ⅢA期非小细胞肺癌新辅助化疗的病理组织学效应及其预后的影响

目的研究新辅助化疗诱导ⅢA期非小细胞肺癌(NSCLC)组织病理学反应对患者预后的影响。方法 40例患者完成2个周期新辅助化疗后,19例(47．5％)获客观缓解,其中完全缓解2例(5％),部分缓解17例(42．5％)。40 例ⅢA期NSCLC患者接受2个周期的新辅助化疗后手术,化疗方案由丝裂霉素、长春地辛和顺铂组成。手术后检查切除肿瘤标本的组织病理学反应。肿瘤组织对化疗的反应根据肿瘤坏死程度和残留肿瘤组织范围分为Ⅳ级、Ⅲ级、Ⅱ级和Ⅰ级。评价患者生存期与肿瘤组织对化疗反应等级之间的关系。结果40例患者的肿瘤切除标本中．2例(5％)属Ⅳ级,16例(40％)为Ⅲ级,18例(45％)为Ⅱ级,4例为Ⅰ级。肿瘤组织反应为Ⅲ -Ⅳ级患者的手术完全性切除率明显高于Ⅰ-Ⅱ级患者(P<0．05),中位生存期亦显著长于Ⅰ-Ⅱ级患者(P<0．05)。肿瘤组织反应属Ⅲ-Ⅳ级患者的3年生存率与Ⅰ-Ⅱ级患者比较明显为长(P<0．05)。结论由新辅助化疗诱导的肿瘤组织反应程度是ⅢA期NSCLC患者获成功治疗的关键因素。化疗后肿瘤切除标本上,有明显肿瘤组织反应(Ⅲ-Ⅳ级反应)存在提示患者预后较好。     

重组人骨形成蛋白-2在诱导C3H10T1/2干细胞成骨中对MMP-9 mRNA表达的影响

目的：测定MMP-9mRNA在C3H10T1／2 clone 8(10T1／2)中的表达，探讨rhBMP-2诱导10T1／2产生成骨细胞时对MMP-9mRNA表达的影响。方法：取10T1／2培养至细胞完全贴壁，加入rhBMP-2培养28天，同时利用Real—time PCR检测MMP-9在10T1／2中不同时间段的表达。结果：10T1／2经rhBMP-2的诱导14天出现钙化点，MMP-9mRNA也随着rhBMP-2的加入表达降低，而对照组几乎不变化。结论：rhBMP-2在诱导10T1／2产生成骨细胞的同时抑制着MMP-9mRNA的表达。     

γ射线对白血病细胞株K562中MMP-2表达的影响及牛磺酸的防护作用

目的：探讨γ射线对白血病细胞中MMP－2表达的影响，以及从细胞水平初步探讨牛磺酸对肿瘤细胞受辐照后MMP－2表达的抑制作用。方法：^60Coγ射线15Gy照射白血病细胞K562作为阳性对照组，不照射的作为阴性对照组（1－不加药，2－加药200mg/L)，另设三组实验组（照射，加药量分别为50mg/L、100mg/L、200mg/L），照后12h收集，细胞经处理后采用Western-blotting技术分析各组细胞MMP－2的表达水平。结果：15Gy照射剂量阳性对照组细胞MMP－2表达量明显增加，阴性对照组1中MMP－2表达量较少，实验组细胞MMP－2表达量随剂量增加而依次减少，其中200mg/L组与阴性对照组1细胞MMP－2表达量基本一致。结论：15Gy^60Coγ射线照射促进白血病细胞K562中MMP－2表达，电离辐射可引起肿瘤细胞的进一步侵袭和转移；加不同剂量牛磺酸后对MMP－2表达有抑制作用，且与剂量呈相关性，实现生物防治的作用。     

SD近交系大鼠经电子直线加速器照射后局部与全身自由基的变化

目的探讨直线加速器放射损伤后自由基的改变情况。方法采用直线加速器照射制作动物模型,同时观察其血清及局部组织中NOS、MDA、SOD、GSH-PX含量的改变。结果电子直线加速器照射后MDA、NOS在一定剂量范围内上升;SOD、GSH-PX则在一定剂量范围内下降。结论电子直线加速器照射后能产生自由基,并引起自由基清除酶系活性下降,但局部变化明显小于全身变化,这些改变是否可能为引起胶原损伤的原因,有待进一步研究。     

电子直线加速器外照射后NOS和SOD的变化研究

目的探讨β射线放射损伤后NOS和SOD的改变情况。方法采用直线加速器照射制作动物的β损伤模型 ,同时对NIH3T3细胞进行β外照射 ,观察NOS、SOD含量的改变。结果 β损伤后NOS在一定剂量范围内上升 ;SOD则在一定剂量范围内下降。结论 β损伤后能产生自由基 ,但其作用效应主要在全身 ,自由基在受照局部皮肤组织中改变的作用不大     

