右旋柠烯抑制小鼠S-180移植瘤生长的实验观察

目的观察右旋柠烯乳剂(D-limonene)对小鼠移植瘤生长及转移的抑制作用。方法用小鼠S180癌性腹水建立皮下移植瘤模型,随机分为3组,预防组建模当天开始给药;治疗组移植后第5天开始给药;对照组不给药。每3d测量肿瘤大小,20d后取材,观察肿瘤细胞的浸润程度及淋巴结转移。结果对照组肿瘤体积较大,与皮肤及深部组织发生粘连,7只发现颈部或腋下淋巴结肿大。治疗组和预防组移植瘤生长速度明显缓慢,体积小,且瘤体较规则,未发现有淋巴结转移者。结论右旋柠烯有抑制肿瘤生长,减少淋巴结转移的作用,其机制有待进一步探讨。     

右旋柠烯乳剂对人胃癌移植瘤生长和转移的抑制作用

目的　研究并探讨右旋柠烯乳剂 (D limonene)对人胃癌生长和转移的抑制作用及其机制。　方法　采用人胃癌BGC 82 3细胞株经反复传代成实体瘤的完整组织块 ,建立人胃癌裸小鼠原位移植瘤模型。将 4 0只荷瘤裸小鼠随机分成 4组 ,移植后第 5d开始分别用生理盐水灌胃、5 氟尿嘧啶 (5 FU)腹腔注射、D limonene灌胃、D limonene灌胃 +5 FU腹腔注射共 7周。第 8周处死动物 ,测量原位肿瘤瘤重并计算抑瘤率 ,检测肿瘤细胞凋亡指数 (AI)、肿瘤微血管密度 (MVD)及免疫组织化学测定肿瘤组织血管内皮生长因子 (VEGF)的表达变化 ,光镜与电镜观察组织细胞超微结构变化 ;观察荷瘤鼠腹膜、肝、其他脏器肿瘤转移及腹水情况。　结果　D limonene组、联用组分别与对照组相比 ,胃癌的原位肿瘤瘤重与抑瘤率、AI、MVD、VEGF下调 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。腹膜、肝转移受到明显抑制 (P <0 0 5 )。　结论　D limonene通过抑制肿瘤微血管形成 ,诱导胃癌细胞凋亡 ,抑制了体内胃癌的生长和转移。     

不同方法提取的佛手挥发油气相色谱-质谱分析结果比较

目的：比较分析水蒸气蒸馏法与超临界流体萃取法（SFE）提取佛手挥发油的化学成分和相对含量。方法：运用气相色谱-质谱技术（GC-MS），结合计算机检索对其化学成分进行分离和鉴定，用色谱峰面积归一化法计算各组分的相对含量。结果：水蒸气蒸馏法中鉴定出18种化学成分，SFE中鉴定出16种化学成分，二者的主要成分均含有D-柠檬烯，相对含量前者为57．87％，后者为81．18％；水蒸气蒸馏法提出成分中还含有25．12％的（＋）-2-蒈烯，而SFE法未检测到该成分。结论：两种提取方法成分结果有所不同，但都含有主要成分D-柠檬烯，含量以SFE法为高。     

多伞阿魏挥发油化学成分GC-MS分析及D-柠檬烯抗胃癌活性研究

目的 分析多伞阿魏新鲜药材挥发油的化学成分,初步探讨D-柠檬烯体外抗胃癌作用。方法 采用GC-MS分析多伞阿魏挥发油的化学成分;采用MTT法检测D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS和SGC-7901的增殖抑制作用;采用Hoechst33258荧光染色法观察D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS的影响;应用流式细胞仪检测D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS凋亡的影响。结果 多伞阿魏挥发油主要的化学成分有α-蒎烯（6.76%）、崁烯（8.38%）、α-月桂烯（4.66%）、3-蒈烯（4.84%）、D-柠檬烯（52.84%）、乙酸龙脑酯（5.24%）等。MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS和SGC-7901均具有不同程度的增殖抑制作用,呈现剂量依赖关系,其中D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS的增殖抑制作用较强,IC₅₀为（0.87±0.05）mmol·L^-1;D-柠檬烯作用于人胃癌细胞AGS后,细胞核被Hoechst 33258染色呈亮蓝色,随着药物浓度的增加蓝色荧光越强;流式细胞凋亡检测结果显示,与空白对照组比较,D-柠檬烯可诱导人胃癌细胞AGS发生凋亡,呈现剂量依赖关系。结论 多伞阿魏挥发油的主要物质基础为单萜类、倍半萜类化合物,其中D-柠檬烯的相对百分含量最高;D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS和SGC-7901均具有一定的增殖抑制作用,其中D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS的诱导凋亡活性最强。     

