Oral administration of modified live canine parvovirus type 2b induces systemic immune response

Different strategies have been proposed to overcome maternally derived antibody (MDA) interference with canine parvovirus type 2 (CPV-2) immunisation, including intranasal vaccination, which presents some practical limitations. In the present study, the results of the oral administration of a commercial CPV-2b modified live virus (MLV) vaccine in pups with MDA are reported. The CPV-2b vaccine was orally administered to 14 6-week-old pups with a bait. Blood samples and rectal swabs were collected at different days post-vaccination (dpv) to determine CPV-2 antibody titres and DNA loads. Thirteen pups were positive to serological and virological tests after the first vaccination and one pup became positive after the second vaccine administration. The findings of this study suggest that systemic immunity against CPV-2 may be achieved by the use of an MLV CPV-2b vaccine administered orally even in the presence of MDA titres that usually interfere with vaccination.     

乙型脑炎、麻疹胎传母体抗体的调查

86对母婴血清标本用间接酶联免疫测定法(ELISA)测定了乙型脑炎抗体,118对用血凝抑制(血抑)试验测定了麻疹抗体。结果发现,脐血乙型脑炎抗体阳性率为79.1％,母血为74.4％,几何平均滴度在脐血显著高于母血(t=5.1857,P<0.01),比值为1.2∶1。脐血和母血的麻疹血抑抗体阳性率分别为86.4％及84.8％,几何均值也是前者高于后者(t=4.0349,P<0.01),比值为1.3∶1。 108份婴儿血清标本测定结果显示,0～3个月婴儿乙型脑炎抗体阳性率为35％,4～9个月仅为13％,10个月及以上的婴儿全部阴性。此结果与近年上海市小于1岁组乙型脑炎发病率最高相一致,提示应考虑提早乙型脑炎疫苗的接种年龄。     

脑源性神经生长因子和神经干细胞联合移植对大脑中动脉阻塞大鼠神经功能恢复的作用

目的 将脑源性神经生长因子(BDNF)和神经干细胞(NSCs)单独及联合移植应用于大脑中动脉阻塞(MCAo)模型大鼠,观察BDNF和NSCs移植对大鼠缺血性脑卒中神经功能恢复的作用及BDNF对内源性和外源性NSCs增殖、迁移及分化的影响.方法 体外分离、培养新生大鼠海马NSCs,BrdU标记.实验动物随机分为A组(MCAo组);B组(MCAo+BDNF组);C组(MCAo+NSCs组);D组(MCAo+BDNF+NSCs组),每组16只,移植后进行神经功能损害评分(NSS),用免疫组织化学行BrdU、nestin、BrdU/NSE检测,分析结果.结果 移植后的2、4周神经功能评分分别为:A组5.3±0.5、5.3±0.5;B组4.0±0.8、3.8±0.5;C组3.5±0.6、3.5±0.6;D组2.0 ±0.8、1.8±1.0,D组显著好于其他3组(P<0.05),B组与c组显著好于A组(P<0.05).nes.tin阳性细胞数:A组1.24±1.13,B组2.59±1.44(P<0.05),BrdU阳性细胞数:A组0.52±0.68,B组1.65±1.10(P<0.05).BrdU阳性细胞数:C组6.08±1.52,D组10.26±1.96(P<0.05),BrdU/NSE双阳性细胞数:C组1.74±1.04,D组3.58±1.20(P<0.05).结论 BDNF和NSCs移植单独及联合应用对MCAo大鼠的神经功能恢复均有作用,两者联合具有协同作用.BDNF对内源性NSCs的激活、增殖有促进作用,对外源性NSCs的增殖、迁移及分化有促进作用.     

复合干细胞生物陶瓷在裸鼠异位成骨中的评价

目的 研究h-BMP-2基因转染骨髓间充质干细胞(BMSCs)在复合煅烧骨、β-TCP或直接植入裸鼠股部后的成骨能力。方法 通过影像学、组织学和形态计量学等方法,观察未经诱导、OS液诱导和h-BMP-2基因转染BMSCs在复合煅烧骨,或多孔β-TCP后植入裸鼠皮下,或直接制成细胞悬液注入,在4、8、12周诱导成骨和材料降解情况。结果 在裸鼠皮下,单纯生物陶瓷不能诱导成骨,而复合了未诱导、OS液诱导和h-BMP-2基因转染BMSCs的生物陶瓷均能成骨,成骨量为h-BMP-2基因转染组>OS液诱导组>未经诱导组(P<0.05),B-TCP可随骨长入而降解;注入裸鼠肌肉的OS液诱导的和h-BMP-2转染的BMSCs均能诱导成骨,而未经诱导MSCs则不能成骨。结论 复合人BMP基因转染BMSCs的β-TCP是一种理想的骨修复材料。     