人多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)RNA干扰载体的构建及鉴定

目的:构建稳定的转染人多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAc-T2)基因的RNAi载体.方法:遵循RNA干扰目标序列的选取原则,对ppGalNAc-T2基因mRNA序列设计五条可能的小干扰RNA(siRNA),PCR方法扩增得到siRNA内源表达系统,转染至人胃癌细胞株SGC7901,运用RT-PCR方法检测筛选得到其中能高效引起ppGalNAc-T2基因表达沉默的siRNA;化学合成带荧光标记的该段RNA Oligo,转染细胞并用荧光显微镜观察转染情况,进一步鉴定该siRNA对ppGalNAc-T2的抑制作用;构建ppGalNAc-T2的RNA干扰真核表达载体,酶切及测序鉴定后转染SGC7901细胞并经G418筛选得到稳定的ppGalNAc-T2基因敲减细胞株,RT-PCR方法检测该转染细胞株ppGalNAc-T2表达水平.结果:采用RNAi技术,将高表达ppGalNAc-T2的SGC7901细胞的T2表达水平明显降低.结论:成功构建稳定的ppGalNAc-T2基因敲减细胞株,为今后进一步深入研究ppGalNAc-T2的生物学功能奠定了基础.     

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2在不同肿瘤组织中mRNA的表达差异

目的：观察三种不同肿瘤组织中PPGalNAc-T2的表达差异；方法：本文采用RT-PCR方法从mRNA水平上研究其表达，同时在同一反应管中进行内对照β-微球蛋白的扩增以进行半定量分析；结果：ppGalNAc-T2在不同肿瘤组织中，其在肿瘤部分、癌旁部分与正常部分的表达水平不具有一致性；结论：PPGalNAc-T2具有组织特异性；不同肿瘤组织的糖基转移酶作为肿瘤标志基因有待进一步的研究。     

高能电子线皮肤辐射损伤大鼠自由基的变化

为探讨电子射线放射损伤大鼠局部与全身自由基的改变情况与机理，采用直线加速器局部皮肤照射制作SD大鼠的放射损伤模型，观察全血与局部皮肤MDA、NOS、SOD、GSH-PX含量的改变。结果表明，电子射线损伤后大鼠血清自由基含量发生明显变化，其中MDA、NOS在实验剂量范围内呈上升趋势；SOD、GSH-PX则呈下降趋势。而局部皮肤受照后以上指标虽有改变但呈不规则变化。结果提示，电子射线损伤后能产生自由基，但其作用效应主要在全身，对受照局部皮肤组织自由基改变的作用不明显。     

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2真核表达载体的构建及在SHG-44细胞的表达

目的：为探讨O-糖基化在肿瘤发生发展及转移中的作用和功能，构建pcDNA3／ppGalNAc-T2真核表达质粒并转染人神经胶质瘤细胞SHG-44。方法：采用PCR技术从pDONR201-T2得到ppGalNAc—T2全长编码序列，亚克隆至真核表达载体pcDNA-3．1，脂质体介导基因转染人神经胶质瘤细胞SHG-44细胞，采用RT—PCR法检测重组质粒的表达。结果：酶切图谱分析和基因测序证实pcDNA3．1-T2真核表达质粒构建成功。RT-PCR显示转染细胞有12的表达。结论：成功构建了真核表达载体pcDNA3．1-T2，并成功转染入SHG-44细胞，为进一步研究ppGalNAcT2的功能奠定了基础。     

γ射线对白血病细胞K562 ppGalNAcT2 Mrna表达的影响及中药多糖的防护作用

目的 探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法 以不同剂量的~(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂量(5Gy、10Gy、15Gy)γ射线对K562细胞ppGalNAcT2 mRNA表达影响,及加入不同剂量中药(50mg/L,100mg/L,200mg/L)后对10Gy照射K562细胞组中T2 mRNA表达的防护作用。以RT-PCR法检测ppGalNAcT2 mRNA的表达差异变化。结果 γ射线照射K562细胞后ppGalNAcT2 mRNA表达明显减少,且与剂量呈负相关,而中药多糖则可对抗此种作用,使加中药多糖组细胞在照射后ppGalNAcT2 mRNA表达水平维持在正常细胞水平。结论 5～15Gyγ射线照射抑制白血病细胞ppGal-NAcT2 mPNA表达,可能与肿瘤细胞受照后分化抑制有关,而中药多糖明显对抗此种抑制作用。