高效液相色谱法测定满山红软胶囊中杜鹃素含量

目的:建立高效液相色谱法测定满山红软胶囊中枉鹃素含量。方法:高效液相色谱法,流动相为甲醇一水(60:40);紫外检测波长297nm;流速10ml/min;柱温30℃。结果:在0．1040μg-0．5200μg范围内杜鹃素与峰面积线性关系良好,r=0．9999。结论:该方法快速,准确。     

杜鹃素对映体的分离及其在中药材中的含量测定

目的 建立杜鹃素对映体分离的HPLC方法,并应用于满山红和照山白药材中的对映体含量测定。方法 用HPLC对杜鹃素对映体进行拆分,优化手性柱种类、流动相比例、流速和柱温的色谱条件。对手性热力学拆分进行探讨,计算杜鹃素对映体在色谱柱分离的焓变、熵变、焓变差值和熵变差值等热力学参数。并在最佳分离条件测定了满山红和照山白2种药材中2个对映体的含量。结果 确定了杜鹃素的2个对映体的最佳分离条件：色谱柱为Chiralcel OJ-RH(4.6 mm×150 mm,5μm),乙腈-水(40∶60)为流动相等度洗脱,流速为0.5 mL·min^–1,柱温为25℃,检测波长为295 nm。在最佳分离条件下,杜鹃素对映体的分离度达到1.5,表明杜鹃素的2个对映体能够完全分离。当柱温为20～35℃时,分离因子随着温度的升高呈降低趋势,2个对映体的lnα与1/T呈良好的线性关系,手性拆分过程受焓的控制。将所建立的杜鹃素对映体分离方法应用于中药材满山红、照山白中的杜鹃素对映体含量测定,杜鹃素的2个对映体线性范围分别为0.718～57.44μg·mL^–1和1.28～102...     

贵州苗族药吉祥草化学成分的分离鉴定

目的:研究贵州苗药吉祥草(Reineckia camea)中的化学成分,以期能为吉祥草药理活性的阐明以及吉祥草药材的进一步开发利用提供科学依据。方法:取吉祥草全草药材20 kg,用80%乙醇加热回流提取3次,提取时间分别为2,2,1 h,将3次提取液合并,滤过,减压浓缩成浸膏。浸膏加适量的蒸馏水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和的正丁醇多次萃取,各部分萃取液经减压浓缩,干燥,得石油醚部位浸膏28 g,乙酸乙酯部位浸膏305 g,正丁醇部位浸膏812 g。对乙酸乙酯和正丁醇部位浸膏,利用硅胶柱,大孔树脂,小孔树脂(MCI)柱,ODS中压柱,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)及Pre-HPLC等分离手段进行分离纯化,并通过理化性质,HR-ESI-MS,核磁波谱及文献数据进行结构鉴定。结果:从吉祥草的乙酸乙酯和正丁醇部位分离得到13个化合物,分别为2α,3β-dihydroxy-5α-pregn-16-en-20-one(1),(25R)-26-hydroxycholesterol(2),薯蓣皂苷元(3),β-谷甾醇(4),β-胡萝卜苷(5),异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷(6),杜鹃素(7),木犀草素(8),1,2,8-trihdroxy-5,6-dimethoxyxanthone(9),獐牙菜苦苷(10),二(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(11),交链孢酚单甲醚(12),N-反式阿魏酸酪酰胺(13)。结论:化合物1,2,6~10,12,13均为首次从吉祥草中分离得到。     

Farrerol attenuates MPP+‐induced inflammatory response by TLR4 signaling in a microglia cell line

Farrerol was found to possess neuroprotective effect; however, the mechanism remains unknown. The aim of the present study was to explore the effect of farrerol on MPP⁺‐induced inflammation in mouse microglial BV‐2 cells and to elaborate the underlying mechanism. MTT assay was performed to measure the cell viability. The pro‐inflammatory mediators and cytokines including interleukin (IL)‐6, IL‐1β, and tumor necrosis factor‐α (TNF‐α); inducible nitric oxide synthase; and cyclooxygenase 2 were measured. The expression of p‐p65, p‐IκBα, toll‐like receptor 4 (TLR4), and myeloid differentiation primary response 88 were analyzed by western blot. We found that farrerol treatment improved cell viability in MPP⁺‐induced BV‐2 cells. MPP⁺‐induced upregulation of IL‐6, IL‐1β, and TNF‐α was inhibited by farrerol treatment. Farrerol treatment also attenuated MPP⁺‐induced expression of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase 2 as well as the activation of NF‐κB in BV‐2 cells. MPP⁺‐induced TLR4 signaling was markedly diminished by farrerol treatment. Knockdown of TLR4 attenuated MPP⁺‐induced inflammatory response in BV‐2 cells. In conclusion, farrerol treatment attenuated MPP⁺‐induced inflammatory response by inhibiting the TLR4 signaling pathway in BV‐2 cells. The results indicated that farrerol could be used as a therapeutic agent for preventing or alleviating the neuroinflammation‐related diseases, such as Parkinson's disease.     

