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441.
目的探讨小鼠乳腺癌细胞(4T1)和小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)共培养构成的肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中,过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)促进4T1细胞侵袭的作用机制。 方法(1)提取PMs并用小发卡RNA(shRNA)敲低PGC-1α蛋白表达:采用原代细胞提取的方法提取PMs,并用低表达PGC-1α的shRNA(sh-PGC-1α-1、sh-PGC-1α-2、sh-PGC-1α-3)转染细胞,然后用Western blot检测PMs[对照组(PMs组)、阴性对照组(sh-control)、sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组、sh-PGC-1α-3组]中PGC-1α蛋白表达水平,选取抑制效果最好的shRNA用于实验。所得低表达PGC-1α的sh-PGC-1α PMs为本实验所需。(2)验证TAMs中PGC-1α蛋白表达水平:利用Transwell建立PMs/sh-PGC-1α PMs和4T1细胞的共培养体系,得到TAMs/sh-PGC-1α TAMs。收集细胞并提取蛋白,用Western blot检测对照组(PMs组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组PGC-1α蛋白表达水平。(3)验证共培养体系中4T1细胞的侵袭、迁移、愈合能力:利用Transwell小室模型观察对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组4T1细胞的侵袭、迁移数;利用创伤愈合实验观察对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组4T1细胞的愈合情况。(4)验证共培养体系中PMs的PGC-1α对4T1细胞发生细胞上皮-间质转化(EMT)的影响:利用Transwell建立PMs /sh-PGC-1α PMs和4T1细胞的共培养体系,采用Western blot检测对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组EMT相关蛋白E-cadherin(上皮标志物)及vimentin(间质标志物)的表达情况。多组实验数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法。 结果(1)对照组(PMs组)、阴性对照组、sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组和sh-PGC-1α-3组PGC-1α表达水平分别为1.00±0.00、0.96±0.06、0.43±0.04、0.35±0.07和0.38±0.08,5组比较,差异有统计学意义(F=32.648,P<0.050),其中,对照组(PMs组)分别与阴性对照组、sh-PGC-1α-3组比较,PGC-1α表达水平的差异均无统计学意义(P=0.991、0.065),但是,sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组PGC-1α表达水平均低于对照组(PMs组)(P=0.014、0.045),并且,sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组和sh-PGC-1α-3组的PGC-1α表达水平均低于阴性对照组(P=0.015、0.018、0.035)。因此,选择对PGC-1α抑制效果最好的sh-PGC-1α-2进行后续实验。(2)对照组(PMs组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组PGC-1α表达水平分别为1.00±0.00、1.92±0.20和0.90±0.23,3组比较,差异有统计学意义(F=10.294,P=0.011),其中TAMs组PGC-1α蛋白表达水平明显高于对照组(PMs组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)。(3)Transwell侵袭实验显示,对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组比较,共培养24 h后穿膜的细胞数分别为(41.67±6.01)、(75.33±5.46)和(24.33±1.45)个,3组比较,差异有统计学意义(F=29.668,P<0.050),其中TAMs组4T1细胞的侵袭能力显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)。Transwell迁移实验显示,对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组共培养24 h后穿膜的细胞数分别为(55.67±12.13)、(97.67±8.45)和(30.67±6.49)个,3组比较,差异有统计学意义(F=13.193,P<0.05),其中TAMs组4T1细胞的迁移能力显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)。创伤愈合实验显示,对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组4T1细胞24 h的愈合率分别为(100.00±0.00)%、(135.98±5.18)%和(68.82±7.28)%,3组比较,差异有统计学意义(F=42.435,P<0.050),其中TAMs组4T1细胞的愈合能力显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P<0.050)。(4)Western blot检测发现:对照组(4T1组)、TAMs组和sh-PGC-1α TAMs组E-cadherin表达水平分别为1.00±0.00、0.44±0.11和2.51±1.67, vimentin表达水平分别为1.00±0.00、2.20±0.15和0.36±0.10,3组比较,E-cadherin和vimentin表达水平的差异均有统计学意义(F=87.295、79.058,P均<0.050);组间两两比较显示,TAMs组E-cadherin表达水平显著低于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050),vimentin表达水平显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050),而sh-PGC-1α TAMs组E-cadherin表达水平显著高于对照组(4T1组)(P<0.050),vimentin表达水平显著低于对照组(4T1组)(P<0.050)。 结论TAMs可促进4T1细胞的侵袭、迁移、愈合以及EMT过程,且该作用与TAMs的PGC-1α相关。 相似文献
442.
