tBid基因的表达及其对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用

目的：观察tBid基因在骨肉瘤细胞中的表达及其对转染的SOSP-9607细胞的凋亡作用。方法：采用脂质体转染的方法,将tBid基因转染骨肉瘤细胞,间接免疫荧光法检测目的蛋白的表达和细胞形态学变化,进一步电镜观察其超微结构改变。MTT法检测目的基因转染后细胞的增殖情况,通过Annexin V、染色流式细胞仪检测来观察其促凋亡作用。结果：转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测tBid的表达,细胞出现凋亡。电镜观察呈现出典型的凋亡特征。MTT实验发现细胞的增殖被明显抑制。Annexin V染色流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,与对照组细胞（凋亡率为6%）相比,其凋亡率为35.8%。结论：tBid基因可以在转染的SOSP-9607细胞中表达,并可抑制转染细胞的生长,诱导细胞发生凋亡。     

人存活素特异性siRNA促进SOSP-9607细胞凋亡的实验研究

目的:构建人存活素(survivin)基因的siRNA真核表达载体,探讨其对骨肉瘤细胞SOSP-9607凋亡的影响.方法:利用pSilencer 3.0-H1 neo,构建人存活素特异性的RNA干涉载体,转染SOSP-9607细胞,G418筛选稳定转染的细胞系.westem blot检测survlvin蛋白水平变化.透射电镜等形态学观察、Annexin V法、Hoechst染色检测细胞凋亡.结果:成功构建了人存活素基因siRNA真核表达载体PS.获得了稳定转染的细胞系.与正常SOSP-9607细胞、阴性对照细胞相比,SOSP-9607/PS生长曲线十分平缓,存在显著差异(P＜0.01).western blot显示SOSP-9607/PS细胞中蛋白表达减少.SOSP-9607/PS凋亡率增加(P＜0.01).结论:特异性siRNA能够明显抑制survivin基因在SOSP-9607细胞中的表达并明显促进细胞凋亡,这为进一步研究survivin在SOSP-9607细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础.     

脊索瘤细胞系CM-319中放化疗抵抗相关基因的表达及临床意义

[目的]探讨多药耐药相关基因如缺氧诱导因子1d（HIF-1α）、多药耐药基因（MDR1）及多药耐药相关蛋白（MRP1）在脊索瘤细胞系CM－319中的表达及临床意义。[方法]用RT—PCR检测HIF－1α、MDR1、MRP1基因表达,间接免疫荧光及免疫细胞化学Envision法检测HIF－1α、MRPl蛋白在CM－319中的表达情况,并分析其与放化疗抵抗的关系。[结果]常氧条件下,在脊索瘤细胞系中能检测到HIF～1α及MRP1 mRNA的表达,但未检测到MDR1 mRNA的表达（P〈0．01）,间接免疫荧光及免疫细胞化学可以检测到HIF-1α表达在细胞浆及核中,而MRP1主要表达在细胞浆中。[结论]HIF-1α与MRP1的过度表达在脊索瘤的放化疗抵抗中可能具有重要作用,而MDR1表达未被检测到,提示脊索瘤的放化疗抵抗主要与HIF－1α和MRP1相关。     

常规髋臼手术入路联合大转子滑移截骨治疗复杂髋臼骨折疗效分析

目的探讨采用常规髋臼手术入路联合大转子滑移截骨治疗复杂髋臼骨折的临床疗效。方法回顾性分析自2010年1月至2014年12月沈阳军区总医院手术治疗的24例累及臼顶的复杂髋臼骨折患者的临床资料,依据Letournel-Judet分型分为横形加后壁骨折11例,后柱加后壁骨折6例,双柱骨折3例,T形骨折2例,前柱加后半横形2例。手术均采用常规髋臼手术入路联合大转子滑移截骨。采用Matta标准评估复位结果,以改良Merle d'Aubigne-Postel评分标准评价髋关节功能,利用美国医学研究委员会标准评估外展肌力情况。同时,记录患者术后并发症。结果 24例患者中,解剖复位16例,满意复位7例,不满意1例。髋臼骨折均获Ⅰ期骨愈合,所有大转子截骨均获骨性愈合。末次随访时的改良Merle d'Aubigne-Postel评分:优10例,良11例,可3例,优良率为87.5%(21/24)。外展肌力评分:4级5例,5级19例。术后2例患者发生大转子内固定刺激症状,2例发生异位骨化,1例发生创伤性关节炎,1例发生股骨头缺血性坏死。结论对于复杂髋臼骨折,尤其是累及臼顶的髋臼骨折,采用常规髋臼手术入路联合大转子滑移截骨可扩大手术显露视野,便于操作,可获得良好的骨折复位与功能恢复,并发症少,临床疗效满意。     

