实验动物生产与使用中的环保措施初探

综述讨论实验动物生产和使用中有关环境保护方面的管理措施和经验交流,促进工作开展,提高管理水平。     

近交系HFJ大鼠血清中IL-1β、IL-2和IL-10观察研究

目的比较观察本实验室培育的近交系HFJ大鼠和Wistar大鼠血清中IL-1β、IL-2和IL-10的含量。方法 HFJ大鼠和远交群Wistar大鼠各10只,应用ELISA法分别检测其血清IL-1β、IL-2和IL-10水平。结果 HFJ大鼠血清中IL-1β、IL-2的含量与Wistar大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05),HFJ大鼠血清中IL-10的含量高于Wistar大鼠组,差异有统计学意义(P<0.05)。且HFJ大鼠的IL-1β、IL-2和IL-10总体离散度明显小于Wistar大鼠组。结论 HFJ大鼠血清IL-10高于Wistar大鼠且近交系HFJ大鼠的IL-1β、IL-2和IL-10,测定值较为均一,离散度均低于Wistar大鼠。     

实验动物皮肤病原真菌核酸鉴定方法的建立

目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌.方法选取真菌CHS1基因中一段序列设计皮肤真菌通用引物和选取一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应（PCR）扩增三种动物皮肤病原真菌标准株：须毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌.结果两种引物扩增产物片段大小在三种真菌之间有明显不同.结论本实验方法可快速特异性检测实验动物皮肤病原真菌.     

同型半胱氨酸经甲基化修饰下调去卵巢大鼠主动脉雌激素受体α基因的表达

目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠雌激素受体α(ERα)基因表达和其启动子CpG岛甲基化的影响。方法高效液相色谱仪检测血浆Hcy水平;RT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测ERαmRNA表达水平及基因启动子CpG岛的甲基化状态。结果去卵巢和给予甲硫氨酸饮食均可升高大鼠血浆Hcy水平。去卵巢和Hcy均可使大鼠ERαmRNA表达减少,但5′-Aza可使细胞ERαmRNA表达增多。假手术组大鼠主动脉ERα基因启动子有2例(20%)存在甲基化,去卵巢组有3例(30%)存在甲基化,而去卵巢 Hcy组有6例(60%)存在甲基化,对照组细胞ERα启动子CpG岛完全去甲基化,Hcy组细胞甲基化增强,5′-Aza使细胞去甲基化。结论Hcy可经甲基化修饰方式下调去卵巢大鼠主动脉ERαmRNA表达。     

用电子表格系统设计实验动物饲料配方的方法研究

利用桑原子表格系统(SYB)对实验动物饲料配方的营养成分进行计算．具有方法简便、速度快和修改调整数值容易等优点，可以省略以往使用手工计算的繁琐过程，与已经开发出的一些计算机设计实验动物饲料配方的运算程序比较，该方法对使用者无需要求太多的计算机运算知识，容易使更多的人掌握使用。     

玉米秸垫料饲养SD大鼠的安全性评价

目的：观察玉米秸垫料用于饲养SD大鼠的安全性。方法：将SD大鼠随机分为玉米秸垫料组、对照组，饲养6个月，测定其血液生化指标，观察实质脏器组织切片。结果：玉米秸垫料对SD大鼠的8种血液生化指标影响不显著（P〉O．05），组织切片观察未见有意义的病理改变。结论：玉米秸垫料在实际应用中是安全的。     

