miR-429和Bmi-1 mRNA在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究miR-429和Bmi-1 mRNA在肺癌（LC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系，并探讨其表达水平对LC患者预后的预测意义。方法：选取2013年1─12月在河北医科大学第四医院就诊的60例LC患者癌组织及癌旁组织，实时荧光定量PCR（qPCR）技术检测组织中miR-429及Bmi-1 mRNA的表达水平，并分析二者之间表达水平的关系及其与患者临床病理指标及预后之间的关系。结果：与癌旁组织比较，LC组织中miR-429表达水平明显降低，而Bmi-1 mRNA的表达水平明显升高（P < 0.01）。LC组织中miR-429低表达而Bmi-1 mRNA高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移，同时患者生存期较短。结论：LC组织中低表达miR-429及高表达Bmi-1 mRNA可能是患者临床进展及预后较差的预测指标。     

食管鳞癌中LncRNA DLEU1的表达及对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因1(DLEU1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达,及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响.方法 收集58例手术切除的ESCC及其相应癌旁组织,RT-qPCR检测ESCC组织和细胞中DLEU1的表达水平.Log rank Test法分析ESCC组织中DLEU1的表达与患者临...     

CREB在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及其与患者临床特征、预后之间的关系。方法：选取2010年1—12月在河北医科大学第四医院就诊的60例ESCC患者癌组织及癌旁组织，采用Western blot及免疫组化技术检测组织中CREB蛋白的表达水平，并分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。结果：ESCC组织中CREB表达水平较癌旁组织明显升高（P < 0.01）。组织中CREB高表达的患者往往瘤组织较大、临床分期较晚、更易发生淋巴结转移，同时患者5年总生存率较低而累积复发率较高（P < 0.05）。结论：ESCC组织中CREB表达水平明显升高，且高表达CREB的患者往往提示临床进展及较差预后。因此，CREB具有成为ESCC相关肿瘤标志物的潜力。     

桥接整合因子1 去甲基化诱导细胞周期阻滞抑制食管鳞状细胞癌EC109细胞增殖

目的：分析桥接整合因子1（bridging integrator-1, Bin1）去甲基化对Bin1 基因表达和食管鳞状细胞癌EC109 细胞增殖能力的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法：甲基化特异性PCR（methylation specific polymerase chain reaction, MSP）法检测去甲基化药物5-氮杂-2''脱氧胞苷（5-Aza-2''-deoxycytidine, 5-Aza-dc）处理后EC109 细胞Bin1 启动子区域的甲基化状态,用qPCR、Western blotting 和MTT法分别检测单独5-Aza-dc 和5-Aza-dc 加转染Bin1 基因干扰片段（Bin1 siRNA）处理对EC109 细胞Bin1 mRNA及其蛋白表达和细胞增殖能力的影响,流式细胞术和Western blotting 检测5-Aza-dc 处理后EC109 细胞周期和细胞周期相关蛋白（Cyclin D1 与CDK4）表达的变化。结果：去甲基化药物5-Aza-dc 处理后,EC109 细胞Bin1 基因启动子区域发生去甲基化。5-Aza-dc 处理的Bin1 去甲基化EC109 细胞Bin1 mRNA和蛋白表达明显上调（均P<0.05）,细胞增殖能力明显下降（P<0.05）,细胞阻滞在G0/G1 期,表现为S 期细胞比例显著减少,细胞周期相关蛋白Cyclin D、CDK4 表达均明显下调（均P<0.05）。Bin1 去甲基化EC109 细胞转染Bin1 siRNA后,Bin1 mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖能力增强（均P<0.05）。结论：Bin1 基因启动子区域在EC109 细胞中呈完全甲基化状态,5-Aza-dc 去甲基化可使食管鳞癌细胞EC109 细胞Bin1 表达升高,通过降低细胞周期相关蛋白表达诱导细胞周期阻滞抑制EC109 细胞增殖。证实表观遗传学变化可能与食管癌细胞恶性增殖有关,可为食管癌治疗提供新的思路。     