肝细胞生长因子受体c-met在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨骨肉瘤组织中肝细胞生长因子受体c-met蛋白的表达情况,分析其临床意义及与预后的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测行手术的35例骨肉瘤及13例骨样骨瘤患者标本肝细胞生长因子受体c-met的表达,并分析其与临床因素和预后的关系.结果:骨肉瘤组织中肝细胞生长因子受体c-met的阳性表达率为80%(28/35),而在骨样骨瘤中的表达率为7.7%(1/12),两者比较显著差异(P＜0.01);结合临床资料分析,其表达与患者性别、年龄、发病次数、肿瘤体积、病理分型无关(P>0.05),而与临床分期、有无转移有关(P＜0.05).结论:C-met可能在骨肉瘤细胞侵袭、转移的过程中起重要作用;肝细胞生长因子受体c-met可以作为骨肉瘤诊断和预测转移的指标.     

髋臼骨折常见并发症原因分析

目的探讨髋臼骨折治疗过程中常见的早、远期并发症原因及预防措施。方法回顾性分析自2013年1月至2016年6月沈阳军区总医院收治的89例行切开复位内固定手术的髋臼骨折患者的临床资料。骨折至初次就诊患者来院时间0.5~36.0 h,中位时间8.0 h。受伤至手术时间5~18 d,中位时间8 d。分析本病诊疗的经过,评估骨折复位质量,记录髋臼骨折早、远期并发症,并进行分析。结果 68例患者获得随访,早期并发症包括术中内固定物穿入关节或脱出、切口脂肪液化、感染、坐骨神经损伤及下肢静脉血栓形成;远期并发症包括创伤性关节炎、股骨头坏死及下肢异位骨化。依据Matta髋臼骨折复位标准,优44例,良17例,可5例,差2例,优良率89.7%(61/68)。结论手术是治疗复杂髋臼骨折的首选方法,医师应重视院前急救、创伤控制,并根据术前骨折分型选择适当的手术入路和时机;提高手术技巧和关节面的复位质量是获得良好疗效的保证;术后早期、有效、合理的功能锻炼和干预措施是防治手术并发症的关键。     

静脉穿刺局部皮下瘀血144例原因分析

1997年 6月— 2 0 0 2年 4月我院发生的 14 4例静脉穿刺致皮下瘀血原因分析如下。1　原因分析1 1　工作责任心不强　护士在做治疗时 ,赶时间 ,而对穿刺病人的血管特点不做了解 ,对表浅血管的解剖位置及走行不熟悉 ,不管血管显露的好坏盲目进针 ,以至穿破血管造成皮下瘀血。对长期输液的病人血管的选择没有计划性 ,无静脉保护意识 ,只顾本班次 ,以至增加了不必要的穿刺次数。本组中由这一原因引起者 14例 ,占 9 7%。1 2　穿刺技能差 ,基本功不过关　护士在输液时 ,反复穿刺同一部位血管 ,使血管壁破坏 ,造成局部渗血现象。有一些难度较大的穿…     

缺氧诱导因子1α、多药耐药相关蛋白1在脊索瘤中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白、多药耐药相关蛋白1(MRP1)在脊索瘤中的表达水平及其与脊索瘤病理特征和放化疗抵抗之间的关系。方法收集2000年1月-2008年12月接受手术治疗的50例脊索瘤患者的肿瘤组织石蜡标本,另取15例骨软骨瘤标本作为对照。50例脊索瘤患者中男35例,女15例;年龄17～77岁,平均53.3岁;原发病例26例,复发病例24例;病理类型包括普通型48例,去分化型1例,外周型1例。采用免疫组化Envision法检测HIF-1α、MRP1蛋白表达情况,分析其与放化疗抵抗的关系,并探讨HIF-1α、MRP1表达与脊索瘤临床病理特征的关系。结果50例脊索瘤组织HIF-1α、MRP1的阳性表达率分别为80%和74%,均明显高于骨软骨瘤组织(分别为20%和27%,P<0.01)。相关性分析显示,脊索瘤组织中HIF-1α与MRP1的表达呈正相关关系(r=0.80,P<0.01)。脊索瘤组织中HIF-1α、MRP1的表达水平与患者性别、年龄、发病次数及肿瘤大小、部位、分化程度、分期、淋巴结转移均无明显关系。结论脊索瘤组织中HIF-1α和MRP1表达明显增高,且两者表达水平呈正相关,其过度表...