纤维蛋白原Bβ148 C/T基因多态性

目的:对河北省脑血管患者纤维蛋白原(Fg)Bβ-148C/T基因多态性进行初步研究. 方法:用聚合酶链式反应(PCR),限制性片段长度多态性(RFLP)方法研究河北省77例脑血管病患者Fg Bβ-148C/T基因多态性. 结果:77例脑血管病患者Fg Bβ-148基因频率C=0.364,T=0.636. 结论:Fg Bβ-148C/T突变基因T与Fg水平、严重的颈动脉粥样硬化明显相关.     

复肝春6号对小鼠肝癌的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：研究复肝春6号（FGC-6）的抗肝癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：将接种H22肝癌细胞的小鼠分为模型组、5-氟尿嘧啶组（5-Fu组）、FGC-6 高、中、低剂量组（含生药量70,35,15 g·kg^-1）,另设正常对照组,连续给药10 d。观察小鼠瘤重、体重、NK细胞杀靶活性、淋巴细胞增殖活性及脾细胞白细胞介素2（IL-2）分泌量的变化。制备FGC-6含药血清,以MTT法和生长曲线法观察该含药血清对体外培养H22细胞的增殖抑制作用。 结果：FGC-6高剂量可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长,且FGC-6含药血清对H22细胞增殖有明显的抑制作用,呈时间和浓度依赖性。模型组荷瘤小鼠的NK细胞杀靶活性和脾细胞IL-2分泌量均明显低于正常对照组（P<0.05）； 而FGC-6高剂量组荷瘤小鼠的NK细胞杀靶活性、脾细胞IL-2分泌量和淋巴细胞增殖活性均得到明显改善,FGC-6中剂量治疗使荷瘤小鼠的脾细胞IL-2分泌能力增强,与模型组比较差异显著（P<0.05）。 结论： FGC-6可明显抑制H22细胞的生长,改善荷瘤小鼠的免疫功能。     

应用丙基硫氧嘧啶复制动脉粥样硬化模型中对大鼠心脏损伤的影响

目的通过高脂饲料结合免疫损伤方法复制大鼠动脉粥样硬化模型,并观察丙基硫氧嘧啶在动脉粥样硬化模型复制中对大鼠心脏损伤的影响。方法选择36只雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、高脂饲料组和高脂饲料+丙基硫氧嘧啶组,后两组同时辅以免疫损伤和腹腔注射VD3,饲养90 d后,测定和观察血液生化指标、病理变化、免疫组化情况。结果 (1)高脂+丙基硫氧嘧啶组与高脂组和正常组相比较,心肌损伤指标肌酸激酶、肌酸激酶同工酶差异均有显著性(P<0.05);(2)HE染色发现高脂+丙基硫氧嘧啶组心肌细胞排列紊乱、水肿,血管内壁增厚,泡沫细胞和少量炎性细胞浸润;(3)免疫组化法方法测定心肌细胞中Bcl-2和Bax的表达,高脂+丙基硫氧嘧啶组表达显著升高(P<0.05),心肌细胞凋亡加速。结论丙基硫氧嘧啶在应用于大鼠动脉粥样硬化模型复制中,对大鼠心肌病理学及Bcl-2、Bax蛋白表达产生影响。     

细胞周期负反馈调控通路的研究进展

1 P16INK4A-CDKs-RB和P19ARF-MDM2-P53的相互制约关系 鼠双微体(MDM2)基因,最初由Donna Geroge及其合作者在自发肿瘤鼠Balb/c3T3成纤维细胞系中鉴定出来. MDM2具有在细胞核和细胞质之间穿梭的功能,人类的MDM2定位于染色体12q13-14,MDM2的(1)区内具有核定位(NLS)与核输出(NES)序列,利用其NLS序列与细胞核内的P53相结合,然后利用其NES信号,将P53运到胞浆,再通过其自身的E3-泛素连接酶活性,使P53蛋白泛素化而降解.     

