5-脂氧合酶在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达

目的 探讨5-脂氧合酶(5-LO)在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达。方法 分离大鼠腹腔巨噬细胞培养一定时间，用高效液相色谱、Western blot和RT—PCR分别观察5-LO催化的代谢产物的生物合成、5-LO和5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)表达的变化，并用毛细管电泳定量分析RT—PCR产物。结果 体外培养24h对5-LO以及FLAP的表达没有明显影响，5-LO酶活性没有明显的变化；培养到第72小时，5-LO mRNA和蛋白表达没有明显的影响，但FLAP几乎检测不到，mRNA的量明显降低，检测不到白三烯B4(LTB4)和5-羟二十碳四烯酸(5-HETE)。进一步培养到第120小时，5-LO的mRNA和蛋白表达明显下降，FLAP的mRNA和蛋白检测不到。毛细管电泳定量分析结果显示，培养1、24和72h，5-LO的相对表达量没有明显变化，培养到120h则下降了约80％。结论 5-LO可以在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中稳定表达72h。     

Bcl-xL反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤化疗药物敏感性的影响

目的观察Bcl-xL反义寡核苷酸(ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤化疗药物顺铂敏感性的影响.方法建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型,分为对照组、ASODN治疗组、顺铂(DDP)治疗组、ASODN DDP联合治疗组,观察裸鼠瘤体变化及组织形态学改变.结果单独应用ASODN和DDP治疗组的抑瘤率分别为14.2%和30.9%,而在相同条件下,联合用药组效果最明显,抑瘤率为52.2%,较ASODN、DDP单独应用差异有显著性.结论 ASODN与DDP联合化疗有协同作用,ASODN可以提高肿瘤细胞对顺铂的敏感性,具有增效作用.     

Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸抑制鼻咽癌细胞增殖活性的研究

目的　观察并探讨阳离子脂质体 (L ipofectin,L ip)介导的 bcl- x L 反义寡核苷酸 (antisenseoligodeoxynucletide,ASODN)对鼻咽癌细胞株 CNE- 1、CNE- 2 Z细胞体外抑制增殖活性的影响。方法　人工合成硫代修饰型 bcl- x L 反义寡核苷酸 (ASODN) ,与 L ip混合制备成 L ip+oligodeoxynucletide(ODN)复合物 ,处理鼻咽癌细胞株 CNE- 1、CNE- 2 Z细胞 ,用 MTT比色法检测细胞存活状态 ;流式细胞术检测细胞凋亡。结果　 ASODN处理细胞 3 6小时 ,于 40 0 μm ol/ L 浓度条件下鼻咽癌细胞的增殖受到明显抑制 ,且这一抑制作用随着浓度的增加与时间的延长而加强 ,与硫代修饰型随机序列对照寡核苷酸 (sequence control ODN,SCODN)组及单独脂质体组比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论　 bcl- x L 反义寡核苷酸可显著抑制鼻咽癌细胞株 CNE- 1、CNE- 2 Z细胞体外增殖活性 ,其抑制作用可能通过封闭 bcl- x L 基因表达实现 ,bcl- x L 反义寡核苷酸有可能成为一种潜在性的基因治疗药物用于鼻咽癌的治疗     

鼻咽癌患者血清和尿中假尿苷检测的临床意义

目的:探讨血清和尿中假尿苷(ψ)检测对鼻咽癌的临床价值.方法:用高效液相色谱法测定了50例正常人、18例鼻咽炎症患者、20例鼻咽良性占位性病变患者和68例鼻咽癌患者血清和尿中ψ的含量.结果:鼻咽癌组的平均血清ψ4.32±1.40 mol/ml,显著高于鼻咽炎症组3.07±0.33(P<0.001)、鼻咽良性占位病变组2.97±0.29(P相似文献   

侧柏总黄酮的抗炎作用

目的研究侧柏总黄酮的抗炎作用。方法以二甲苯致小鼠耳肿胀及角叉菜胶诱发大鼠足爪肿胀模型分别探讨侧柏总黄酮对小鼠耳片肿胀及大鼠足爪肿胀的抑制作用。测定大鼠足爪组织中一氧化氮 (NO)及前列腺素E2 (PGE2 )的含量。结果侧柏总黄酮在 12 5～ 5 0 0mg·kg-1内呈剂量依赖地抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀 ,2 5 0mg·kg-1剂量能显著抑制大鼠足爪肿胀 ,其作用强于2 0mg·kg-1的地塞米松。侧柏总黄酮能抑制大鼠炎症足爪组织NO及PGE2 的生物合成。结论侧柏总黄酮具有较强的抗炎作用 ,其抗炎作用可能与抑制NO及PGE2 的生物合成或释放有关。     