2012-2015年肿瘤专科医院住院患者医院感染现患率调查

摘要:目的 掌握肿瘤医院住院患者医院感染现患率情况,为制定医院感染控制措施提供参考。方法 通过横断面调查方法,连续4年对调查日所有住院患者医院感染现患率进行了调查。结果 连续4年分别在不同月份的某日进行的调查,实查率为98.06%,每次调查均有效。2012-2015年医院感染现患率分别为8.05%、7.54%、7.31%、3.92%;重症医学科是感染率最高的科室;感染部位以下呼吸道感染、泌尿道为主;革兰阴性菌居首位;4年抗菌药物使用率分别为13.04%、4.97%、11.00%、41.12%;治疗用药分别为86.58%、95.45%、77.60%、69.26%;一联用药分别占76.51%、80.30%、86.40%、87.74%;使用抗菌药物病原体送检率分别为53.69%、56.06%、36.00%、25.00%。结论 本医院连续4年监测住院患者医院感染现患率,反映了医院感染发生特点,可根据结果有针对性地采取措施,有效控制医院感染的发生。     

过继性免疫治疗对非小细胞肺癌患者外周血T细胞亚群的影响

目的 研究细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞治疗对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者外周血T细胞亚群及一般情况的影响。方法 采集非小细胞肺癌患者外周血,常规方法体外扩增CIK细胞,分三次回输患者体内,流式细胞仪检测非小细胞肺癌患者治疗前与治疗3次后T细胞亚群的变化,分析其与健康对照组相比外周血T细胞亚群的差异,并观察CIK细胞治疗前后患者一般情况变化。结果 与对照组相比,NSCLC患者外周血中CD3⁺ T 细胞比例、CD3⁺CD4⁺T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺ 比值显著下降（P<0.05）,CD3⁺CD8⁺ T细胞比例显著升高（P<0.05）。CIK细胞治疗后与治疗前,CD3⁺ T 细胞比例、CD3⁺CD4⁺ T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺ T细胞比值显著升高（P<0.05）,CD3⁺CD8⁺ T细胞比例显著降低（P<0.05）。CIK细胞治疗后与对照组相比,CD3⁺ T 细胞比例、CD4⁺/CD8⁺T细胞比值显著下降（P<0.05）。CD3⁺CD4⁺ T细胞比例、CD3⁺CD8⁺ T细胞比例升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。CIK细胞治疗前Tregs较对照组显著升高（P<0.05）。CIK细胞治疗后与治疗前相比,Tregs比例显著下降（P<0.05）。结论 CIK细胞输注治疗可以增强NSCLC患者的免疫功能,并改善患者的一般情况,提高生活质量,且未见明显不良反应。     

IL-6与VEGF在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的：检测食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer,ESCC）患者血清中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和ESCC组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达及其两者关系,并研究两者表达对ESCC的临床意义。方法：收集河北医科大学第四医院胸外科于2014年1月至2015年1月期间行ESCC切除术的患者52例,每例患者均取原发灶组织和癌旁组织标本;同时在术前抽取患者外周血5 ml,再取52例健康体检者外周血5 ml为血清对照。应用ELISA法测定ESCC患者血清中IL-6的水平,免疫组化技术检测VEGF在ESCC组织中的表达,RT-PCR法检测肿瘤组织中IL-6和VEGF mRNA的表达情况。结果：ESCC患者血清IL-6表达水平为（116.71±25.98）pg/ml,明显高于健康对照组的\[（78.43±9.36）pg/ml\]（P＜0.05）,血清中IL-6的表达水平与患者肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P＜0.05）。肿瘤组织VEGF蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织（67.31% vs 32.69%,P<0.01),且与患者肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P＜0.05）。肿瘤组织中IL-6 mRNA的表达与VEGF mRNA的表达呈显著正相关（r=7.113,P＜0.05）。结论：ESCC患者肿瘤组织中IL-6和VEGF均呈高表达且两者呈正相关,两者可能在ESCC侵袭和转移中发挥重要作用。     

