薄层扫描法测定安神宁康胶囊中黄芪甲甙的含量

目的：建立测定安神宁康胶囊中黄芪甲甙含量的方法。方法：以氯仿——甲醇——水（65:35:10)的下层为展开剂,用双波长薄层扫描仪测定。结果：黄芪甲甙在1.049μg-5.245μg与峰面积积分值,呈良好的线性关系（r=0.9993,n=5),平均回收率为96.24%。结论：为控制安神宁康胶囊中黄芪甲甙的含量提供了方法。     

黄芪甲苷合成差异基因克隆和鉴定

黄芪甲苷(AstragalosideIV,ASI)是黄芪中的有效成分之一,具有抗炎,改善心肌,脑缺血,促淋巴细胞繁殖,促抗体生成等作用。但由于其在黄芪中含量低,以及缺乏必要的化学合成中间体,限制了其临床药用,通过基因工程方法提高其表达量将有助于其应用。本文应用了差减杂交方法(SSH)结合斑点杂交,从黄芪甲苷合成差异株系中分离鉴定了19个黄芪甲苷合成差异基因片断,其中7个具有同源序列,同源性约80%以上,而另外12个未发现同源序列,推测可能是新基因片断或者是全长cDNA的3’末端序列。     

健儿消食口服液的质量标准研究

采用薄层色谱法和薄层扫描法.建立健儿消食口服液中柴胡、陈皮、黄芩和麦冬的薄层色谱鉴别方法,并采用薄层扫描法测定该制剂中主药黄芪的有效成分黄芪甲苷的含量,黄芪甲苷的线性范围为1.02～5.10μg(r=0.9980),平均加样回收率为98.7%,RSD=3.0% (n=5).鉴别与含量测定方法简便、准确,可用于健儿消食口服液的质量控制.     

当归补血汤传统煎煮和机器煎煮的药液质量比较

目的对传统煎煮法和煎药机煎煮法所得当归补血汤药液质量进行评价。方法采用传统煎煮(传统组)和煎药机煎煮(机煎组)方法对当归补血汤进行煎煮,比较两种方法所得药液干浸膏得率和黄芪甲苷及阿魏酸含量。结果传统组干浸膏得率为30.56%,机煎组干浸膏得率为33.89%;传统组黄芪甲苷含量为0.018 mg·ml-1,机煎组黄芪甲苷含量为0.014 mg·ml-1;传统组阿魏酸含量为20.60μg·ml-1,机煎组阿魏酸含量为19.54μg·ml-1,两组比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论在煎煮时间、用水量和煎煮次数相同的情况下,传统煎煮法和煎药机煎煮法所得当归补血汤药液质量无差异性。     

正交试验优选益气固脱颗粒醇提工艺研究

摘 要 目的： 优选益气固脱颗粒醇提工艺。方法: 以正交设计的试验方法,对组方中有效成分黄芪甲苷、阿魏酸用HPLC法进行定量分析,选取L₉(3⁴)正交表,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取次数、提取时间等工艺参数对益气固脱颗粒提取量的影响。结果:方差分析表明,乙醇浓度与提取次数对浸出物的含量及阿魏酸的提取有显著影响。最佳醇提工艺即加10倍量的70%的乙醇,提取3次,每次1.5 h。结论: 该工艺稳定可行,适于工业生产。     

脑脉利颗粒中芍药苷，益母草碱，黄芪甲苷及盐酸水苏碱含量测定

目的：建立脑脉利颗粒中芍药苷,益母草碱,黄芪甲苷及盐酸水苏碱的含量测定方法。方法：采用甲醇、酸水等不同的溶剂提取,并采用高效液相色谱法,液质联用法等灵敏、专属的色谱方法进行含量测定。结果：每10g脑脉利颗粒中含有芍药苷 42.41 mg,益母草碱 1.73mg,黄芪甲苷 0.10 mg,盐酸水苏碱 37.98mg。结论：制剂中其他组分与所测定的各组分分离良好,不干扰测定,可用于脑脉利颗粒中芍药苷,益母草碱,黄芪甲苷及盐酸水苏碱的含量测定。     

