克氏综合征染色体异常一例

患者 25岁,男,婚后两年不育来诊.身高1.66 m,无胡须,也无明显喉结,颈短而偏粗,似轻度蹼颈状,表型似女性.外生殖器检查除睾丸较小(4 mL)外,无明显异常,性生活可.精液分析,精子计数为零.Y染色体微缺失(AZF基因)检测结果正常.内分泌检查:促卵泡生成素18.17 U/mL(正常参考值1.67～11.98 U/mL),促黄体生成素17.26 U/mL(正常参考值1.26～8.76 U/mL),雌二醇20.08 pg/mL(正常参考值0～41.42 pg/mL),睾酮2.49 ng/mL(正常参考值2.41～11.41pg/mL),垂体催乳素365.23 U/mL(正常参考值58.41～338.72 U/mL).临床诊断为不育症.染色体检查,计数核型200个,全部核型为47,XY,i(Xq)(图1),其父母及一弟染色体核型均正常.     

应用丙基硫氧嘧啶复制动脉粥样硬化模型中对大鼠心脏损伤的影响

目的通过高脂饲料结合免疫损伤方法复制大鼠动脉粥样硬化模型,并观察丙基硫氧嘧啶在动脉粥样硬化模型复制中对大鼠心脏损伤的影响。方法选择36只雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、高脂饲料组和高脂饲料+丙基硫氧嘧啶组,后两组同时辅以免疫损伤和腹腔注射VD3,饲养90 d后,测定和观察血液生化指标、病理变化、免疫组化情况。结果 (1)高脂+丙基硫氧嘧啶组与高脂组和正常组相比较,心肌损伤指标肌酸激酶、肌酸激酶同工酶差异均有显著性(P<0.05);(2)HE染色发现高脂+丙基硫氧嘧啶组心肌细胞排列紊乱、水肿,血管内壁增厚,泡沫细胞和少量炎性细胞浸润;(3)免疫组化法方法测定心肌细胞中Bcl-2和Bax的表达,高脂+丙基硫氧嘧啶组表达显著升高(P<0.05),心肌细胞凋亡加速。结论丙基硫氧嘧啶在应用于大鼠动脉粥样硬化模型复制中,对大鼠心肌病理学及Bcl-2、Bax蛋白表达产生影响。     

9p三体误诊为21三体一例

病例：一对年轻夫妇来做遗传咨询：有一个4岁智力低下的男孩，在某医院诊治时，染色体检查为21三体综合征，现在想再生育，应做哪些检查或治疗？将患儿当时做的“染色体检查报告”和“染色体核型分析报告”拿给我们看，核型分析报告中的21号染色体三个排列中，其中一个比另两条21号大，且带纹显示与21号的深染区相反，我们认为此多出的一条不是21号染色体。在对夫妇进行咨询和全面检查后，未发现各系统异常，非近亲结婚，也无相应的家族史。建议他们将孩子带来，三人同时进行染色体检查，根据检查结果，再给予他们生育方面的指导和建议。     

pAFP-P53-EGFP靶向诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡

目的研究pAFP-P53-EGFP对AFP阳性肝癌细胞的靶向促凋亡作用。方法将SD大鼠AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2kb的AFP基因调控序列,导入pEGFP-N1质粒的启动子处,构建pAFP-EGFP同时引入P53基因片段,构建pAFP-P53-EGFP重组质粒。转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,流式细胞术分析各细胞凋亡情况。分别将质粒pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP转染HepG2细胞进行DNA ladder分析及电镜观察细胞超微结构。结果 pAFP-P53-EGFP重组质粒转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,各组细胞凋亡率分别为:HepG2组%gate=2.65±0.08;HeLa组%gate=0.42±0.025;SMMC7721组%gate=0.39±0.018。AFP阳性的HepG2细胞凋亡率明显高于SMMC7721、HeLa细胞(P<0.05)。且转染pAFP-P53-EGFP质粒的HepG2细胞出现明显的DNA ladder,细胞超微结构亦显示出现凋亡。结论 pAFP-P53-EGFP可以在AFP阳性细胞中相对专一表达,且pAFP-P53-EGFP可通过诱导细胞凋亡从而达到抑制肿瘤作用。     

微卫星DNA标记在近交系大鼠HFJ和MIJ遗传监测中的应用

目的用24对引物对近交系HFJ和MIJ大鼠的微卫星位点进行多态性分析,并选用近交系Lewis和F344大鼠作为对照,进行比较分析。方法用传统的酚-氯仿法分别提取4个近交系大鼠MIJ 、HFJ、Lewis和F344的基因组DNA,选取大鼠24个微卫星位点,通过PCR扩增,扩增产物经过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染,根据电泳结果,比较分析4种品系近交系大鼠之间微卫星多态性。结果4种品系及品系内不同个体的近交系大鼠在24个微卫星位点上的扩增产物均出现一个条带,MIJ和HFJ大鼠在品系间和品系内均表现为单态性,同Lewis和F344的扩增结果比较,14个位点显示多态性,有10个位点显示单态性。结论两个近交系大鼠品系MIJ和HFJ符合近交系要求,筛选出的14个多态性微卫星位点可用于有关近交系大鼠的遗传背景监测。     