D-柠檬烯诱导人膀胱癌细胞周期阻滞及凋亡的研究

目的探讨D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞增殖、细胞周期分布以及凋亡的影响。方法用XTT法、流式细胞技术(碘化丙啶)和流式细胞仪AnnexinV法对D-柠檬烯处理后EJ细胞增殖、周期分布以及凋亡率进行检测。结果经2、4mmol/L浓度D-柠檬烯处理后,EJ细胞增殖活性(OD值)分别为0.801±0.016和0.148±0.008,与对照组(1.218±0.031)比较,生长受到明显抑制,差异有统计学意义(P0.05)。细胞周期分析显示,给药组的合成期(S)细胞百分比为23.05%,而未给药的对照组为38.59%,两组差异有统计学意义(P0.05)。另外,D-柠檬烯作用24h后的EJ细胞出现典型的亚二倍体凋亡峰,药物浓度越高凋亡细胞越多,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 D-柠檬烯对人膀胱癌EJ细胞具有显著的抑制作用;它还能使EJ细胞停滞于S期,并能诱导细胞凋亡。     

自制复方右旋柠烯乳剂溶解胆固醇结石的实验研究

本研究通过对人胆囊结石标本的成份分析,进而选用对各种主要成分有良好的溶解作用的药物配成4组复方溶石液,通过体外溶石实验,筛选出复方右旋柠烯乳剂的溶石效果最好。在此基础上,用家兔作动物体内溶石实验及动物急性、亚急性毒性试验,局部刺激试验。结果证明,自制复方右旋柠烯乳剂对CS有显著的溶解作用,溶石速度快,且毒副作用小,是一个很有前途的CS接触溶解剂。     

云南产野生和栽培薄荷中挥发油的GC-MS比较分析

目的分析比较野生和栽培薄荷Mentha haplocalyx。方法采收鲜活植株,在人工气候室培养4个月后,采用GC-MS法定性检测两者的挥发油组成。结果共检测53种化学成分,多以烯、醇及酮类物质组成,其中栽培品种香型主要由D-柠檬烯、桉油素、香芹酮(28.52%、14.91%、25.36%)组成,野生品种香型主要由D-柠檬烯、桉油素、β-水芹烯(12.21%、46.70%、20.19%)组成。结论野生和栽培薄荷的香型主要组成成分在构成和组成比例上存在不同,野生品种醇类成分的量较栽培品种的醇类成分高。     

Limonene,a food additive,and its active metabolite perillyl alcohol improve regeneration and attenuate neuropathic pain after peripheral nerve injury: Evidence for IL-1β, TNF-α, GAP,NGF and ERK involvement

BackgroundLimonene (LIM) and its main metabolite perillyl alcohol (POH) are ingredients found in food with promising chemical entities due to their pharmacological profile. In this study, we hypothesized that LIM and POH are two molecules capable of accelerating the regenerative process and alleviating neuropathic pain. Methods: Animals were treated daily (LIM, POH and saline) for 28 days and during this period evaluated for mechanical hyperalgesia, astrocyte participation by immunofluorescence for GFAP, and ELISA was used to quantify IL-1β and TNF-α in the spinal cord. Western blot analysis of the following proteins was also performed: GFAP, GAP-43, NGF and ERK. For motor deficit analysis, tests were performed to assess hind paw muscle strength and footprints through gait (SFI). Results: Both POH and LIM accelerated the regenerative process and improved motor deficits comparing to positive control; however, POH was more effective, particularly between the 2nd and 3rd week after the nerve injury, increasing GAP-43, NGF and the phosphorylated ERK immunocontent. Moreover, POH and LIM were able to reduce hyperalgesia and astrocytosis. Conclusions: Both substances, LIM and POH, improved the regeneration process and sensory and motor function recovery in the PNI model in mice by mitigating the inflammatory reactions and up-regulating the neurotrophic process.     

D-柠檬烯对K562细胞增殖及凋亡的影响

本研究探讨D-柠檬烯对K562白血病细胞增殖的影响及机制。应用MTT试验观察不同浓度D-柠檬烯作用后K562细胞增殖的改变；应用细胞形态学检查、流式细胞术、DNA琼脂糖凝胶电泳观察和检测细胞凋亡。结果表明：在0．125-1．0mmol／L浓度范围内，D-柠檬烯对K562细胞增殖的抑制作用呈现剂量依赖的关系。典型的细胞形态学改变、DNA琼脂糖凝胶电泳梯形条带及流式细胞仪检测出亚G1峰共同证实了D-柠檬烯能诱导K562白血病细胞凋亡。结论：D-柠檬烯抑制K562细胞的增殖并呈剂量依赖的方式，使细胞滞留于G1期，诱导其凋亡。     

右旋柠烯对大鼠大肠癌淋巴道转移的影响

目的观察右旋柠烯(D-Limonene)对大鼠大肠癌淋巴结转移及淋巴管生成的影响,为临床大肠癌术后治疗提供理论支持。方法二甲基肼诱发大鼠大肠癌模型40例。14周将大鼠分为治疗组和对照组,前者给予5%D-limonene(色拉油稀释)灌胃,后者给予等量色拉油做阴性对照。28周取材,免疫组化染色LYVE-1标记淋巴管,观察其分布。结果 LYVE-1标记的淋巴管多分布在癌周组织,中心区域未见淋巴管的阳性表达,D-limonene治疗组淋巴结转移率为5%,淋巴管数密度为2.4±0.83,与对照组(40%,6.1±1.35)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 D-limonene减少肿瘤组织淋巴管的生成,降低淋巴道的转移。