小鼠肝癌H22细胞克隆株的RAPD分析

目的应用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术检测小鼠肝癌H22细胞克隆株的遗传变异。方法用47条引物对小鼠肝癌H22细胞的4个克隆株H22-H8D8,H22-H2G4,H22-H2E10,H22-H2C4基因组DNA进行RAPD分析。结果47条引物均能扩增出明显的条带,条带数多为4~10条,片段大小在200~2000 bp之间。其中4条引物的扩增条带具有多态性,表现为带的有无、移动和强弱差异。结论RAPD技术可以用来检测小鼠肝癌H22细胞克隆株基因组之间的差异。     

血浆纤维蛋白原β-148C／T基因多态性研究

目的对河北省脑血管患者纤维蛋白原β-148C／T基因多态性进行初步研究。方法用聚合酶链式反应（PCR），限制性片段长度多态性（RFLP）方法研究河北省77例心脑血管患者纤维蛋白原β-148C／T基因多态性。结果脑血管患者纤维蛋白原β-148基因频率C=0．364，T=0．636，与广东汉族健康人基因频率（C=0．715、T=0．285）比较差异显著（P〈0．05）。结论纤维蛋白原β-148C／T突变基因T与纤维蛋白原水平、严重的颈动脉粥样硬化明显相关。     

屏障动物实验设施运行中几个常见问题的探讨

我国许多科研单位对实验动物设施进行了新建或改造,使其硬件条件达到了屏障环境标准要求。但是,由于各单位所建设施用途和特点不同,管理水平和方式也参差不齐,因此运行中经常遇到一些问题。根据多年来的亲身实践,从一线工作人员的角度,本文从合理设计和分配屏障系统各功能区、空调净化系统的运行管理、实验动物饮水系统设置等几个方面对动物实验屏障设施运行管理中常见的几个问题进行了分析探讨。     

pAFP-P53-EGFP靶向诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡

目的研究pAFP-P53-EGFP对AFP阳性肝癌细胞的靶向促凋亡作用。方法将SD大鼠AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2kb的AFP基因调控序列,导入pEGFP-N1质粒的启动子处,构建pAFP-EGFP同时引入P53基因片段,构建pAFP-P53-EGFP重组质粒。转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,流式细胞术分析各细胞凋亡情况。分别将质粒pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP转染HepG2细胞进行DNA ladder分析及电镜观察细胞超微结构。结果 pAFP-P53-EGFP重组质粒转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,各组细胞凋亡率分别为:HepG2组%gate=2.65±0.08;HeLa组%gate=0.42±0.025;SMMC7721组%gate=0.39±0.018。AFP阳性的HepG2细胞凋亡率明显高于SMMC7721、HeLa细胞(P<0.05)。且转染pAFP-P53-EGFP质粒的HepG2细胞出现明显的DNA ladder,细胞超微结构亦显示出现凋亡。结论 pAFP-P53-EGFP可以在AFP阳性细胞中相对专一表达,且pAFP-P53-EGFP可通过诱导细胞凋亡从而达到抑制肿瘤作用。     

RNAi技术在肝癌研究中的应用

肝癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁人类健康。肝癌的传统治疗方法效果差,目前缺乏有效的治疗手段,因此寻找新的更有效的肝癌治疗策略显得尤为迫切。近年来,随着分子生物学的深入研究,RNA干扰(RNAi)技术的应用为肝癌的治疗带来了新突破。RNAi技术特异性高、稳定性好、无免疫原性,在病毒感染、肝癌等疾病治疗上有广阔的应用前景,其在抑制肝癌细胞生长、增殖、侵袭转移、增强肝癌细胞凋亡和对药物的敏感性等方面有较好的表现。本文将对近年来RNAi技术在肝癌基因靶向治疗领域的应用研究作一综述。     

链霉菌L-183发酵条件优化

目的 对链霉菌L-183生产链霉亲和素(streptavidin,SA)的发酵条件进行优化.方法 通过单因子和正交实验,获得SA发酵培养基的最佳配方比.结果 在优化条件下,SA的产量达到151.5 mg/L.与先前报道相比,产量提高36.5%,且成本降低,操作步骤更为简化.结论 链霉菌L-183生产链霉亲和素的发酵条件优化为规模化生产奠定了基础.