塞来昔布对T细胞淋巴瘤细胞增殖及侵袭功能的影响

目的：研究塞来昔布对T细胞淋巴瘤细胞增殖、化疗敏感性及侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法：分别用不同浓度（0、20、40及80μmol/L）塞来昔布处理T细胞淋巴瘤Jurkat和Hut78细胞系24、48和72 h后,采用MTT法检测Jurkat和Hut78细胞的增殖活性。再用40μmol/L塞来昔布处理Jurkat和Hut78细胞48 h后,采用MTT法检测其对化疗药物敏感性的影响;流式细胞术检测塞来昔布对Jurkat和Hut78细胞凋亡水平的影响;Transwell小室检测塞来昔布致Jurkat和Hut78细胞侵袭能力的变化;实时荧光定量PCR （qPCR）及Western blot技术分别从mRNA及蛋白水平检测塞来昔布对Jurkat和Hut78细胞系P38、P65、Bcl-2、Bax、MDR1、MMP2及MMP9表达水平的影响。结果：与对照组比较,20～80μmol/L塞来昔布作用于Jurkat和Hut78细胞不同时间后,细胞增殖活性均受到明显抑制（P<0.05）。40μmol/L塞来昔布对化疗药物的敏感性明显增强（P<0.05）,且凋亡水平明显增加（P<0.01）;与40μmol/L塞来昔布共培养的Jurkat和Hut78细胞,其穿透Transwell小室的能力明显下降（P<0.01）,且P38及Bax蛋白的表达水平均明显增加（P均<0.01）,而P65、MDR1、Bcl-2、MMP2及MMP9表达水平均明显降低（P均<0.01）。结论：塞来昔布对T表型淋巴瘤细胞增殖和侵袭能力具有明显抑制作用,提示其在T细胞淋巴瘤的临床治疗中具有应用前景。     

Bin1甲基化对食管鳞状细胞癌TE13细胞侵袭能力的影响

目的:检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞株TE13中(bridge integration factor1,Bin1)甲基化状态,分析去甲基化药物5-Aza-dC去甲基化前后Bin1表达水平、甲基化状态及细胞生物活性的变化,探讨ESCC发生的可能机制及治疗策略.方法:采用qRT-PCR方法检测去甲基化前后TE13细胞Bin1 mRNA的表达,MSP法检测ESCC细胞株TE13中Binl启动子区甲基化状态,划痕实验及Transwell实验分别检测去甲基化对TE13细胞迁移及侵袭能力的影响,Western blotting法检测Bin1与基质金属蛋白酶2(MMP-2)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达变化.结果:TE13细胞株中Bin1表现为完全甲基化状态,Bin1 mRNA呈低表达,经5-Aza-dC处理后Bin1 mRNA表达显著升高(P＜0.01);划痕试验及Transwell试验显示去甲基化处理可明显降低TE13细胞迁移、侵袭能力(P＜0.01);经5-Aza-dC处理后Bin1蛋白表达显著升高(P＜0.01),MMP-2和MMP-9蛋白表达显著降低(均P＜0.01).结论:DNA甲基化是Bin1低表达或缺失的重要机制之一,并可能通过调节MMP-2和MMP-9蛋白的表达,影响食管鳞状细胞癌细胞株TE13迁移、侵袭能力.     

基因通过 NF-κB途径抑制非小细胞肺癌A549细胞的迁移和侵袭能力

目的:研究桥接整合因子1(bridging intergrator-1,Bin1)基因过表达对非小细胞肺癌细胞株A549细胞迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其作用机制.方法:通过基因转染技术,利用阳离子脂质体将含有人全长Bin1基因序列的真核表达质粒CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1转染到A549细胞株,分别设置空白对照组及空质粒转染组,利用RT-PCR和West-em blotting分别检测各处理组细胞中Bin1基因和蛋白表达水平.通过细胞划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测Bin1过表达对A549细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blotting实验检测Bin1过表达对A549细胞内NF-κB磷酸化水平和迁移相关蛋白E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、MMP-9表达水平的影响.结果:与空白对照组和空质粒转染组相比,Bin1转染组A549细胞中Bin1基因和蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05);Bin1转染组细胞迁移、侵袭能力均较空白质粒组和空白对照组明显下降[穿膜细胞数:(50.50±3.15) vs (124.00±4.25),(130.00±4.37)个;均P＜0.05];与空白转染组和空白对照组相比,Bin1转染组细胞内NF-κB表达水平明显上调(P＜0.05)而p-NF-κB表达明显下调(P＜0.05),N-钙黏着蛋白、MPP-9明显下调(P＜0.05),E-钙黏着蛋白明显上调(P＜0.05).结论:Bin1过表达可以抑制A549细胞的迁移及侵袭能力,其机制可能与NF-κB途径的失活及细胞迁移侵袭相关蛋白表达变化有关.