一种对阿尔茨海默病模型小鼠认知和记忆功能具有明显改善作用的中药方剂

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β-AP_25-35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了中医经典药方柴胡加龙骨牡蛎汤、当归芍药散和作者自己研制的两种中药复方CHPI和CHPⅡ对该小鼠模型认知和记忆能力的疗效作用。同时 ,以西药脑复康做对照。结果 :CHPⅡ对AD模型小鼠的认知和记忆能力具有明显的改善。结论 :本研究提示从中药中寻找治疗AD的药物具有较好的前景。     

基于Vero E6细胞的抗SARS药物筛选方法的构建

目的 构建基于Vero-E6细胞的抗SARS药物筛选模型。方法 运用四唑氮化合物(MTS)方法，对由SARS病毒(BJ-01)引起的对Vero-E6细胞的细胞毒性作用进行检测。首先优化了实验条件(检测了MTS不同孵育时间和不同接种细胞数对测试结果的影响，并绘制了病毒滴度曲线)；在检测化合物的抗病毒作用时，首先将细胞接种于96孔板中，加入待测药物和BJ-01病毒，48h后用显微镜观察细胞形态变化，96h后加入MTS和电子耦联剂(PMS)的混合溶液，在490nm检测其吸光度。结果 对4000多种化合物的抗SARS病毒作用进行了检测。获得10种可能有抗SARS病毒作用的药物。结论 基于Vero-E6细胞的MTS检测方法提供了一种快速、安全和方便的抗SARS药物筛选方法。     

齐墩果酸抑制3T3-L1脂肪细胞脂质堆积

目的：从57个中药化合物筛选具有抑制3T3-L1脂肪细胞脂质堆积的活性成分。方法：3T3-L1细胞培养至融合后用化合物进行干预,并诱导使其分化,采用高内涵影像方法检测细胞中脂滴含量。对发现的活性成分用ToxInsight体外毒性检测方法评价其肝毒性。结果：发现并验证活性成分齐墩果酸（OA）具有显著的脂质形成抑制作用,其半数抑制浓度（IC50）为14.5 μmol·L-1,且在60 μmol·L-1测试浓度范围内对HepG2 细胞无显著损伤作用。结论：OA 具有显著的降低脂质形成作用,是潜在的降脂候选化合物。     

飞龙掌血抗A型流感病毒活性的鉴定

目的:鉴定中药飞龙掌血体外抗流感病毒(A/PR/8/34H1N1)活性。方法:用四唑氮化合物(MTS)测定流感病毒诱导细胞病变(CPE)方法,初筛200余种中草药提取物抗A型流感病毒活性。复筛中样品的抗病毒活性被进一步用荧光定量聚合酶链反应(PCR)测试方法验证。结果:飞龙掌血在MTS方法和定量PCR中均显示很强的抗H1N1型流感病毒活性,半数有效剂量(EC₅₀)在MTS方法和定量PCR中分别为4.7,0.9mg·L^-1。毒性实验显示半数细胞毒剂量(CC₅₀)为187.2mg·L^-1,选择指数(SI)在定量PCR测试中大于206。药物作用时间实验显示飞龙掌血与病毒同时加入细胞可获得最佳抗病毒效果,病毒感染前、后24h加入飞龙掌血仍然具有一定抗病毒作用。结论:飞龙掌血可作为抗流感病毒候选治疗药物。     

Toll样受体-4表达对树突状细胞表型及功能的影响

目的:探讨Toll样受体-4(TLR-4)表达对树突状细胞(DC)表型及功能的影响及其机制.方法:以构建的含有TLR-4全基因序列的pcDNA3.1质粒载体为模板,通过mMESSAGE mMACHINE T7 Kit体外转录获得TLR-4 mRNA,并采用脂质体法将其转染健康人外周血PBMC来源的DC,用流式细胞术检测鉴定转染后DC表面功能性分子的表达及DC体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)分泌细胞因子的能力.结果:成功构建人TLR-4-pcDNA3.1质粒载体;体外扩增成功人TLR-4和EGFP mRNA片段.TLR-4 mRNA转染后的DC表面趋化因子CCR7及功能性分子HLA-DR的表达显著高于control mRNA转染DC、转染前成熟DC[CCR-7:(42.4±4.93)％ vs (20.1±3.09)％、(17.1±4.33)％,P＜0.05;HLA-DR:(62.1±7.23)％ vs(17.7±6.01)％、(25.8±4.16)％,P＜0.05],同时转染后的DC体外诱导CTL分泌IFN-γ细胞因子的能力强于control mRNA-DC、空载转染DC诱导的CTL及加入DC前CTL[(66.5±3.58)％ vs (41.1±4.27)％、(37.9±2.96)％、(3.2±2.03)％,P＜0.05].结论:TLR-4 mRNA转染DC可显著增强DC的功能,提高了DC抗原提呈及诱导CTL的能力,为增强DC疫苗抗肿瘤效应提供实验依据.