犬传染性肝炎核酸疫苗的构建及免疫效果评价

目的获得犬传染性肝炎保护性抗原Loop重组蛋白及pVAX1-CpG-Loop重组质粒，并评价其诱导特异性免疫应答的水平。方法PCR扩增犬腺病毒Ⅰ型抗原表位Loop基因，构建至原核表达载体pET28a（＋）和真核表达载体pVAX1-CpG（＋）中；pET28a-Loop重组质粒转化BL21（DE3），表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析、亲和层析纯化抗原蛋白，采用肌内注射、电转导方法，prime-boost免疫策略，pVAX1-CpG-Loop重组质粒股四头肌注射免疫小鼠，抗原蛋白加强免疫后进行免疫效果的评价。结果ELISA方法检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生，淋巴细胞增殖实验（MTT和CCK-8）、细胞因子和CD^4＋、CD^8＋分子测定表明DNA疫苗可以诱发TH1型免疫；中和实验表明表达蛋白诱导小鼠产生的抗体具有中和病毒的作用。结论构建的犬传染性肝炎pVAX1-CpG-Loop核酸疫苗具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力。     

不同来源的艾氏腹水癌细胞株蛋白质特性的电泳及免疫组织化学比较研究

目的比较 3种来源的艾氏腹水癌 (Ehrlichascitescarcinoma,EAC)细胞蛋白质的特性。方法采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis ,PAGE)和免疫组织化学染色的方法观察 3种来源的EAC细胞蛋白质组成及Gai、TrkA、PDGF A、CDK2和NF κBp6 5抗体蛋白质表达。 结果电泳结果显示 ,北京来源的EAC蛋白质条带数最多 (2 8条 ) ,其次是山东来源的EAC(2 5条 ) ,武汉来源的EAC最少 (2 2条 ) ;免疫组织化学染色法测定 3个来源的EAC细胞的Gai、TrkA、PDGF A、CDK2和NF κBp6 5抗体蛋白质表达 ,结果不同来源的EAC与抗体的反应情况不同 ,山东来源的EAC 5种抗体的阳性表达分别为 0 %、 2 3.0 %、 0 %、 8.5 %和83.3%,北京来源的EAC分别为 77.8%、 6 .0 %、 9.0 %、 2 4 .0 %和 91.4 %,武汉来源的EAC分别为78.3%、4 .8%、8.0 %、2 7.8%和 10 0 %。结论 3种来源的EAC细胞蛋白质组成不仅有定量差异 ,而且有定性差异。     

玉米秸作为大鼠垫料对其生长发育及繁殖性能的影响

目的　对比观察不同原料制成的垫料对SD大鼠繁殖性能及其仔鼠生长发育的影响 ,探讨以玉米秸为原料制作实验动物新型垫料的可行性。方法　测定使用玉米秸、卫生纸、刨花三种垫料时SD大鼠的繁殖性能指标及仔鼠体重变化 ,并进行比较分析。结果　出生仔数、初生窝重、初生重三个指标三组间比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;离乳率三组间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,玉米秸组与卫生纸组差异有极显著性 (P <0 .0 1) ,玉米秸组最高 ,为99.79% ;三组之间胎次间隔差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,玉米秸组为 31.4 1d ;仔鼠生长发育指标 ,三组之间比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　玉米秸作为垫料时 ,SD大鼠能保持较高的繁殖性能 ,可以作为大鼠垫料使用。     

同型半胱氨酸对内皮细胞一氧化氮合酶活力及基因表达的影响

目的 观察同型半胱氨酸(Hcy)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)一氧化氮合酶(eNOS)活力及其基因表达的动态影响.方法 10、30、100、300 μmol · L-1Hcy与HUVEC分别培养24、48、72 h后,用HPLC测定细胞内不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内eNOS mRNA的表达,并分别测定细胞二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶(DDAH)、eNOS的活力和NO的含量.结果 HUVEC经不同浓度Hcy分别处理24、48、72 h后,其细胞内ADMA聚积增多,DDAH活性和eNOS活力降低,NO生成减少,且呈时间和浓度依赖性.但只有100 μmol · L-1 Hcy与HUVEC作用72 h时,才引起eNOS mRNA表达的减少.结论 Hcy对内皮功能的损伤可能通过抑制DDAH活性,引起ADMA聚积,从而降低eNOS活力,导致NO生成减少.此外,eNOS mRNA表达的抑制也是Hcy诱导的内皮功能障碍的机制之一.