脂质体-IP10复合物对小鼠4T1乳腺癌的治疗作用

目的 用1,2-二油酰-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)脂质体包裹pcDNA3.1-γ干扰素诱导蛋白-10(IP10)制备脂质体质粒DNA复合体即Lip-IP10,观察其对抗小鼠4T1乳腺癌的原位瘤及肺转移瘤的治疗作用,并探讨其作用机制.方法 建立4T1乳腺癌模型,将36只荷瘤小鼠随机分为生理盐水(NS)组、脂质体-pcDNA3.1复合物(Lip-null)组和脂质体-IP10复合物(Lip-IP10)组,尾静脉给药,观察各组肿瘤体积、肺转移结节数及小鼠生存期.原位瘤进行CD31染色,测定微血管密度(MVD).结果 与两对照组比较,Lip-IP10组的肿瘤体积明显较小(P<0.05),肺转移结节显著减少(各组中位数为NS组45个,Lip-null组40个,Lip-IP10组 3个,P<0.05),生存期延长(P<0.05),CD31染色结果 显示,Lip-IP10组的肿瘤MVD值较低(NS组44.25±5.51,Lip-null组 43.45±4.21,Lip-IP10组21.50±5.41,P<0.05). 结论 静脉给予Lip-IP10复合体可抑制小鼠4T1乳腺癌的原位瘤及肺转移瘤,其作用机制与IP10抑制肿瘤血管生成有关.     

重组内皮抑素腺病毒联合卡铂抗小鼠肺癌的实验研究

目的 将重组内皮抑素腺病毒(Ad-E)和化疗药物卡铂联合治疗小鼠Lewis肺癌,观察其对肿瘤的抑制作用以探索其在肺癌治疗中的可行性.方法 建立小鼠LL/2肺癌模型,将荷瘤小鼠随机分为5组:生理盐水(NS)组,空载腺病毒(Ad-null)组,卡铂组,Ad-E组,Ad-E+卡铂组;观察肿瘤体积、瘤重、小鼠生存期、肿瘤血管生成、肿瘤细胞凋亡及治疗毒副反应.结果 与Ad-E或卡铂单药组相比,联合治疗组的肿瘤生长减慢,瘤重减轻,小鼠生存期延长,肿瘤组织微血管密度减少,肿瘤细胞凋亡增加,差异均有统计学意义(P<0.05).各治疗组小鼠均未出现明显毒副反应.结论 以腺病毒为载体的抗血管基因治疗联合化疗有较好的抑制小鼠Lewis肺癌效应,且无明显毒副作用.     

重组内皮抑素联合吉西他滨对小鼠肺癌移植瘤生长的抑制作用

目的探讨重组内皮抑素（ES）与吉西他滨（GEM）联用对小鼠肺癌移植瘤生长的抑制作用。方法建立小鼠肺癌模型,将其随机分为GEM组、ES组、ES＋GEM组及生理盐水（NS）组,比较四组肿瘤体积、生存期;用原位末端标记染色法检测其肿瘤细胞凋亡情况,CD31免疫组化染色法检测肿瘤组织内微血管密度（MVD）,ELISA法检测血清血管内皮生长因子（VEGF）。结果与ES组、GEM组比较,ES＋GEM组肿瘤体积缩小、生存期延长、肿瘤细胞凋亡率增加、MVD减少（P均〈0.05）;与对照组比较,ES＋GEM组血清VEGF明显下降（P〈0.05）。结论 ES＋GEM治疗小鼠肺癌移植瘤的抑瘤效应明显优于GEM组、ES组,其机理可能是两药对抗肿瘤血管生成有协同作用。     

重组腺病毒HBx体内抑制恶性肿瘤细胞的实验研究

目的 探讨人乙肝病毒x蛋白(HBx)在体内对肿瘤细胞增殖能力的影响.方法 利用连接有增强型绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-eGFP),在体外感染H22肿瘤细胞,观察腺病毒对H22细胞的感染效率;在小鼠腹腔内接种小鼠肝癌H22细胞,建立恶性腹水模型,腹腔注射重组腺病毒HBx(Ad-HBx)、空载腺病毒(Ad-null)或生理盐水(对照组),检测腹水肿瘤细胞内的HBx蛋白表达并观察其对肿瘤细胞增殖能力、腹水形成及腹膜渗透性、红细胞等腹水性状的影响.结果 腺病毒体外对H22细胞有高的感染效率.HBx蛋白能在腹水肿瘤细胞中表达,在体内环境中Ad-HBx能改善腹膜的渗透性(P<0.05),抑制小鼠腹水生成(P<0.05),使腹水中的红细胞、癌细胞水平明显减少(P<0.05),流式细胞术分析提示Ad-HBx使腹水中的肿瘤细胞周期有明显G2/M阻滞.结论 体内环境中Ad-HBx能在肿瘤细胞内表达HBx蛋白,通过细胞周期阻滞明显抑制肿瘤细胞的增殖能力,有望成为治疗癌性腹水的一种新方法.     

