幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆及高效分泌表达

目的：从幽门螺杆菌（Ｈｐ）分离热休克蛋白Ａ基因，并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达，方法：提取Ｈｐ染色体ＤＮＡ，用ＰＣＲ方法扩增ｈｓｐＡ基因。经克隆、测序后，构建融合分泌表达载体ｐＭＡＬ－ＨｓｐＡ，转化大肠杆菌，ＩＰＴＧ诱导表达。结果：分离得到了高度保守的３５４ｂｐ的ｈｓｐＡ基因片段，并在大肠杆菌中实现了该基因的融合分泌表达。在３７℃诱导表达３ｈ后，基融合分泌表达蛋白可占细菌周质总蛋白的６６．６％。     

肉奶食品中金黄色葡萄球菌的检验

本实验采用国标规定的常规检验法对从长春市采集的62份肉样,152份奶样共214份食品样品进行了金黄色葡萄球菌的检验,结果有26份呈现阳性,阳性率为12.15％。同时,对这些样品进行了溶血试验与DNase试验,分别有35份和59份呈现阳性。     

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位和热休克蛋白A亚单位的融合表达

目的将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因和热休克蛋白A亚单位基因融合,并实现其在大肠杆菌中的表达,为构建该菌的基因工程二价苗打下基础.方法通过交叠延伸拼接PCR法将幽门螺杆菌ureB基因和hspA基因通过(Gly4Ser)3linker连接起来,经NcoⅠ和NotⅠ双酶切后定向克隆入表达载体pET22b+的pelB前导序列下游,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL31(DE3),用1PTG诱导表达.结果幽门螺杆菌的尿素酶B亚单位基因和热休克蛋白A亚单位基因通过linker获得了融合,序列分析表明,此融合基因序列拼接正确,且是通读的.含有该融合基因表达载体的表达菌株BL31(pET-BA)在30℃经IPTG诱导表达4h后,用10%SDS-PAGE电泳分析表明,在细菌周质表达有约与预期融合基因表达蛋白大小一致的外源蛋白质表达带.结论幽门螺杆菌ureB与hspA成功地实现了在大肠杆菌中的融合表达,为进一步评价其对Hp的免疫保护效果和构建Hp二价基因工程苗打下了基础.     

基因工程抗体种类及其优缺点

抗体技术发展至今已走过了三代的历程,第一代抗体是1890年德国学者Behring和日本学者北里首先从抗原被动免疫后获得的免疫清中发现的,即多克隆抗体;第二代是1975年德国学者Kohler和英国学者Mistein利用细胞融合技术,通过杂交瘤来制得     

新型冠状病毒通过消化道感染与传播的可能性浅析

由严重急性呼吸综合征冠状病毒-2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease-2019,COVID-19)已经发展为全球大流行性疾病,给人类带来了巨大的危机与灾难.该病主要经呼吸道飞沫和密切接触传播,但是否能够经消化道感染与传播一直是医学界和广大公众非常关注的问题.本述评从COVID-19的临床表现与消化系统症状、病毒的检测与分离培养、宿主细胞受体血管紧张素转化酶2的表达与分布等方面,对该问题进行了论述与分析.S ARS-Co V-2存在经消化道感染与传播的潜在风险,应加强进一步的确证研究与有效防控.