大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达及PDGF的影响

目的观察大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达及ＰＤＧＦ对其表达的影响．方法应用原位杂交技术检测分离培养的ＳＤ大鼠肝细胞（ｎ＝３０）内Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．同时观察１０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）和３０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）ＰＤＧＦ促进前胶原基因表达的作用．测定基因表达颗粒总面积占细胞总面积的百分比，并作比较分析．结果无论正常肝细胞或是在两种浓度的ＰＤＧＦ存在时，肝细胞内均可见到Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．正常肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达面积的百分比（％）为７７±１９和７５±２１；加１０μｇ／ＬＰＤＧＦ后为１１５±１９和１１２±１０，而加３０μｇ／Ｌ后为１５２±３４及１８１±２８，且在后者中表达明显增强（Ｐ＜００５及Ｐ＜００１）．结论ＰＤＧＦ在转录水平上促进肝细胞胶原的合成．     

重组逆转录病毒pLNCX2-GDNF转染许旺细胞及其表达

目的 利用基因转染技术将胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因转入许旺细胞(SC)以提高其分泌该因子的水平。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)方法合成GDNFcD—NA片段，以逆转录病毒pLNCX2为载体导入许旺细胞内，并运用RT—PCR、免疫细胞化学染色、ELISA及运动神经元联合培养法检测外源性基因在mRNA和蛋白水平的表达及其产物的活性。结果 RT—PCR检测结果示GDNF—SCs表达GDNFmRNA的水平明显优于SCs；免疫细胞化学检测发现GDNF—SCs抗GDNF蛋白染色呈强阳性，正常SCs呈弱阳性；ELISA法检测结果示转染后4周GDNF—SCs分泌GD—NF蛋白的水平升至正常SCs的5．1倍；运动神经元联合培养法结果显示GDNF—SCs分泌的外源性基因产物具有生物学活性。结论 GDNF基因转染SC在mRNA和蛋白水平表达GDNF明显优于正常SCs，外源性基因表达产物具有神经生物学活性。     

“津血同源”“肾为唾”的研究

以23例肾功能不全与20例肾功正常患者的唾液尿素氮、钠、钾、舌面pH值和血液的相应生化检查作对照。结果唾液尿素氮、钾与血尿素氮、钾成正相关性。证实了中医“津血同源”“肾为唾”的理论。     

大肠癌组织中免疫抑制因子和病理分期关系的探讨

本文观察16例大肠癌病人的癌组织培养上清液对人T细胞的增殖,ZL—2产生的影响和病理Dukes分期的关系,发现癌组织的TDSF对T细胞的增殖有显著抑制作用,对ZL—2的产生抑制作用不明显,对T细胞增殖率在DukesA与B期,其值与对照有显著差异(0.01P<0.05).在C期有非常显著差异(P<0.01).说明大肠癌组织确实分泌有能造成宿主免疫功能下降的抑制物质.且免疫作用不是通过ZL—2环节发生.     

人脂肪干细胞结合微载体在生物反应器中向软骨细胞分化

[目的]探索在旋转生物反应器内,应用微载体技术快速扩增并向软骨分化人脂肪干细胞。[方法]将人脂肪干细胞结合Cytodex3微载体在旋转的生物反应器(RCSS)内进行动态培养,应用倒置显微镜和扫描电镜对微载体表面的脂肪干细胞进行动态观察,并对收获的脂肪干细胞进行Safran in-O、tolu id ine b lue染色等组织化学染色及Ⅱ型胶原的免疫化学染色分析。[结果]脂肪干细胞于24 h内贴附于Cytodex3微载体表面,细胞形态为短梭形,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多,到培养后期,细胞密度可达最初接种的19倍左右,在微载体上收获的细胞进行番红花O、阿利新蓝染色呈阳性,Ⅱ型胶原染色阳性,均强于对照组。[结论]利用微载体细胞培养技术可简便快速地在体外扩增脂肪干细胞,并成功实现向软骨细胞分化。     

子宫内膜异位症患者血清及腹腔液中血小板衍生生长因子、血管细胞粘附分子水平的变化及其意义

目的通过检测子宫内膜异位症(EMs)患者血清及腹腔液中血小板衍生生长因子(PDGF)、血管细胞粘附分子-(VCAM-1)浓度,探讨PDGF和VCAM-1在EMs发病中的作用。方法选取手术后病理证实为EMs的40例患者为EMs组,其中I~II期17例,III~IV23例;非EMs组20例作为对照组。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及腹腔液中PDGF和VCAM-1水平。结果EMs组血清及腹腔液中PDGF、VCAM-1水平均明显高于对照组(P<0.01)。随EMs期别的增加,其血清和腹腔液中PDGF、VCAM-1含量呈上升趋势;EMsIII~IV期水平显著高于I~II期(P<0.05)。EMs患者PDGF与VCAM-1呈正相关性(P<0.05)。结论EMs患者PDGF、VCAM-1表达水平升高,在EMs的发生发展中具有重要作用。