分泌型重组mPSMA腺病毒的构建及表达

目的 构建分泌型重组小鼠前列腺特异膜抗原腺病毒(Ad-mPSMA),并检测其免疫效果。方法 利用AdEasy重组腺病毒载体系统,通过PCR扩增小鼠PSMA全长序列,并在基因的5′端加上人IL-2的信号肽序列,亚克隆至pAdenoVator CMV5穿梭质粒,与pAdenoVator ΔE1/E3进行同源重组获得pAd-mPSMA重组质粒,经HEK293细胞包装扩增获得重组病毒颗粒。通过RT-PCR及Western blot检测小鼠PSMA基因在HeLa细胞中的转录及表达。以该重组腺病毒免疫小鼠,对mPSMA的特异性抗体进行检测。结果 成功将mPSMA基因克隆至pAdenoVator ΔE1/E3载体上,病毒滴度为1.32×1011IU/ml,RT-PCR证实mPSMA的转录,Western blot证实mPSMA的分泌表达,并在小鼠血清中检测到mPSMA的特异性抗体。结论 成功构建分泌型重组mPSMA腺病毒,为前列腺癌特别是激素难治性前列腺癌的预防和治疗提供了更广阔的前景。     

Parkin基因与恶性肿瘤的相关性研究进展

Parkin基因是在对常染色体隐性遗传的青少年型帕金森病(autosomal recessive juvenile parkinson,AR-JP)的研究过程中发现的。随后各国学者开始对该基因展开了大量的研究,发现Parkin基因功能广泛,尤其是近几年的研究发现Parkin基因参与多种恶性肿瘤的发生与发展。这篇综述阐述了Parkin、线粒体自噬,并总结了目前在恶性肿瘤中Parkin的研究成果。     

Survivin突变基因抗前列腺癌的体内外研究

目的 探讨Survivin负性显性突变体T34A对前列腺癌细胞体内外增殖和凋亡的影响.方法 体外实验采用1,2-二油-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)阳脂质体包裹Survivin-T34A质粒转染小鼠前列腺癌细胞株TRAMP-C1,通过流式细胞术观察其对培养的TRAMP-C1细胞增殖和凋亡的影响;体内实验则建立TRAMP-C1前列腺癌皮下移植瘤动物模型,将24只雄性荷瘤C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(NS)、空载质粒组(PORF-9-null)和治疗组(Survivin-T34A),尾静脉给药,观察各组肿瘤体积及毒副反应.取各组皮下移植瘤石蜡包埋后进行TUNEL染色并测定肿瘤细胞凋亡率.结果 流式细胞术结果显示转染了阳脂质体包裹的Survivin-T34A质粒后的前列腺癌细胞其细胞凋亡率为46%.肿瘤体积测量结果显示Survivin-T34A组的肿瘤体积小于空质粒组及NS组(P均<0.05).TUNEL染色结果显示,Survivin-T34A组肿瘤细胞凋亡率高于其它两组(P均<0.05).结论 Survivin-T34A突变体可抑制小鼠TRAMP-C1前列腺癌的皮下移植瘤,其作用机制与Survivin-T34A能特异并高效地促进该肿瘤细胞凋亡有关.     

缺氧诱导因子-1α与X染色体连锁凋亡抑制蛋白在人卵巢癌中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在人卵巢癌中的表达及意义。方法 用免疫组织化学技术法检测人正常卵巢组织标本10例、良性卵巢肿瘤标本10例、交界性卵巢肿瘤标本10例及恶性卵巢癌组织标本30例中HIF-1α和XIAP的表达情况;培养人卵巢癌细胞系SKOV3,向细胞培养瓶中加入HIF-1α激动剂和抑制剂,提取细胞总RNA,用RT-PCR技术观察XIAP和HIF-1α基因表达变化。结果 XIAP、HIF-1α在恶性上皮性卵巢癌组及交界性肿瘤组表达率均明显高于良性卵巢肿瘤组(P<0.05)。恶性上皮性卵巢癌组织中HIF-1α与XIAP在临床分期晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)组的阳性表达率明显高于临床分期早期(Ⅰ期和Ⅱ期)组(P<0.05),与患者年龄、病理分型和淋巴结转移无关(P>0.05)。在恶性上皮性卵巢癌中HIF-1α与XIAP呈正相关(P<0.05)。随缺氧时间延长,SKOV3细胞系中HIF-1αmRNA表达量渐增;低氧24 h时HIF-1αmRNA表达量达高峰,36 h时HIF-1αmRNA表达量有所回落;添加HIF-1α抑...     

胃肝样腺癌的MDT讨论

目的讨论胃肝样腺癌的临床表现、诊断和治疗。方法对四川大学华西医院于2017年10月收治的1例胃肝样腺癌患者在术前所进行的MDT(multi-disciplinary team)讨论进行总结,并复习文献,分析胃肝样腺癌的临床病理学特点。结果胃肝样腺癌的临床特点是常伴有早期肝转移和甲胎蛋白(AFP)明显升高,易误诊为原发性肝细胞癌。其病理组织学特点是,形态上具有肝癌样分化和腺癌样分化两种结构。结论胃肝样腺癌是胃腺癌的特殊类型,根治性手术是其主要治疗手段,但预后较差。     

斑点型锌指结构蛋白在恶性肿瘤发生发展中的作用

[摘要] 恶性肿瘤居中国各类疾病死因之首,发病率与病死率呈逐年上升趋势。近几年来靶向治疗已广泛应用于临床,显示出良好的抗肿瘤效果,新靶点的探索和鉴定在靶向药物研发过程中起着重要作用。E3 泛素连接酶斑点型锌指结构蛋白（speckletype POZ protein,SPOP）作为治疗选择的潜在靶点,能特异性识别底物,使底物发生泛素化降解,广泛参与机体内多种生理、病理过程。研究发现SPOP基因突变或表达水平改变,通过调控AR/ERG、Akt-mTORC1、Hedgehog/Gli2 等多种信号通路影响恶性肿瘤的发生发展,并与前列腺癌、肾癌、结直肠癌等多种恶性肿瘤细胞增殖及远处转移密切相关。目前,SPOP影响恶性肿瘤发生发展的相关研究为靶向治疗恶性肿瘤奠定了基础,综述SPOP在恶性肿瘤的最新进展对抗肿瘤研究具有重要的意义。