GLP实验室生化检测系统的性能验证

目的在良好实验室规范(GLP)体系下,对生化试剂改变后7100型全自动生化分析仪的性能进行验证。方法根据美国临床和实验室标准化协会的评价标准,选择丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰基转肽酶、碱性磷酸酶、总蛋白、清蛋白、总胆红素、总胆固醇、血糖、三酰甘油、肌酸激酶、尿素和肌酐13项生化指标,对7100型生化分析仪精密度、准确性、线性和携带污染率进行验证。结果 13项生化指标批内变异系数(CV%)1/4美国临床实验室修正法规(CLIA′88)允许总误差(TEa),批间CV%1/3CLIA′88TEa;准确度检测值与靶值比较,相对偏差1/3CLIA′88 TEa;线性验证相关系数均0.995,且线性偏差1/2CLIA′88TEa;携带污染率均0.5%。结论经GLP条件下的性能验证,该日立7100型全自动生化分析仪在更换试剂后各方面性能良好,可用于毒理学试验中的临床检验工作。     

大孔吸附树脂纯化水黄皮根总黄酮的工艺研究

目的 研究大孔吸附树脂纯化水黄皮根总黄酮的最佳工艺.方法 选择3种不同大孔吸附树脂对水黄皮根总黄酮进行静态和动态的吸附与解吸;考察上柱原液总黄酮浓度、流速、pH和洗脱剂等对水黄皮根总黄酮优化的影响.结果 D101最适于水黄皮总黄酮的纯化,最佳工艺为:调节水黄皮根提取液总黄酮浓度为0.607 1 mg·ml-1,调pH=3,以2 ml·min-1的流速上样,以相同速率用适量纯化水洗脱(molish反应阴性)后,再用3BV 20%乙醇溶液除杂洗脱,最后用70%乙醇作为洗脱剂进行洗脱.结论 经D101大孔吸附树脂分离纯化后,水黄皮根总黄酮浓度可达50%以上.     

海南地不容总碱的镇痛抗炎作用及毒性观察

目的研究海南地不容总生物碱的镇痛抗炎作用及急性毒性。方法采用小鼠热板法、扭体法及甲醛测痛试验观察镇痛作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性、棉球诱导小鼠肉芽组织增生试验模型观察抗炎作用,通过胸腔白细胞游走试验研究其对炎症渗出液中白细胞数量的影响,应用交叉菜胶致足肿胀试验测定炎性组织中前列腺素E2（PGE2）含量并初步探讨其抗炎机理,急性毒性试验采用改良寇氏法测定LD50。结果海南地不容总碱能明显延长小鼠舔后足时间,减少扭体次数,降低甲醛测痛试验第一、二时相的疼痛强度;减轻小鼠耳肿胀,抑制毛细血管通透性增高及肉芽组织增生,有效抑制白细胞游走,并能明显减少大鼠炎症组织中PC-E2含量。其LD50为0．569g·kg-1,95％可信限为0．519～0．623g·kg-1。结论海南地不容总碱镇痛、抗炎作用显著,其机理可能与抑制PGE2的产生与释放有关。     

注射用帕瑞昔布钠肌肉刺激性考察

目的 考察注射用帕瑞昔布钠经家兔肌内给药的刺激性,为临床安全用药提供参考。方法 采用家兔同体左右侧自身比对法,经股四头肌注射给药,浓度分别为20和5 mg·mL^-1。通过一般状况、给药局部肉眼观察、解剖观察及组织病理学检查,综合判断其肌肉刺激性。结果 注射用帕瑞昔布钠显示出浓度-肌肉刺激性依赖关系,20 mg·mL^-1引起中度刺激且不可逆,5 mg·mL^-1引起轻度刺激且可逆。结论 注射用帕瑞昔布钠临床使用浓度具有肌肉刺激性风险,在本试验条件下,5 mg·mL^-1为肌内注射安全浓度。     

HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的：建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法：通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^-1),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^-1,梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]⁺m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]⁺m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果：在1.5625～1600 ng·mL^-1浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^-1,精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取...     

褐藻素通过线粒体通路和氧化应激诱导前列腺癌细胞凋亡

目的 旨在探讨褐藻素（Fx）对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 采用相应的试剂盒检测PC-3细胞活力和细胞凋亡。荧光探针染色检测PC-3细胞中的线粒体膜电位、线粒体形态和线粒体超氧化物。同时采用相应的试剂盒检测PC-3细胞中三磷酸腺苷、过氧化氢、丙二醛和超氧化物的含量以及总抗氧化能力。Western blot方法检测PC-3细胞中Bcl-2、Bax和细胞色素c蛋白的表达。采用相应的试剂盒检测PC-3细胞中caspase-9和caspase-3/7活性。结果 Fx呈时间和剂量依赖性地抑制PC-3细胞活力,呈剂量依赖性地诱导PC-3细胞凋亡（P<0.05）。经Fx处理后,PC-3细胞中的线粒体膜电位水平降低,线粒体碎片化,线粒体超氧化物水平升高（P<0.05）,且Fx的作用效果成剂量依赖性。Fx剂量依赖性地降低PC-3细胞中的三磷酸腺苷水平和总抗氧化能力,剂量依赖性地增加过氧化氢、丙二醛和超氧化物的含量（P<0.05）。经Fx处理后,PC-3细胞中Bax和细胞质中细胞色素c的水平呈剂量依赖性增加,PC-3细胞中Bcl-2和线粒体中细胞色素c的水平呈剂量依赖性降低（P<0.05）。结论 Fx通过引发线粒体功能障碍导致氧化应激和激活线粒体介导的凋亡信号通路诱导PC-3细胞凋亡,提示Fx有望成为治疗前列腺癌的潜在药物。     

水黄皮根总黄酮提取工艺的研究

目的 确定水黄皮根总黄酮的最佳提取工艺.方法 以总黄酮量为指标,采用单因素试验与正交设计试验优选水黄皮根总黄酮最佳提取工艺条件;以水黄皮素为对照,用紫外分光光度法测定总黄酮量.结果 水黄皮总黄酮最佳提取工艺为:每1 g药材粗粉加入20倍量60%乙醇,于80℃回流提取3次,每次1.0 h.结论 本实验设计合理、可行,实验结果 重复性较好.