基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术分析经典名方芍药甘草汤的化学成分

目的  基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)技术对经典名方芍药甘草汤的化学成分进行定性分析。方法  采用Thermo Scientific Hypersil GOLD C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7 μm), 以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱, 流速为0.3 mL·min-1, 柱温30 ℃。HESI-Ⅱ源正、负离子2种模式采集芍药甘草汤的一级、二级质谱数据。结果  根据高分辨质谱提供的精确分子量和碎片离子信息, 结合标准品比对、软件预测分析和相关文献报道对芍药甘草汤的化学成分进行分析。正、负离子模式下共鉴定出129个化合物, 包括82个黄酮类化合物,20个萜类化合物,10个酚类化合物, 7个香豆素类化合物和10个其他类化学成分。结论  利用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术分析鉴定芍药甘草汤中的化学成分, 并初步归纳其各类主要化学成分的质谱裂解特点, 可为芍药甘草汤的质量控制以及药效物质基础的深入研究提供实验依据。      

基于NLRP3炎症小体探讨中药抗炎作用的研究现状

炎症小体是一种细胞内多蛋白复合体,是人体组织受损后构成局部炎性微环境复杂体系的重要成分。当炎症小体被激活后诱导胱天蛋白酶-1(caspase-1)的活化,介导促炎细胞因子的成熟及分泌,如白细胞介素(IL)-1β和IL-18,并诱导细胞的焦亡,在调节宿主对病原体感染的免疫应答和细胞损伤的组织修复中发挥着重要作用。由NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1前体(pro-caspase-1)和衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)组成的NLRP3炎症体是目前研究的最为深入和广泛的炎症小体类型,在炎症调节过程中起着至关重要的作用。当NLRP3炎症小体被激活后,产生和释放炎症介质,参与多种炎症疾病的发生与发展。中医药能够通过抑制NLRP3炎症小体,改善多种疾病的病理状态,发挥防治多种炎症疾病的作用,包括心血管系统疾病、关节炎症、糖尿病等。本文系统性地梳理了NLRP3炎症小体在多种炎症疾病中的作用机制,并总结了中药复方、中药单体及中药提取物作用于NLRP3炎症小体治疗炎症疾病的最新研究报道,以期为多种炎症疾病的发病机制及药物治疗的深入研究提供新思路。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定藏药唐古特红景天中27种元素

目的：建立微波消解-电感耦合等离子体质谱技术(ICP-MS)同时测定藏药唐古特红景天中Li、 Be、Na、Mg、Al、K、Ca、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Rb、Sr、Ag、Cd、Cs、 Ba、Pb、Tl、U、V 27种元素的方法。方法：唐古特红景天样品经微波消解后采用ICP-MS法测定，射频功率为1.3 kW，采样深度为8.0 mm，等离子体气流速为15.0 L·min^-1，载气体积流量为1.17 L·min^-1， 碰撞气体流量为5.0 mL·min^-1，蠕动泵转数为30 r·min^-1，并通过加入Bi、Ce、In、Lu、Rh、Sc、Tb混合内标对照溶液消除基体干扰。结果：27种元素在0~200μg·L^-1的线性范围内线性良好(r ＞0.998)， 定量限为0.0022~34.78 μg·L^-1，检测限为0.0007~9.4μg·L^-1；精密度、稳定性、重复性试验的RSD (n =6)均小于6%；各元素平均加样回收率为73.4%~128.3%，RSD(n =6)为1.1%~9.8%。结论：该方法操作简单、灵敏度高，适用于唐古特红景天样品中多元素的同时测定。     

藏药六味木香丸的定性定量检测方法研究

目的： 建立藏药六味木香丸的定性定量检测方法,为质量标准修订提供参考。方法：采用TLC法对藏药六味木香丸中木香、石榴子、余甘子和荜茇进行定性鉴别;采用HPLC法测定藏药六味木香丸中木香烃内酯和去氢木香烃内酯的含量,使用C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-水（65∶35）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长225 nm,柱温25℃。结果：薄层色谱斑点清晰,分离度良好,阴性样品无干扰。木香烃内酯质量浓度在12~60 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率（n=6）为98.8%,RSD=1.6%;去氢木香烃内酯质量浓度在17~85 μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率（n=6）为99.8%,RSD=1.4%。结论：所建立的方法准确、可靠,专属性强,可用于六味木香丸的质量控制。     

