀粉样变沉积情况。结果:淀粉样变诱导实验后,野生型小鼠心脏组织中热休克蛋白70(HSP70)mRNA的表达水平较空白组显著升高(P0.05),HSF1敲除小鼠淀粉样变疾病模型的心脏组织中HSP70mRNA的表达水平显著低于野生型实验组(P0.05),且心脏淀粉样变沉积程度显著高于野生型实验组。给予HSP70诱导剂替普瑞酮后,敲除型实验组心脏组织中的HSP70mRNA的表达水平明显升高,其淀粉样沉积程度明显得到改善。而未进行淀粉样变诱导实验的空白组,不管是野生型小鼠还是敲除型小鼠均未见淀粉样物质沉积。此外,敲除型实验组小鼠血清中心肌肌钙蛋白T(TnT)表达显著高于野生型实验组,而给予替普瑞酮治疗后表达下降。结论:HSF1可能通过对HSP70的调控影响心脏淀粉样变的沉积情况,该结果为心脏淀粉样变的防治提供了新的思路。     

骨骺软骨中淋巴管的分布及层粘蛋白的表达

目的：观察长骨骨骺软骨中毛细淋巴管及生长板中层粘蛋白（ＬＮ）的分布。方法：取１０、２２、３６周引产胎儿和１１岁儿童截肢标本的胫骨近端骨骺,用ＨＥ染色和ＬＮ免疫组化染色,改良的５′－核苷酸酶染色（Ｖｅｔｅｒ法）等方法观察。结果：软骨管是软骨组织中内衬内皮细胞,外包绕ＬＮ阳性基底膜的管腔状结构,胎儿１０周时尚不存在,２２周和３６周时存在,Ｖｅｔｅｒ染色发现,有的软骨管的内皮细胞呈红色,提示为毛细血管,有的内皮细胞含棕色颗粒,提示为毛细淋巴管。生长板静止带、增殖带及部分肥大带软骨细胞胞浆、胞膜及临近基质,对ＬＮ呈阳性表达。结论：胎儿长骨骨骺软骨中存在毛细淋巴管,与毛细血管一样也是软骨管的组成部分。除生长板静止带外,增殖带及部分肥大带软骨细胞也合成ＬＮ。