腹腔镜袖状胃切除术对肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征中期疗效的临床研究

目的:探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)对肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAHS)的疗效,并分析其影响因素。方法:回顾分析2017年1月至2018年7月行腹腔镜袖状胃切除术的37例肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者的临床资料及随访资料,分析此术式对患者体重及OSAHS的控制情况,并采用单因素与多因素Logistic回归分析影响体重及OSASH控制效果的相关因素。结果:共37例患者完成手术并定期随访至术后12个月,患者术后体重指数呈下降趋势,额外体重减轻百分率达73.2%;阻塞性睡眠呼吸暂停综合征治疗有效率达91.89%,呼吸暂停低通气指数、夜间最低血氧浓度较术前均呈现明显改善趋势;单因素分析显示,性别、体重、额外体重减轻百分率、吸烟可影响LSG对OSAHS的疗效(P<0.05),额外体重减轻百分率、吸烟是影响LSG治疗病态性肥胖疗效的独立因素之一。结论:LSG可有效降低肥胖患者多余体重,具有可靠的减重疗效,同时对OSAHS患者具有良好的中期疗效,吸烟及额外体重减轻百分率可能是影响手术疗效的因素。     

胃袖带切除术对GK大鼠2型糖尿病的影响及其机理

目的研究胃袖带切除术（sleevegastrectomy,SG）对GK大鼠2型糖尿病（type2diabetesmellitus,T2DM）的治疗作用及其可能机理。方法将13只12周龄的GK大鼠随机分为2组：SG组7只和假手术组（SO组）6只,分别行SG术和假手术。于术前及术后1、4、10和26周测量2组大鼠的体质量、24h进食量、空腹血糖值、血清胰高血糖素样肽-1（glucagon-likepeptide-1,GLP-1）和血清生长激素释放肽（Ghrelin）浓度;于术后10周检测2组大鼠的粪便能量含量,并进行口服葡萄糖耐量实验（OGTT）和胰岛素耐受性实验（ITT）。结果①体质量：各时点2组大鼠的体质量比较差异均无统计学意义（P〉0．05）;与术前比较,术后1周2组大鼠的体质量均降低（P〈0．01）,术后10和26周的体质量均增加（P〈0．01）。②24h进食量：与SO组比较,术后4和10周SG组大鼠的24h进食量均较低（P〈0。05）。与术前比较,SG组大鼠术后1、4及10周的进食量均较低（P〈0．05）,SO组大鼠术后1周的进食量低于术前（P〈0．05）。③空腹血糖值：与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的空腹血糖值均较低（P〈0．01）。与术前比较,SG组大鼠术后各时点的空腹血糖值均较低（P〈0．01）,而SO组大鼠仅术后1周明显低于术前∽〈0．OD。④血清GLP-1水平：与SO组比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP．1水平均较高（P〈0．05）。与术前比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平较高（P〈0．05）,而术后SO组大鼠的血清GLP．1水平无明显变化（P〉0．05）。⑤血清Ghrelin水平：与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低（P〈0．01）。与术前比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低（P〈0．001）,而SO组大鼠的血清Ghrelin水平无明显变化（P〉0．05）。⑥曲线下面积（AUC）：SG组大鼠的AUC（OGTT和ITT）均较SO组低（P〈0．01）。结论SG术可以明显降低GK大鼠的空腹血糖值,改善葡萄糖耐量及增强胰岛素敏感性,该作用可能是GLP．1、Grelin等多种胃肠道激素共同作用的结果。SG术可能是潜在的非肥胖型T2DM的治疗方法。     

术前营养风险筛查对腹腔镜辅助结直肠癌患者术后恢复的影响

目的:探讨结直肠癌患者术前营养风险筛查(NRS)对腹腔镜根治手术后恢复的影响,分析导致预后不良的因素。方法:回顾分析2015年1月至2017年8月为120例结直肠癌患者行腹腔镜辅助结直肠癌根治性切除术的临床资料,通过进行NRS 2002营养风险筛查,将患者分为对照组(NRS 2002<3分,不存在营养风险)与观察组(NRS 2002≥3,存在营养风险),比较术前两组患者营养状况,分析术前营养状况对术后并发症及近期疗效的影响。采用单因素、多因素logistic回归分析对术后并发症的危险因素进行分析。结果:两组患者术前BMI、前白蛋白、总胆固醇及淋巴细胞数差异有统计学意义(P<0.05),术后各并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05),但总并发症发生率差异有统计学意义(P<0.05);两组腹腔引流量、排气时间、住院费用、病重率及60 d再入院率差异均无统计学意义(P>0.05);观察组术后输血量、输白蛋白量、手术前后体重差、术后住院时间高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素与多因素logistic回归分析显示,吸烟、糖尿病及术前存在营养风险是术后发生并发症的独立危险因素。结论:与术前不存在营养风险的患者相比,存在营养风险的患者术后并发症多,近期疗效差。术前应充分纠正患者营养状况,以减少并发症的发生,促进术后患者康复。     