杜鹃素通过降低Cx43的表达抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖

目的研究Cx43在杜鹃素抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用。方法体外培养原代大鼠VSMCs细胞,随机分为对照组、AngⅡ刺激组(模型组)、AngⅡ+杜鹃素组(给药组)。CCK-8法检测细胞活力,Ed U法检测细胞增殖活性,流式细胞术观察细胞周期,real-time PCR和Western blot法检测细胞中Cx43的表达。用si RNA干扰Cx43的表达并测定细胞Ed U结合率和细胞周期。结果浓度为60μmol·L^-1的杜鹃素可使AngⅡ诱导的大鼠VSMCs的细胞增殖活性和Ed U结合率均明显降低(P<0.05),并阻止VSMCs由G0/G1期向S期的转化。Real-time PCR和Western blot结果显示,与模型组比较,杜鹃素能明显降低Cx43的m RNA和蛋白表达水平(P<0.01)。用si RNA干扰Cx43的表达后,杜鹃素对AngⅡ诱导的VSMCs增殖的抑制作用明显减弱。结论杜鹃素可明显抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖,抑制VSMCs有丝分裂,使其停滞于G_0/G_1期,其作用可能与杜鹃素抑制Cx43的表达有关。     

杜鹃素在大鼠体内的药动学研究

目的 研究杜鹃素在正常大鼠体内的药动学特征。方法 杜鹃素单剂量ig给予大鼠后,采用HPLC法测定给药后不同时间点大鼠血浆中的杜鹃素,通过DAS软件程序模拟计算,得出杜鹃素在大鼠体内相应的药动学参数。结果 杜鹃素在大鼠体内的药动学模型符合二室模型,主要药动学参数为：t_1/2α＝（0.33±0.10）h,t_1/2β＝（15.22±8.98）h,CL/F＝（14.89±3.45）L/(h?kg),C_max＝（1.61±0.14）mg/L,T_max＝（0.25±0.01）h,MRT_(0-t)＝（2.35±0.08）h,AUC_(0-t)＝（3.06±0.16）mg?h/L。结论 本研究建立的HPLC方法专属性强,简便、准确,可用于杜鹃素在大鼠体内的药动学研究;大鼠ig给予杜鹃素后,其在血浆中分布较快,半衰期较短。     

HPLC测定满山红中杜鹃素、槲皮素的含量

目的　建立高效液相法测定满山红中杜鹃素、槲皮素的含量。方法　用Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm)色谱柱 ,杜鹃素流动相为乙腈 水 (45∶5 5 ) ,检测波长为 2 96nm ;槲皮素流动相为甲醇 0 .0 6 %磷酸 (5 0∶5 0 ) ,检测波长为 36 0nm。流速均为 1.0mL·min-1。结果　杜鹃素在 0 .1118～ 0 .5 5 92 μg范围内呈良好的线性关系 ,回归方程为Y =2 792 .2X - 2 .76 19(r =1.0 0 0 0 ) ,平均回收率为 10 1.34% (RSD =1.5 5 % ,n =5 ) ;槲皮素在 0 .10 0 2～ 0 .5 0 0 8μg范围内呈良好的线性关系 ,回归方程为Y =336 1.5X +0 .95 2 4 (r =1.0 0 0 0 ) ,平均回收率为 99.75 % (RSD =1.71% ,n =5 )。结论　本法简便 ,快速 ,灵敏 ,准确 ,重现性好 ,可作为满山红的含量测定方法     

克感平滴丸质量标准研究

 目的 建立克感平滴丸的质量标准。方法 采用TLC定性鉴别克感平滴丸中的满山红、北豆根,采用RP-HPLC定量检测杜鹃素的含量。结果 在TLC中分别检出满山红、北豆根,斑点清晰可见,重现性好。利用RP-HPLC得到的杜鹃素的线性范围为0.125～2.0 μg, r=0.999 9;杜鹃素的平均回收率为99.6%,RSD=0.43%（n=6）。结论 定性定量方法简便、专属、准确,能有效的控制克感平滴丸的质量。
     

北栽秧花化学成分研究

目的 研究北栽秧花Hypericum pseudohenryi茎叶的化学成分。方法 采用各种柱色谱及制备液相色谱等分离方法对该植物茎叶的化学成分进行分离纯化,经质谱和核磁共振波谱技术进行结构鉴定。结果 从北栽秧花茎叶的丙酮提取物中分离纯化出21个化合物,其结构分别鉴定为3, 4-O-异亚丙基莽草酸（1）、莽草酸（2）、原儿茶酸（3）、咖啡酸（4）、苯甲酸（5）、绿原酸（6）、绿原酸甲酯（7）、1, 3, 6, 7-四羟基氧杂蒽酮（8）、4-羟基-2, 3-二甲氧基氧杂蒽酮（9）、1, 5-二羟基-2-甲氧基氧杂蒽酮（10）、C-3/C-8″双芹菜素（11）、山柰酚（12）、槲皮素（13）、槲皮苷（14）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷（15）、金丝桃苷（16）、异槲皮苷（17）、黑燕麦内酯（18）、杜鹃素（19）、1-棕榈酸单甘油酯（20）和β-谷甾醇（21）。结论 所有化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物18、20为首次从金丝桃属植物中分离得到。