模拟调强技术照射鼻咽癌细胞的生物效应机制研究

目的模拟调强放射治疗（IMRT）模式研究延长分次照射时间对人鼻咽癌细胞系CNE1放射生物效应的影响。方法实验分为急速照射组、15min模拟和30min模拟组,采用6MVX线照射0、1、2、4、6、8Gy。运用克隆分析法计算细胞存活分数,并用单靶多击模型拟合细胞存活曲线,求出CNE1细胞放射生物学参数。结果3d照射中CNE1细胞急速照射组细胞存活率为7．19％,15min模拟组和30min模拟组细胞存活率分别为8．83％和9．90％,增加22．7％和37．6％。IMRT模式组随着单次剂量时间延长到15min和30rain,与急速照射组比较,细胞存活率明显增加（P〈0．05）。结论IMRT模式单次剂量输出时间延长将使CNE1细胞存活率增加明显,模拟调强照射模式下随分次照射时间延长,相对剂量率降低。从而导致生物效应下降。     

含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP质粒诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡

目的：观察含AFP基因调控序列的载体对AFP阳性肝癌细胞的靶向致凋亡作用。方法：将AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2 kb的AFP基因调控序列,构建pAFPEGFP载体,分别转染人肝癌HepG2（AFP阳性）、人肝癌SMMC7721（AFP阴性）和人宫颈癌HeLa（AFP阴性）细胞,荧光显微镜下观察EGFP荧光蛋白表达强度。引入P〖STBX〗53〖STBZ〗基因片段,构建pAFPP53EGFP重组质粒,转染HepG2、SMMC7721和HeLa细胞,Western blotting检测各组细胞P53蛋白的表达,流式细胞术分析各组细胞凋亡率及细胞周期。结果：成功构建了pAFPEGFP和pAFPP53EGFP重组质粒。pAFPEGFP转染后,AFP阳性的HepG2细胞中EGFP荧光蛋白表达显著高于AFP阴性的SMMC7721和HeLa细胞。pAFPP53EGFP转染后,HepG2细胞中P53蛋白的表达量明显高于SMMC7721和HeLa细胞;HepG2细胞的G1期细胞及细胞凋亡率明显高于SMMC7721和HeLa细胞\[(66.7±0.25)% vs（50.5±0.18）%,（51.0±0.20）%,P<0.05;（2.65±008）% vs（0.42±003）%,（0.39±0.02）%,P<0.05\], 但S期细胞明显低于转染后SMMC7721和HeLa细胞\[(20.1±022)% vs（29.8±018）%,（37.8±0.21）%,P<0.05\]。结论：含AFP基因调控序列的pAFPP53EGFP载体可专一性地作用于AFP阳性肝癌细胞,引起肝癌细胞周期阻滞和凋亡。     

犬传染性肝炎DNA疫苗安全性评价

目的 研究犬传染性肝炎核酸疫苗pVAX1-CpG-Loop的安全性.方法 BALB/c小鼠随机分为4组,高剂量组(肌内注射每只200 μg)、低剂量组(肌内注射每只100 μg)、联合免疫组(肌内注射每只100μg,皮下注射50μg,滴鼻每只50μg)和PBS组,每两周免疫1次,共免疫3次.末次免疫后4周、6个月检测血常规和血液生化及对F1代的影响,用PCR和RT-PCR的方法检测DNA疫苗的生物学分布和存留时间,末次免疫后4周和6个月取脏器观察病理损伤.结果 各剂量组的主要血液学检测指标、对F1代的影响差异无显著性.末次免疫后4周各剂量组AST明显高于对照组.DNA疫苗在注射部位可存留8周,其中高剂量组和低剂量组在肝、脾、肾和注射部位有分布,联合免疫组在肺组织也有分布.末次免疫后4周小鼠肝肾有淋巴细胞浸润,6个月后慢性炎症明显好转.结论 由犬传染性肝炎病毒DNA疫苗引起的肝肾损伤是一过性的,并且pVAX1-CpG-Loop没有整合到宿主基因组,也没有传递给F1代.     

克氏综合征染色体异常一例

患者 25岁,男,婚后两年不育来诊.身高1.66 m,无胡须,也无明显喉结,颈短而偏粗,似轻度蹼颈状,表型似女性.外生殖器检查除睾丸较小(4 mL)外,无明显异常,性生活可.精液分析,精子计数为零.Y染色体微缺失(AZF基因)检测结果正常.内分泌检查:促卵泡生成素18.17 U/mL(正常参考值1.67～11.98 U/mL),促黄体生成素17.26 U/mL(正常参考值1.26～8.76 U/mL),雌二醇20.08 pg/mL(正常参考值0～41.42 pg/mL),睾酮2.49 ng/mL(正常参考值2.41～11.41pg/mL),垂体催乳素365.23 U/mL(正常参考值58.41～338.72 U/mL).临床诊断为不育症.染色体检查,计数核型200个,全部核型为47,XY,i(Xq)(图1),其父母及一弟染色体核型均正常.     

罕见的染色体复杂易位一例

患者 男,27岁.因婚后不育就诊,本人表型、智力、身材正常.各系统检查未发现异常.男性第二性征发育正常,外生殖器官发育良好,婚后性生活正常.