[目的]分析血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和血红素加氧酶-1(HO-1)水平与胃癌患者临床病理特征的相关性。[方法]前瞻纳入符合条件的160例胃癌患者,均于入院时检测血清IGF-1、HO-1水平,记录患者临床病理特征,分析血清IGF-1、HO-1水平与胃癌患者临床病理特征的关系。[结果]Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移的胃癌患者血清IGF-1、HO-1水平分别高于Ⅰ~Ⅱ期及未合并淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05);不同发病部位、肿瘤直径、肿瘤分化程度、组织类型、病灶侵袭深度的胃癌患者血清IGF-1及HO-1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);绘制受试者工作曲线(ROC)发现,胃癌患者入院时血清IGF-1、HO-1水平单项评估及联合评估TNM病理分期、淋巴结转移的曲线下面积(AUC)均>0.80,均有一定评估预测价值。[结论]胃癌患者血清IGF-1、HO-1水平与患者临床病理特征中TNM病理分期、淋巴结转移有密切关系,并可用作评估和预测指标。 相似文献
443.
目的 对一起食源性疾病暴发事件中分离的2种血清型沙门菌进行病原学分析。方法 采集2022年9月8日某学校暴发事件中病例肛拭子11件、可疑污染食品13件和环境样本10件;对病例肛拭子分别使用亚硒酸盐煌绿增菌液和脑心浸液肉汤(BHI)进行增菌培养,在完成常见肠道病原菌荧光PCR检测后,根据结果开展相应致病菌的分离培养;对可疑污染食品参照食品安全国家标准进行检测;每份肛拭子样本和食品样本均挑取多个疑似沙门菌菌落进行血清学凝集和全基因组测序;根据全基因组测序结果确定沙门菌血清型,基于菌株核心基因组单核苷酸多态性(SNP)进行聚类分析。结果 病例肛拭子和可疑污染食品沙门菌检出率分别为9/11和5/13,其中4例病例肛拭子和4件可疑污染食品样本均分离到2种血清型沙门菌(乌干达沙门菌和伊迪坎沙门菌),其余阳性样本分离沙门菌均为单一乌干达沙门菌血清型或单一伊迪坎沙门菌血清型。11件病例肛拭子样本接种BHI增菌液后12 h和24 h沙门菌荧光PCR检出率均为9/11,与分离培养结果一致。2种血清型沙门菌在基于核心基因组SNP构建的聚类树中形成2个相互独立且遗传距离较远的分支,而每一种血清型沙门菌也表现出基因组多态性,乌干达沙门菌之间SNP差异个数介于0~14个,伊迪坎沙门菌之间SNP差异个数介于0~23个。结论 本次事件为乌干达沙门菌和伊迪坎沙门菌共同导致食源性疾病暴发事件,基于BHI对病例肛拭子增菌并进行沙门菌荧光PCR检测的方案可在暴发中应用。 相似文献
444.
445.
目的:建立扶正治癃颗粒质量标准。方法:采用TLC定性鉴别扶正治癃颗粒复方制剂中的黄芪、肉苁蓉、熟地;HPLC法同时测定5-羟甲基糠醛、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷的含量,并建立20批样品指纹图谱。结果:TLC斑点清晰,专属性强;5-羟甲基糠醛、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷分别在19.20~240.00μg/mL、44.80~560.00μg/mL、1.60~0.00μg/mL、2.40~30.00μg/mL范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为100.95%(RSD=1.43%)、99.67%(RSD=2.49%)、100.32%(RSD=0.77%)、100.18%(RSD=1.16%)。20批样品指纹图谱相似度良好(≥0.993),并指认出四个色谱峰。结论:该方法准确可靠、重复性好,可用于扶正治癃颗粒的质量控制。 相似文献
446.
目的 探讨系统性免疫炎症指数(SII)和D-二聚体(D-dimer, D-D)对急性重度一氧化碳中毒(ASCMP)患者并发脑梗死(cerebral infarction, CI)的预测价值及对患者病情严重程度的评估作用。方法 选择2015年1月至2023年1月作者医院收治的ASCMP患者共502例,根据入院后是否并发CI将患者分为并发CI组(n=46)和未并发CI组(n=456),比较并发CI组和未并发CI组临床资料的差异。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将ASCMP并发CI患者分为轻型组17例,中型组14例,重型组15例,比较不同病情严重程度组间SII、D-D、中性粒细胞/淋巴细胞(NLR)和血小板/淋巴细胞(PLR)水平的差异。采用Pearson相关检验分析ASCMP并发CI患者SII和D-D与NIHSS评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析SII、D-D及两者联合对ASCMP患者发生CI的预测价值。结果 并发CI组患者SII、D-D、NLR和PLR水平高于未并发CI组(P<0.05);不同严重程度ASCMP并发CI患者组间SII、D-D、NLR和... 相似文献
447.
