TNF-α在食管鳞癌细胞中对PD-L1表达的影响

目的 探讨TNF-α在食管鳞癌细胞株Eca109中对PD-L1表达的影响以及PKA/CREB在TNF-α调节PD-L1表达中的作用.方法 体外培养食管鳞状细胞癌Eca109细胞,实验分为空白对照组、TNF-α组(20 ng/ml TNF-α诱导24 h)和TNF-α+Staurosporine组(先20 ng/ml S...     

食管癌细胞中脂多糖对肿瘤坏死因子α诱导程序性细胞死亡配体1表达的影响

目的 探讨在食管鳞癌Eca-109细胞中脂多糖（LPS）通过Jak2/Stat3信号通路对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导程序性细胞死亡配体1(PD-L1)表达的影响及意义。方法 2020年5―10月,在TNF-α诱导下,分别使用LPS干预食管鳞癌Eca-109细胞3、6、12、24 h以及不同浓度的LPS干预食管鳞癌Eca-109细胞24 h,应用蛋白质印迹法检测p-Jak2、p-Stat3、PD-L1蛋白表达水平的变化;应用流式细胞技术检测LPS干预对Eca-109细胞凋亡的影响。结果 与对照组相比,TNF-α组中p-Jak2蛋白表达（0.79±0.05比0.63±0.11）、p-Stat3蛋白表达（1.48±0.24比0.45±0.08）、PD-L1蛋白表达（0.92±0.15比0.55±0.11）均升高（P<0.05）,同时LPS组中凋亡率[（8.20±1.65）%比（4.77±0.15）%]和TNF-α+LPS干预组中凋亡率[（7.63±1.37）%比（4.77±0.15）%]明显升高（P<0.05）。与TNF-α组相比,TNF-α+LPS干预组中p-Jak2蛋白...     

食管癌细胞中沉默Survivin基因对ATG16L1表达的影响

目的 探讨食管癌Eca109细胞中沉默生存素(Survivin, SVV)基因的表达对自噬相关蛋白ATG16L1表达的影响。方法 使用雷帕霉素(rapamycin, RAPA)在Eca109细胞中诱导建立自噬模型;使用Survivin抑制剂YM155和Survivin-siRNA作用于自噬模型,采用免疫荧光法观察自噬体数量变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平,Western blot法检测LC3-Ⅱ、p62、Survivin、ATG16L1的蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因检测Survivin与p62的作用关系。结果 RAPA诱导Eca109细胞后,自噬标志蛋白LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高,p62蛋白的表达水平降低,同时细胞内自噬体数目增多。在RAPA组中ATG16L1mRNA和蛋白表达水平均升高。在细胞自噬模型中沉默Survivin表达后,Survivin和ATG16L1的mRNA表达水平均降低。过表达Survivi...