shRNA干扰CDX2基因表达对裸鼠结直肠癌肝转移瘤的影响

目的:建立人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型,探讨干扰尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2,CDX2)基因表达对结直肠癌肝转移瘤的影响.方法:通过慢病毒载体将CDX2-shRNA体外转染人结直肠癌细胞SW480、HT29,筛选建立稳定干扰CDX2基因表达细胞株和阴性病毒细胞株;将稳定干扰CDX2基因表达的结直肠癌细胞(SW480-KD、HT29-KD)、空白对照细胞(SW480-CON、HT29-CON)和阴性对照细胞(SW480-NC、HT29-NC)接种到裸鼠脾下极包膜内,建立裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型,每天称量裸鼠体质量并观察其摄食、活动及精神情况;50 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝转移瘤情况.结果:成功构建裸鼠结直肠癌肝转移模型,H-E染色确认为结直肠癌肝转移.各细胞干扰组(SW480-KD、HT29-KD)裸鼠体质量明显低于相应空白对照组和阴性对照组[SW480-KD:(15.02±2.00) vs (18.00±2.48)、(18.03 ±2.05) g;F=3.761,P ＜0.05;HT29-KD:(15.39 ±2.16) vs (17.96 ±2.48)、(18.30±1.87) g;F=3.721,P ＜0.05].SW480-KD组肝转移瘤数目明显多于SW480-CON组和SW480-NC组[(57.83 ±22.56)vs (29.50±16.90)、(28.20±15.40)个;F=4.197,P＜ 0.05];HT29-KD组肝转移瘤数目明显多于HT29-CON组和HT29-NC组[(56.83 ±29.16) vs (26.40±12.76)、(21.00±11.50)个;F=4.467,P＜0.05)].结论:脾注射法裸鼠肝转移模型可作为体内研究基因功能的理想模型;干扰CDX2基因表达可促进结直肠癌SW480和HT29细胞在体内的转移.     

热诱导对8HSE修饰的hTERT启动子转录活性的增强作用

目的:探讨热诱导对8倍重复串联热休克元件(8HSE)修饰的人端粒酶逆转录酶启动子(h TERTp)转录活性及靶向性的影响。方法:用PCR法从人结肠癌基因组中克隆h TERTp;将单纯的h TERTp或8HSE修饰的h TERTp重组于双荧光素酶报告载体p GL4.2后,分别与内参质粒p GL4.74(含TK启动子)共转染h TERT高表达的SW480细胞株和h TERT低表达的MKN28细胞株,双荧光素酶法检测h TERTp在37℃及43℃下的转录活性。结果:PCR、酶切和DNA测序表明h TERTp克隆、8HSE合成及载体构建成功。37℃下,单纯h TERTp在SW480细胞中的转录活性明显高于MKN28细胞(P0.05),8HSE对h TERTp转录活性无增强作用,且在SW480细胞中8HSE对h TERT转录活性具有抑制作用;43℃下,单纯h TERTp的转录活性在两种细胞中无明显改变(P0.05),但与单纯h TERTp比较,8HSE修饰的h TERTp转录活性在SW480细胞中明显增强(P0.05),而在MKN28细胞中无明显改变(P0.05)。结论:热诱导对h TERTp转录活性无明显影响,但对8HSE修饰的h TERTp转录活性有明显的增强作用,且该调控元件靶向于h TERT高表达的肿瘤细胞。     

腹腔镜袖状胃切除术治疗病态性肥胖症合并2型糖尿病的疗效及相关因素分析

目的:探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)治疗病态性肥胖症合并2型糖尿病的临床疗效,并分析影响疗效的相关因素。方法:回顾分析2013年7月至2018年7月为45例病态性肥胖症合并2型糖尿病患者行LSG的临床资料及随访情况,分析手术对患者体重及血糖的控制情况,并应用单因素与多因素Logistic回归分析影响体重及血糖控制效果的相关因素。结果:45例手术均顺利完成,术后随访1年,患者体重、空腹血糖呈下降趋势,34例减肥效果佳或良好(额外体重减轻百分率≥50%),28例2型糖尿病治疗明显有效,有效率为62.2%。单因素Logistic回归分析显示,BMI、遵循术后指导及术后胃饥饿素水平影响LSG治疗病态性肥胖症的疗效(P<0.05);额外体重减轻百分率、吸烟、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、术后胆汁酸水平影响LSG对2型糖尿病的疗效(P<0.05)。多因素回归分析显示,BMI、是否遵循术后指导及术后胃饥饿素水平是LSG对病态性肥胖疗效的独立影响因素(P<0.05);额外体重减轻百分率、吸烟及胰岛素抵抗指数是LSG对2型糖尿病疗效的独立影响因素(P<0.05)。结论:LSG不仅治疗病态性肥胖症疗效确切,对于合并的2型糖尿病也有明显缓解作用,值得推广应用。     

尾型同源盒转录因子2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其转染对结肠癌细胞生长的影响

目的:构建尾型同源盒转录因子2(CDX2)shRNA慢病毒表达载体,并观察下调CDX2基因其对结肠癌细胞生长的影响。方法:根据CDX2 m RNA序列设计shRNA,并合成shRNA的互补序列,通过连接酶链接到GV248载体上,用测序方法鉴定阳性克隆后,将构建好的慢病毒表达载体与慢病毒包装载体用Lpofectamine 2000共转染293T细胞,产生慢病毒颗粒并用稀释法进行滴度测定。将CDX2 shRNA慢病毒表达载体转染人结肠癌细胞SW480、HT29后,分别用q RT-PCR和Western blot检测CDX2 m RNA及蛋白水平,CCK8实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力。结果:DNA测序鉴定证实,CDX2 shRNA表达片段正确插入GV248载体中,包装后的病毒滴度为1×109TU/m L;SW480、HT29细胞转染CDX2-shRNA慢病毒表达载体后,CDX2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(均P0.05),但细胞的增殖与克隆形成能力无明显改变(均P0.05)。结论:成功构建shRNA慢病毒表达载体,其转染结肠癌细胞后能有效地抑制CDX2基因的表达;下调CDX2基因对人结肠癌细胞的增殖无明显影响。