基于铁死亡理论的中医药防治肿瘤研究进展

铁死亡是指在铁离子的参与下,因铁依赖性活性氧的异常堆积而导致氧化还原平衡失调而引起的一种新型细胞死亡方式。近年来研究发现铁死亡与多种疾病的发生存在一定关联,尤其对于肿瘤的发生发展具有一定的调节作用。中医药在肿瘤的防治过程中具有独特优势,如何利用铁死亡理论指导中医药有效防治癌症等肿瘤类疾病是该领域新的研究热点。该文从铁死亡理论的提出、作用机制和信号通路,肿瘤治疗中的应用及基于铁死亡理论的中药活性研究等方面进行了整理和总结,发现铁死亡的发生与铁代谢、脂质活性氧代谢等多种信号通路及基因的表达有关,铁死亡在肿瘤的发生发展、治疗、以及肿瘤免疫中都发挥着重要的调控作用,这将为肿瘤的治疗和抗癌药物的研发提供了策略。同时对中药干预铁死亡发挥生物活性的整理发现,诸如黄芩、葛根、黄芪、银杏、淫羊藿、青蒿、丹参等多味中药,脑泰方、四君子汤、参麦注射液等中药复方,以及黄芩素、双氢青蒿素、葛根素、荜茇酰胺、木犀草素、槲皮素等多种中药有效成分,均能够通过调节铁死亡发挥抗肿瘤等生物活性。可见,中药在通过调控铁死亡防治肿瘤等疾病方面潜力巨大。该文为铁死亡理论的深入研究及指导中医药防治肿瘤类疾病等方面提供理论依据和研究思路。     

电感耦合等离子体质谱及原子荧光光谱法测定蓝玉簪龙胆中的28种无机元素

目的 采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)及原子荧光光谱法(AFS)测定野生蓝玉簪龙胆中28种无机元素的含量。方法 样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定27种无机元素的含量,AFS法测定汞元素的含量。数据经PASW Statistics 18.0软件分析主成分及相关性。结果 28种无机元素的线性关系良好(r≥0.9966),定量限为3×10^-3～22.026μg·L^-1,检测限为1×10^-3～6.615μg·L^-1;精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于8%,平均加样回收率为76.8%～128.1%,RSD=1.20%～9.80%(n=6)。15批蓝玉簪龙胆样品中,含量最高的是钾元素。主成分分析得到7个主成分,累计方差贡献率达92.87%,确定铝、铁、铅、镉、铍、钴、铊、铷、锶、硒等元素为蓝玉簪龙胆的特征元素,且特征元素间存在极显著、显著正相关。结论 所用方法操作简便、灵敏度高,为全面认识蓝玉簪龙胆中无机元素的组成,加强质量控制,进一步挖掘其药用价值提供了参考。     

UPLC-Q-TOF/MS结合化学计量学对不同产地香圆主要成分的研究

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)快速分析香圆化学成分的方法。利用UPLC-Q-TOF/MS联用技术，通过一级质谱精确质量数和高分辨二级碎片离子谱图库信息，参照标准品比对及相关文献对化合物结构信息进行鉴定；采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同产地香圆样品进行数据分析及质量评价。结果显示：经UPLC-Q-TOF/MS分析指认出29个成分；采自5个产地的25批香圆的PCA和OPLS-DA分析结果一致，样本群处于不同的空间聚落，可以较好地区分且被明显分成了5组，其中广西样品离散性较大，说明同一产地样品的内部差异性较大；安徽、四川、云南、浙江样品分布较为集中；进一步采用VIP值法进行分析，本实验筛选出VIP值>1的8个化学成分作为不同产地香圆差异性的主要化学标记物。所建立的香圆高分辨谱图方法稳定、可靠，可为其质量控制提供参考依据。     

经典名方芍药甘草汤解痉功效的关键质量属性研究

目的 基于血清药物化学、网络药理学和体外实验验证，阐明芍药甘草汤(Shaoyao-Gancao decoction，SGD)治疗痉挛性疾病的关键质量属性。方法 采用UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术对SGD体内入血移行成分进行分析鉴定；利用Cytoscape构建“入血成分-解痉靶点-通路”网络图，筛选SGD解痉核心功效成分；通过离体肠平滑肌实验对核心成分进行验证，明确SGD解痉功效的关键质量属性。结果 据高分辨质谱提供的精确分子量和碎片离子信息，结合对照品比对和相关文献报道，共鉴定出17个SGD入血原型成分，分别为氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、异甘草苷、甘草苷、甘草酸、苯甲酰芍药苷、甘草查尔酮B、芒柄花苷、异甘草素、甘草素、甘草查尔酮A、甘草查尔酮C、光甘草定、甘草次酸、没食子酸。网络药理学预测SGD中光甘草定、甘草素、芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷度值较高，可能通过GRIN2A、VCP、ABCB1、CYP2C9、CYP3A4、CHRNB2、SNCA等靶点，作用于药物代谢-细胞色素P450、神经活性配体-受体相互作用、cAMP、钙信号通路等发挥解痉作用。生物活性测定结果表明，芍药苷、甘草素、芍药内酯苷、光甘草定和苯甲酰芍药苷均可降低乙酰胆碱(acetylcholine，Ach)引起的离体肠平滑肌收缩张力，是SGD解痉功效的关键质量属性，其中芍药苷和甘草素解痉效果较强，与Ach模型组比较，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 本实验构建经典名方芍药甘草汤关键质量属性筛选方法，明确SGD解痉功效的关键质量属性，为SGD的精准质量控制及其产品二次开发提供实验依据。