开展药理学电化教学的实践与思考

在医学领域采用电视录像教学的主要目的是通过形象地、直观地、动态地显示教学内容,突出教学的重点,突破教学难关,拓宽示教实验的范围,丰富教学内容。几年来,药理学的电教实践使我们感到:采用电视录像教学必须傲到精心设计、合理安排、科学使用,否则,就很难最大限度地发挥电教的作用,有时结果甚至适得其反。因此,我们必须努力研究电教手段在药理学中的应用方法,以期发挥其巨大的效益。     

60Co-γ射线照射对大鼠肺一氧化氮合酶和内皮素系统基因表达的影响

目的 探讨一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）和内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）及ＥＴ转换酶（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ，ＥＣＥ）等在受照射肺中的基因表达变化，揭示其在肺纤维化发生中的参与作用。方法 用＾６０Ｃｏ对大鼠肺进行３０Ｇｙ照射，照后４，８，２４天提取总ＲＮＡ，分别做ＲＴ－ＰＣＲ；对照射后１，３，５个月肺组织进行ＥＴ肽的Ｗｅｓ     

羟基积雪草苷对离体动脉条的舒张作用及其机制

目的 探讨羟基积雪草苷(madecassoside,MC)的舒张血管作用及其机制.方法 采用离体大鼠胸主动脉张力实验观察MC的舒张血管作用.结果 MC使去甲肾上腺素(NE)和氯化钾(KCl)收缩动脉条的量效曲线右移,最大收缩力降低;并对NE诱导的细胞内Ca2+释放所引起的收缩有明显的抑制作用;但去除血管内皮细胞后MC反而使动脉条收缩进一步增强;在有一氧化氮合酶(NOS)抑制剂存在的情况下,其抑制NE收缩的效应消失;对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)收缩动脉条的量效曲线无明显影响.结论 MC有明显的舒张血管作用,表现为钙拮抗活性,以抑制细胞内Ca2+释放为主;且通过内皮细胞发挥作用,并与一氧化氮(NO)合成通路有密切的关系.     

重组葡激酶对兔实验性肺栓塞的溶栓作用

目的旨在观察重组葡激酶(rSaK)对兔肺栓塞的溶栓作用。用体外制备¹²⁵I-人纤维蛋白血块,颈静脉注入。0.5h内静滴2和0.5万AU·kg^-1rSaK,与NS和2万U·kg^-1链激酶(SK)比较。另设2.5h滴注组,速度与低剂量同而总剂量与高剂量同。结果表明,各组肺动脉内残留血栓分别为62%±11%,78%±7%,92%±7%,60%±13%和64%±16%,给药组与对照比较有显著差异。体外实验rSaK与血凝块作用0.5h和2.5h的溶解率相近。rSaK和SK的最大溶解速率分别为34和10kBq·min^-1,Km值均为1.7kBq·ml^-1。提示:rSaK的疗效取决于总剂量。     

羟基积雪草苷舒血管作用的选择性作用特点研究

目的：探讨羟基积雪草苷（madecassoside,MC）对血管平滑肌的选择性作用特点。方法：分离大鼠胸主动脉和尾动脉以及回肠和膀胱平滑肌条,采用张力换能器及生物信号采集处理系统测定平滑肌张力变化;应用小肠推进实验考察对小肠蠕动的影响。结果：MC对去甲肾上腺素（NE）引起的胸主动脉和尾动脉收缩均有抑制作用,但对尾动脉作用更明显;同法,MC对高血压大鼠胸主动脉的作用明显比正常大鼠胸主动脉强;其它部位平滑肌中：无论是自发性收缩还是有激动剂存在的条件下,各剂量MC对离体回肠及膀胱平滑肌的收缩均无明显影响;在小肠推进实验中,MC对小肠推进率无显著作用。结论：MC具有舒张血管活性,且对血管平滑肌具有较好的选择性;对周围小动脉的作用明显强于中央动脉;对高血压大鼠动脉的舒张作用比正常大鼠更明显。     

60Co-γ射线照射对大鼠肺一氧化氮合酶和内皮素系统基因表达的影响

探讨一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）和内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）及ＥＴ转换酶（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅ，ＥＣＥ）等在受照射肺中的基因表达变化，揭示其在肺纤维化发生中的参与作用。方法用６０Ｃｏ对大鼠肺进行３０Ｇｙ照射，照后４，８，２４天提取总ＲＮＡ，分别做ＲＴ－ＰＣＲ；对照射后１，３，５个月肺组织进行ＥＴ肽的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＮＯＳ－ｍＲＮＡ原位杂交。结果照射后肺ＮＯＳｍＲＮＡ转录减弱，ＥＴｍＲＮＡ增强，ＥＣＥｍＲＮＡ在第８和２４天增强，ＥＴＢ－ＲｍＲＮＡ在第２４天转为阴性。照射后１，３，５月肺组织ＥＴ肽合成增加。照射后５个月ＮＯＳｍＲＮＡ原位杂交呈阴性。结论ＥＴ和ＮＯ之间平衡失调可能与肺纤维化发生有关。     

血管紧张素Ⅱ在60Co照射细胞增生和胶原合成中的作用

目的 探讨＾６０Ｃｏγ射线照射对在纤维细胞增生和Ⅰ型胶的合成的作用机制。方法 将人胚肺成纤维细胞（ＨＥＬＦ）以不同剂量照和血管紧张素Ⅱ刺激，测定培养液中丙二醛含量，检测细胞增生程度，用免疫细胞化学显示ＡⅡ和Ⅰ型胶原的合成。结果１－５Ｇｙ照射能刺激细胞增生和Ⅰ型胶原合成，同时促进胞内ＡⅡ合成，外源性ＡⅡ能促进细胞增生及胶的合成。结论ＨＥＬＦ经＾６０Ｃｏ照射能过多合成ＡⅡ，其可能与照射后细胞增生有关。     