镉对大鼠血睾屏障的损伤及黄芪甲苷的保护作用

目的观察黄芪甲苷和SB203580对镉致大鼠血睾屏障破坏及相关蛋白表达改变的保护效应,探讨黄芪甲苷的保护机制。方法 21只成年雄性SD大鼠随机分为7组:单纯镉组[0.1%氯化镉腹腔内注射,1mg/(kg·d)],镉+黄芪甲苷组[镉剂量同上,同时注射黄芪甲苷,10mg/(kg·d)],镉+SB203580组[镉剂量同上,同时注射SB203580,100μg/(kg·d)],以上各组又分为连续处理5d和10d两个时间组,对照组腹腔内注射等量生理盐水。各实验和对照组动物均为3只。取睾丸做光学显微镜、电子显微镜观察以及免疫组织化学染色和Western blotting检测。结果 HE染色观察对照组支持细胞核染色较浅且不规则,镉组支持细胞内有空泡形成,镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组未见明显形态异常。免疫组织化学染色观察对照组闭锁小带-1蛋白(ZO-1)、紧密连接蛋白-11(claudin-11)阳性产物在生精上皮靠近基底部表达。镉组ZO-1、claudin-11阳性产物表达均显著降低(P0.05),镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组阳性产物表达低于对照组但明显高于镉组(P0.05)。超微结构观察对照组血睾屏障紧密连接形态完整,呈连续的电子密度较深致密线,镉组血睾屏障紧密连接及支持细胞均见不同程度破坏,镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组破坏程度较相应处理时间镉组为轻。Western blotting结果显示,镉组磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)水平明显增强(P0.05),镉+黄芪甲苷组与镉+SB203580组pp38MAPK水平虽高于对照组,但较镉组明显减弱(P0.05)。结论镉致大鼠血睾屏障ZO-1、claudin-11表达降低,紧密连接超微结构损伤,黄芪甲苷具有保护作用,其保护机制与抑制p38MAPK磷酸化有关。     

黄芪甲苷通过促进小胶质细胞/巨噬细胞M2型极化抑制大鼠脑缺血后炎症反应

目的: 研究黄芪甲苷对大鼠脑缺血后小胶质细胞/巨噬细胞M1/M2极化及炎症反应的影响。方法: 将48只大鼠随机分为手术对照组、模型对照组和黄芪甲苷组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型。黄芪甲苷组造模后即刻腹腔注射黄芪甲苷（40 mg/kg）,随后1次/d,连续给药3 d。各组术后第1、3天采用改良的神经损伤严重程度评分（mNSS）和角试验进行神经功能评价;术后第3天采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑染料（TTC）染色检测脑梗死体积;实时逆转录PCR检测M1型小胶质细胞/巨噬细胞表面标志物CD86、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达,以及M2型小胶质细胞/巨噬细胞表面标志物CD206、精氨酸酶1（Arg-1）、类几丁质酶3样分子1/2（YM1/2）及抗炎因子IL-10、TGF-β的mRNA表达;免疫荧光双标记法检测脑缺血周边区CD16/32/Iba1和CD206/Iba1的表达。结果: 与模型对照组比较,黄芪甲苷组mNSS分值降低、右转次数减少（P < 0.05或P < 0.01）,脑梗死体积减小（P < 0.01）,M1型小胶质细胞/巨噬细胞标志物CD86、iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达下调（均P < 0.01）,M2型小胶质细胞/巨噬细胞标志物CD206、Arg-1、YM1/2、IL-10和TGF-β的mRNA表达上调（均P < 0.01）,脑缺血区CD16/32⁺/Iba1⁺细胞数量减少（P < 0.05）,CD206⁺/Iba1⁺细胞数量增加（P < 0.01）。结论: 黄芪甲苷对大鼠脑缺血损伤有保护作用,可能与促进小胶质细胞/巨噬细胞从M1型向M2型转化、抑制炎症反应有关。