糖基化在肿瘤免疫中的作用

正蛋白质的糖基化是糖类在糖基转移酶(Glycosyltransferase,GTs)的催化下以共价键的形式与肽链连接的过程。根据糖肽键的不同,糖基化分为以下四种类型:N-连接糖基化、O-连接糖基化、糖基磷脂酰肌醇(Glycophosphatidylinositol,GPI)锚定糖基化和C-甘露糖化[1]。蛋白质的糖基化通过影响新生肽链的空间结构,定位及稳定性,而参与到细胞识别     

下调GnTⅣa表达对肝癌Hca-F细胞增殖及侵袭的影响

目的：探讨慢病毒介导的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅳa （N-acetylglucosaminyltransferase Ⅳa,GnTⅣa）表达下调对小鼠肝癌Hca-F细胞体外增殖及侵袭能力的影响。方法：针对GnTⅣa的编码基因Mgat4a,构建含shRNA干扰序列的慢病毒表达载体pll3.7/Mgat4a-shRNA并包装慢病毒颗粒,感染Hca-F细胞。RT-PCR 及流式细胞术分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染对Hca-F细胞Mgat4a mRNA及GnTⅣa表达的影响,CCK-8法和Transwell侵袭实验分别检测Mgat4a-shRNA重组慢病毒感染在体外对Hca-F细胞增殖和侵袭能力的影响。结果：慢病毒能够高效感染小鼠肝癌细胞Hca-F,Mgat4a-shRNA组感染效率达72%。与Hca-F细胞和Mock-shRNA组相比,Mgat4a-shRNA组细胞内Mgat4amRNA\[（0.53±0.2） vs（2.97±02）、（2.90±0.1）;均P<0.05\]和GnTⅣa\[（47.80±2.25）vs（394.61±5.27）、（378.61±4.38）;均P<0.05\]表达显著降低;增殖能力\[细胞增殖抑制率：（46.9±0.02）%vs （0.82±0.03）%、 0,P<0.01\]和体外侵袭能力\[穿过滤膜的细胞数：（18±3）vs （42±4）、（38±3）个,均P<0.05\]显著下降。结论：慢病毒介导shRNA下调GnTⅣa的表达能够抑制小鼠肝癌细胞 Hca-F的增殖及体外侵袭。     

两种不同相对分子质量的壳寡糖对小鼠免疫功能的影响

目的研究两种不同相对分子质量的壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)对小鼠免疫功能的影响。方法小鼠腹腔注射壳寡糖S-COS(平均相对分子质量800),壳寡糖B-COS(平均相对分子质量1700),硫酸岩藻糖(Fucoidan)120mg.kg-1,每日1次,连续14d,第10天注射5%牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)200μL/只进行免疫。于第15天检测脾指数,血清中细胞因子(IL-10、TNF-α、IFN-γ)含量,脾中淋巴细胞增殖,以及脾中CD4+T细胞增殖。结果 S-COS和B-COS都能够促进CD4+T细胞增殖,另外,B-COS还能增加脾指数,促进细胞因子IL-10和TNF-α分泌,以及脾中淋巴细胞增殖,而S-COS和硫酸岩藻糖则不能。结论 B-COS对小鼠免疫功能的调节作用优于S-COS。     

超声辐照超声微泡介导siRNA 转染膀胱癌T24细胞的实验研究

 目的探讨超声辐照超声微泡介导siRNA 转染人膀胱癌T24 细胞的有效性。方法使用超声辐照超声微泡的方法介导FITC-siRNA转染人膀胱癌T24 细胞,通过荧光显微镜及流式细胞学方法观察siRNA的转染效率,使用MTT方法观察细胞活力。结果与各阴性对照组相比,超声辐照超声微泡的方法可以明显增加siRNA向T24 细胞中的转染效率。随着超声辐照强度的增加,siRNA的转染效率在一定范围内有所提高,同时也增加了对T24细胞毒性。与脂质体介导的siRNA体外转染相比,超声辐照超声微泡介导的siRNA 转染效率仍然较低。结论超声辐照超声微泡能够有效提高siRNA 转染膀胱癌细胞的效率,有可能为膀胱癌的基因靶向治疗提供新的转染手段。     

唾液酸在疾病中作用的研究进展

[摘要]　唾液酸是一类含九个碳原子的单糖衍生物的总称,人体内的唾液酸主要为N-乙酰神经氨酸和N-羟乙酰神经氨酸,大多由葡萄糖代谢生成。唾液酸广泛分布于真核细胞表面糖蛋白或糖脂寡糖链的最末端,是细胞膜上糖蛋白、糖脂的重要成分。本综述主要阐述了唾液酸在肿瘤、炎症、免疫、病原微生物以及感染性疾病中的最新研究进展。     

细胞表面α2,6-唾液酸在肝癌细胞粘附中的作用及机制研究

【目的】 分析比较细胞表面不同连接方式的唾液酸在小鼠肝癌高淋巴道转移细胞株Hca-F和低淋巴道转移细胞株Hca-P中的表达,并研究差异性表达的α2,6-唾液酸在肝癌细胞淋巴结黏附行为中的作用及分子机制。 【方法】 利用免疫细胞化学、流式细胞技术,分析肝癌细胞表面不同连接方式的唾液酸在Hca-F和Hca-P中的表达差异;通过RNA干扰技术干预差异表达的唾液酸转移酶,并使用RT-PCR、蛋白质印迹及Lectin-blot方法检测其干扰效果;利用细胞黏附实验和凝集素阻断实验,检测干扰前后、阻断前后Hca-F细胞黏附能力的变化;利用FAK信号通路特异性抑制剂,探讨α2,6-唾液酸介导肝癌细胞黏附行为的分子机制。 【结果】 α2,6-唾液酸在小鼠肝癌高、低转移细胞株中表达具有显著差异,而α2,3-唾液酸的表达无显著差异;当通过RNA干扰技术特异性使Hca-F细胞中ST6Gal-I表达下调时,其细胞表面α2,6-唾液酸表达减少,削弱Hca-F细胞对淋巴结的黏附能力降低。此外,ST6Gal-I表达下调可抑制p-FAK及下游p-paxillin蛋白分子的表达。 【结论】 细胞表面α2,6-唾液酸可通过FAK信号转导通路正性介导肝癌细胞的黏附行为,为肝癌的治疗提供新的靶点。     

糖基化在肿瘤相关上皮间质转化中的作用

[摘要] 糖基化是生物体内蛋白质的基本修饰方式之一,通过影响蛋白质的折叠、运输和定位,从而参与人体多种生物学功能的调节。研究表明,异常糖基化修饰参与生物体内多种病理生理过程,包括恶性肿瘤和一些炎症性疾病,尤其与肿瘤的转移和侵袭密切相关。而上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）指上皮细胞失去紧密连接转化为间质的复杂过程,是肿瘤转移的重要机制之一。本文主要对蛋白质糖。