恶性肿瘤患者血清和尿中假尿苷检测的意义

为探讨血清和尿中假尿苷（ψ）对恶性肿瘤的诊断价值，用高效液相色谱法测定了５０例正常人、６８例鼻咽癌、４２例原发性肝癌、４１例肺癌、２４例急性白血病和相应部位良性疾病患者血清和尿中ψ的含量。正常人的血清和尿中ψ水平分别为３．０８±０．４９ｎｍｏｌ／ｍｌ、２１．６±２．９ｎｍｏｌ／μｍｏｌ肌酐。鼻咽癌、原发性肝癌、肺癌、急性白血病患者血清ψ分别为４．３２±１．４０、６．７４±３．４４、５．１０±１．９２、６．００±２．０１ｎｍｏｌ／ｍｌ，尿ψ分别为２８．６±６．２、３６．９±１１．７、３１．９±８．３、３５．８±７．０ｎｍｏｌ／μｍｏｌ肌酐，均分别高于相应部位良性疾病患者和参考值。ψ升高的程度与肿瘤大小及分期正相关，且随病情缓解而下降。表明血清和尿中ψ用于鼻咽癌、原发性肝癌、肺癌、急性白血病等恶性肿瘤的诊断，特别是观察病情和疗效有较高的应用价值。     

侧柏总黄酮的分离纯化及对5-脂氧合酶的抑制作用

 目的从侧柏叶中分离纯化活性成分总黄酮并探讨其对5-脂氧合酶的抑制作用。方法石油醚加热回流除去大部分叶绿素等脂溶性杂质,再用体积分数为50%乙醇加热回流提取;提取液浓缩去除乙醇后用乙酸乙酯提取,减压浓缩得粗黄酮;粗黄酮过聚酰胺色谱柱,用体积分数为70%的甲醇洗脱,浓缩得总黄酮;高效液相色谱法测定大鼠中性白细胞5-脂氧合酶的产物5-羟廿碳四烯酸,Fura-2/AM荧光技术测定细胞内游离钙浓度。结果用芦丁作参照品,测得分离的产物总黄酮含量为93%,总黄酮对5-脂氧合酶抑制的IC₅₀为22.2;25～125 mg·L^-1的总黄酮对fMLP诱导的细胞内游离Ca²⁺水平增高抑制率为15.2%～35.9%。结论该方法较简单,分离的总黄酮纯度高,是一种可行的总黄酮提取方法;侧柏总黄酮对5-脂氧合酶的活性有较强的抑制作用,抑制细胞内游离Ca²⁺水平增高可能是抑制5-脂氧合酶的作用机制之一。     

集成毛细管电泳芯片技术及其应用

Manz和Harrison 1992年首先提出将毛细管缩微制作成毛细管芯片进行电泳分离,此后该技术得到很大的发展.集成毛细管芯片技术(integrated capillary electrophoresis chips, ICE-chips)是将毛细管缩微移植到很小芯片上,将样品进样、反应、分离、检测等过程集成在一起的多功能快速、高效、低耗的缩微实验技术.首先毛细管被蚀刻在硅片上,用于蚀刻的基质材料随后从硅片扩展到石英、玻璃和塑料等聚合物上,再用激光诱导荧光、电化学、化学等多种检测系统检测[1～3]以及与质谱等[4～8]等分析手段结合进行样品分析,广泛用于生物医药和临床实验中.     

siRNA沉默Twist基因对鼻咽癌细胞CNE-2增殖的影响

目的探讨RNA干扰沉默Twist基因对人鼻咽癌细胞株CNE-2的迁移、侵袭和增殖等生物学活性的影响。方法构建Twist-shRNA表达载体,脂质体法将重组质粒分别转染入鼻咽癌细胞株CNE-2中,RT-PCR法检测Twist mRNA、Western blot法检测Twist蛋白表达量的变化。MTT法检测细胞的增殖,细胞创伤愈合试验观察细胞迁移能力,Tran-swell小室试验检测细胞侵袭能力的变化。结果沉默Twist基因可减慢CNE-2细胞生长速度(与对照组比较P<0.05),降低CNE-2细胞的迁移速度,抑制CNE-2的体外侵袭能力。结论靶向封闭Twist基因的表达,可明显抑制CNE-2细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示Twist可作为鼻咽癌防治的一个新的靶点。     

鼻咽癌细胞中Survivin基因的转录和表达

目的：研究新的凋亡抑制因子Survivin基因在人鼻咽癌高分化上皮细胞株CNE-l和低分化上皮细胞株CNF-2Z中的转录和表达。方法：分别提取2种细胞总RNA，用逆转录PCR检测Survivin基因的转录；同时制备2种细胞的蛋白质样品，经免疫印迹检测Survivin基因的表达。结果：Survivin基因在人鼻咽癌高、低分化细胞株中均有表达，其表达量差异无显著意义。结论：Survivin的表达可能与鼻咽癌细胞分化程度无明显关系，但Survivin基因可能与鼻咽癌的发生、发展和预后不良有关。