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目的探讨佛波酯(PMA)对人胃癌细胞BGC-823 Ha—ras基因启动子活性及启动子结合蛋白活性的影响。方法通过RT-PCR和运用自行构建的真核表达载体prasEYFP转染细胞进行荧光细胞检测,并应用凝胶电泳移动检测、Southwestern blotting等方法检测PMA(100μg/L)处理BGC-823细胞72和96h后,对Ha—ras基因表达水平、Ha—ras基因启动子活性以及对Ha—ras启动子结合蛋白的影响。结果经PMA(100μg/L)处理72和96h,与未处理细胞相比,BGC-823细胞中Ha—ras基因表达显著降低,Ha—ras基因启动子活性分别被抑制65.2%和71.8%;同时两个Ha-ras启动子结合蛋白活性也显著降低,经检测,其分子量分别约为18kD,35kD。结论PMA长期处理通过降低人胃癌细胞中Ha—ras启动子结合蛋白活性使Ha—ras启动子活性被抑制,从而在转录水平上调节Ha—ras基因表达。 相似文献
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钙调素对微管组装的调节作用 总被引:1,自引:1,他引:1
利用我们建成的钙调素表达可调细胞模型-RC3细胞,对CaM高表达时微管组装行为进行了研究,当用生理剂量的地塞米松处理RC3细胞,细胞内CaM水平提高,而管蛋白浓度没有变化,造成钙调素/管蛋白比值上升,MT解聚,但同时加入CaM拮抗剂三氟拉嗪处理时,则可抑制MT的解聚,C3H10T1/2转化细胞CaM含量的增加是引起MT解聚的主要因素,TFP处理可恢复MT组装。RC3细胞CaM高表达导致MT解聚的实 相似文献
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平阳霉素(博菜霉素A5)对同步化的CHO细胞的敏感周期时相的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
平阳霉素(博莱霉素A5)作用于同步化的各个周期时相的CHO细胞。结果用集落形成率来表示。研究表明平阳霉素对M期细胞最为敏感,其敏感顺序为M>G2>S>G1。实验使用的细胞同步化方法是用有丝分裂选择法收集M期细胞;用2 mMTdR双阻断法获得S期同步化细胞,再由M期和S期细胞分别向后推移1.5~2小时和7小时以获得G1期和G2期的同步细胞,并附以有丝分裂指数(MI)和标记指数(LI)检测各周期时相细胞的同步化程度。 相似文献
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目的:探讨复方中药白龙对人胃癌BGC82-3G1期细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)p16^INK4a,p21以及Rb,c-myc等基因转录的影响和cAMP-PKA信号通路的调节关系。方法:通过实验室常规分子生物学手段(细胞同步化,分子杂交-Northern杂交,Western杂交等)检测相关基因的表达变化。 相似文献
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蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的意义 总被引:5,自引:3,他引:2
目的 探讨蛋白激酶Cζ在银屑病发病中的作用.方法 通过原位杂交和免疫组化的方法,研究了12例寻常型银屑病患者皮损区、非皮损区和5例正常人表皮中蛋白激酶Cζ的mRNA和蛋白的表达及分布特点.结果 银屑病皮损区表皮中PKCζ的mRNA和蛋白表达均较非皮损区和正常表皮中的表达明显增强,正常人表皮中PKCζ的mRNA表达分布于表皮上层,而银屑病皮损区PKCζ的mRNA表达几乎分布于表皮全层.结论 PKCζ在银屑病表皮中的过表达提示,PKCζ可能与银屑病表皮细胞的过度增殖相关. 相似文献
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灰探讨PKC亚类在细胞增殖与转化中的可能作用,用稳定的过达蛋白激酶C(Proteinki-naseC,PKC)βⅠ亚类的人胚肺成纤维细胞2BS(BS-PKC3)为模型,研究了PKCβⅠ亚类对2BS细胞生长与化的影响,结果,过表达βⅠ的2BS细胞形态发生变化,单层培养时出现堆积生长,表明丧失接触抑制。进一步观察到实验组细胞中血清生长依赖性下降,贴壁依赖性降低,在软琼脂中可形成集落,同时细胞中微丝发生 相似文献
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目的:观察复方中药白龙(简称白龙)对人胃癌BGC82-3细胞恶性增殖表型的逆转作用方法:通过测定生长曲线、软玉脂集落及裸鼠致瘤实验,观察人胃癌BGC82-3细胞增殖的变化。结果:(1)生长曲线表明白龙明显3了BGC82-3细胞的增殖到第5天抑制率达86%。(2)经白龙处理的BGC82-3细胞在软玉脂中形成的集落小且少,与对照组比交集落形成率仅为52%。(3)白龙明显抑制接种BGC82-3细胞的裸鼠 相似文献
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CKIp15INK4B相关新基因p15rs对HeLa细胞增殖影响的初探 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨新克隆的CKIp15 INK4B 相关基因p15rs对细胞增殖的作用。 方法 克隆p15rs编码区cDNA ,通过基因转染技术将其导入HeLa细胞 ,检测细胞的生长曲线 ,细胞周期和集落形成能力。 结果 构建了p15rs高表达的细胞模型HPS2 1,发现p15rs高表达可使HeLa细胞增殖被显著抑制 ,细胞生长速率下降 ,倍增时间延长 ,G1 期细胞增加 ,S期细胞减少 ,集落形成能力下降。 结论 新基因p15rs具有抑制癌细胞增殖和对细胞周期进程进行负调节的作用。 相似文献
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