目的:探讨国外高级实践护士(APN)延续性护理(TOC)模式下再生性社区在肝硬化患者中的应用效果。方法:以2019年1月1日~2022年1月31日收治的90例患者为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各45例,对照组给予常规TOC模式,观察组给予APN TOC模式下再生性社区;比较两组出院前一天、出院后6个月、出院后12个月自我护理能力[采用修正版自我护理能力评估量表(ASAS-R)]、生活质量[采用健康调查简表(SF-36)]、心理状态[采用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)]。结果:出院后6、12个月,观察组ASAS-R与SF-36评分均高于对照组(P<0.05),观察组SAS、SDS评分低于对照组(P<0.05)。结论:肝硬化患者采取APN TOC模式下再生性社区,改善患者自我护理能力、生活质量与心理状态。 相似文献
448.
目的:评价新型口服抗凝药(NOAC)与维生素K拮抗剂(VKA)治疗病态肥胖(体重指数>40 kg/m2)或高体重(>120 kg)静脉血栓栓塞(VTE)患者的有效性及安全性。方法:检索从2000年1月到2022年5月在中国生物医学文献数据库、中国知网、维普网、万方数据库、PubMed、Embase、Cochrane图书馆、Web of Science的相关文献,依据纳入标准及排除标准筛选文献并进行质量评价,结局指标包括VTE发生率、大出血发生率。应用Review Manager 5.3进行异质性检验及Meta分析。结果:共纳入13篇文献,共14 648例患者,NOAC组6 188例,VKA组8 460例。Meta分析结果表明,与VKA相比,NOAC的VTE发生风险(OR=0.62,95%CI:0.51~0.76,I2=0%,P<0.00001)及大出血发生风险(OR=0.77,95%CI:0.60~1.00,I2=0%,P=0.05)均降低。结论:与VKA相比,NOAC用于病态肥胖或高体重的VTE患者更... 相似文献
449.
目的 探讨静脉注射利多卡因在重症肺炎患者中心静脉穿刺置管中的应用效果。方法 选取2021年9月至2022年10月河南大学第一附属医院收治的120例重症肺炎需行中心静脉穿刺置管的患者为研究对象。按照随机数字表法分为研究组与对照组,每组60例。研究组静脉注射利多卡因辅助局部麻醉,对照组静脉注射等量生理氯化钠溶液。比较两组中心静脉穿刺情况、穿刺期间血流动力学[给药前(T0)、静脉注射后1 min(T1)、中心静脉穿刺时(T2)、穿刺完毕即刻(T3)]、疼痛程度[T3、穿刺后30 min(T4)、穿刺1 h(T5)、穿刺2 h(T6)]、中心静脉穿刺后不良反应。结果 研究组首次、3 min内穿刺成功例数均多于对照组(P<0.05);穿刺成功时间少于对照组(P<0.05),动脉痉挛例数少于对照组(P<0.05)。两组心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)的时间、交互效应比较差异有统计学意义(F=5.264、4.018;5.164、3.289;5.063、3.645,P<0.05)。T1、T2时,研究组HR低于对照组(P<0.05),两组T3时的HR比较差异... 相似文献
450.
目的:探讨妊娠不同时期超声诊断胎儿畸形检出特点。方法:选择2020年1月-2022年12月本院确诊胎儿畸形的不同孕周孕产妇170例临床资料,均接受超声检查,以终止妊娠胎儿病理检查或分娩结局为畸形诊断标准。结果:170例中163例在妊娠期间B超检出胎儿畸形,7例B超漏诊为妊娠早期3例、妊娠中期3例和妊娠晚期1例;170例中66例产妇选择分娩,104例产妇接受终止妊娠,分娩的66例胎儿随访1个月均存活。163例检出神经系统畸形、胸腔腹壁畸形、心血管畸形、颜面颈部畸形、四肢、脊柱畸形、泌尿系统畸形及其他等胎儿畸形,4例为多发畸形(均在妊娠中期检出),159例为单发畸形;163例胎儿畸形中,心血管畸形35例(21.5%)、胸腔腹壁畸形32例(19.6%)、颜面颈部畸形30例(18.4%)、泌尿系统畸形25例(15.3%)和中枢神经畸形22例(13.5%)检出较多。妊娠早期48例,检出中枢神经畸形15例(31.3%)、胸腔腹壁畸形11例(22.9%)和单纯NT/NF增厚10例(20.8%)较多;妊娠中期85例,检出胎儿的心血管畸形32例(37.65%)和颜面颈部畸形17例(20.00%)较多;妊... 相似文献