羟基积雪草苷的抗高血压作用及其特点研究

目的:探讨羟基积雪草苷(madecassoside,MC)抗高血压作用及其作用特点。方法:利用高血压模型大鼠及正常大鼠,采用清醒及麻醉状态下血压直接测量法,研究MC对血压的影响及其作用特点。结果:MC降低了高血压模型大鼠的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)及心率(HR);而对正常大鼠血压及心率无明显影响。结论:MC具有降血压作用;但对正常大鼠血压无明显影响。     

重组人血清白蛋白/粒细胞刺激因子融合蛋白的药效学、药理学和毒理学研究

目的对重组人血清白蛋白/粒细胞刺激因子融合蛋白(rHSA/GCSF)开展药效学、药理学和毒理学动物评价研究,以确认其安全性和有效性。方法①对rHSA/GCSF开展的药效学研究内容主要有:以恒河猴骨髓细胞为研究系统,在体外条件下培养骨髓粒细胞-巨噬细胞集落(CFU-GM),计数不同浓度的rHSA/GCSF对CFU-GM数的影响的体外药效学评价;以小鼠~(60)Coγ照射、氟尿嘧啶注射液所致的鼠白细胞低下和对~(60)Coγ射线照射致食蟹猴白细胞低下的治疗作用。②药理学研究观察了rHSA/GCSF对小鼠中枢神经系统和狗呼吸及心血管系统功能的影响。③毒理学研究考察了rHSA/GCSF静脉和皮下给予小鼠、食蟹猴的急性毒性反应,以及长期和反复给药对大鼠和食蟹猴的安全性做出评价。④rHSA/GCSF的药代/毒代试验则是对~(125)I-rHSA/GCSF不同剂量单次皮下注射给予小鼠、大鼠后,rHSA/GCSF在各器官的分布、总放射性和TCA沉淀放射性的动力学参数测定,以及对不同剂量rHSA/GCSF连续给药食蟹猴后的血浆药物浓度及代谢动力学参数开展了考察。结果①rHSA/GCSF可以使骨髓的粒白细胞系(粒系)增生活跃,骨髓粒系造血细胞及成熟中性粒细胞均明显增多;对氟尿嘧啶所致小鼠白细胞减少症有明显的治疗作用,在使用化疗药早期,可以减缓白细胞的降低,特别是可以使粒白细胞提前恢复到正常水平;rHSA/GCSF可显著缩短食蟹猴白细胞减少症放疗模型产生的白细胞低下持续时间,使外周血白细胞加速恢复,尤其以中性粒细胞的增加为主,同时对红细胞和血小板的影响不大。②从获得的PD/PK数据t_(1/2)来看:rHSA/GCSF半衰期平均值约为38.6 h;单次皮下注射rHSA/GCSF,在500、1500、3000μg/kg剂量范围内对小鼠中枢神经系统无影响,与戊巴比妥钠无协同作用;单次皮下注射rHSA/GCSF在50、200μg/kg剂量范围内对狗呼吸和心血管系统无明显影响。实验表明rHSA/GCSF单次皮下和静脉注射给予小鼠的最大耐受量(MTD)≥37.5 mg/kg,单次皮下注射给予食蟹猴的最大耐受剂量为11.6 mg/kg:长期反复给药对大鼠的基本安全剂量为300μg/kg,对食蟹猴则是≥150μg/kg。结论 rHSA/GCSF融合蛋白每4天给药1次,对放、化疗所致的动物外周血白细胞减少症具有治疗作用,与市售常规rhGCsF每天注射1次相比具有长效作用。所获得的大量药效学、药代动力学、毒理学、毒代动力学的试验数据可供正在开展的临床试验研究参考,并具有很好的指导意义。     

Effects of nuclear translocation of tissue transglutaminase and the release of cytochrome C on hepatocyte apoptosis

Objective To assess the effects of nuclear translocation of tissue transglutaminase (TTG) and the release of cytochrome C on hepatocyte apoptosis and to reveal the mechanism of signal transcluction of early apoptosis in injured hepatocytes.Methods Hepatocytes isolated from tissue transglutaminase gene knock-out mice and rats were stimulated with ethanol. Proteins from whole cell, cytoplasm and nuclei were extracted for determination of TTG activity by ^14C-putrescine incorporation. Distribution of TTG throughout the entire cell, as well as just nucleus was observed under a confocal scanning microscope. The amount of cytochrome C released from mitochonclria was determined by ELISA. Cell apoptosis was observed by fluorescent cytochemistry.Results TTG activity in whole cells and nuclei was significantly increased after the hepatocytes were treated with ethanol. Cytochrome C release was remarkably increased in the cells isolated from rat and wild-type mouse after treatment with ethanol but not in TTG gene knock-out mice. Cellular apoptosis appeared in hepatocytes isolated from rats and wild-type mice but not in the hepatocytes from TTG gene knock-out mice after stimulation with ethanol.Conclusions Increased TTG in hepatocytes can be translocated into the nucleus and promote release of mitochonclrial cytochrome C into the cytoplasm. Passing through a series of signal pathways, hepatocyte apoptosis is induced eventually.