PI3K/Akt信号通路介导的胰岛素促RPE细胞增生及分泌转化生长因子β2作用

背景 胰岛素具有促进近视发生的作用,胰岛素受体已被证实存在于视网膜色素上皮(RPE)细胞上,转化生长因子β2(TGF-β2)是RPE细胞分泌的重要的近视信号因子之一.目的 研究胰岛素是否通过磷脂酰肌醇-3-羟基酶/苏氨酸激酶(PI3K/Akt)通路促进RPE细胞增生及分泌TGF-β2.方法 使用含质量分数10％胎牛血清的DMEM培养基常规培养人RPE细胞株ARPE-19细胞,分别将10×103 U(商品单位)/ml胰岛素、LY294002、10× 103 U/ml胰岛素+LY294002、Wortmanin和10× 103 U/ml胰岛素+Wortmanin20 μmol/L各20μl加入培养基,另设常规培养的细胞作为空白对照.作用后48 h,采用MTS法检测各组RPE细胞的增生情况,采用ELISA法检测各组RPE细胞上清液中TGF-β2质量浓度,以评估细胞分泌TGF-β2的能力;各种药物作用后1h和2h,采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测各组细胞中TGF-β2mRNA的相对表达量.结果 MTS结果显示,胰岛素+LY294002组RPE细胞的增生值(A值)明显低于胰岛素组(0.75±0.03 versus0.98±0.04),差异有统计学意义(P＜0.05),而胰岛素+Wortmanin组RPE细胞增生与胰岛素组相比,差异无统计学意义(0.97±0.07 versus 0.98±0.04,P＞0.05).ELISA法检测结果显示,胰岛素+LY294002组和胰岛素+Wortmanin组RPE细胞上清液中TGF-β2质量浓度分别为(11.59±2.85)pg/ml和(49.16±10.94) pg/ml,明显低于胰岛素组的(548.50±35.18) pg/ml,差异均有统计学意义(P＜0.05),且胰岛素+LY294002组细胞上清液中TGF-β2质量浓度的下降值明显高于胰岛素+Wortmanin组,差异有统计学意义(t=8.131,P=0.000).RT-PCR结果显示,药物作用后1h和2h,胰岛素+LY294002组和胰岛素+Wortmanin组细胞中TGF-β2mRNA的相对表达量均明显低于胰岛素组,差异均有统计学意义(P＜0.05),胰岛素+ LY294002组细胞中TGF-β2mRNA相对表达量的下降程度稍大于胰岛素+Wortmanin组,作用后1h差异有统计学意义(t=4.176,P=0.014),但作用后2h差异无统计学意义(t=0.756,P=0.492).结论 胰岛素可以通过PI3 K/Akt途径促进RPE细胞增生,并促进RPE细胞分泌TGF-β2以进行信号传递,可能是胰岛素促进近视发生的机制之一.     

床边微创颅内血肿清除术治疗高血压脑出血的护理

目的:探讨床边微创颅内血肿清除术的护理要点,从而减少或避免手术并发症。方法:对58例各种颅内血肿采用微创血肿清除术治疗的患者实施细致的护理,包括术前准备和术后的观察和护理。结果:58例行微创颅内血肿清除术患者中,痊愈42例,肢体偏瘫13例,死亡3例。结论:精心的术后护理,对于提高微创颅内血肿清除术的疗效具有重要意义。     

颅内动脉瘤患者的术后护理

目的:总结颅内动脉瘤患者经开颅手术处理动脉瘤的术后护理特点和方法。方法:对2010年7月～2011年2月27例动脉瘤患者进行针对性护理,观察其围手术期特点,如患者的病情变化,引流管护理。做好心理护理,促进早日康复。结果:27例颅内动脉瘤患者在围手术期均未出现出血或再出血。结论:术后的护理对颅内动脉瘤术后有极重要的影响,正确妥善细致的护理可以提高手术的成功率。     

胰岛素对人RPE细胞增殖及转化生长因子-β2分泌的影响

目的:探讨胰岛素对RPE细胞增殖和分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响。方法:将不同浓度的胰岛素(0.1～10×103U/mL)加入培养基刺激ARPE-19细胞不同时间(0～48h)。采用MTS法检测RPE细胞的增殖情况;采用ELISA法检测各种处理情况下RPE细胞分泌TGF-β2的情况,Real-time PCR法检测TGF-β2mRNA的表达情况。结果:MTS结果显示,作用12h后,各实验组与对照组比较RPE细胞明显增殖(P<0.05)。ELISA结果表明胰岛素可明显促进RPE细胞分泌TGF-β2,并呈时间及剂量依赖性。Real-time PCR结果显示,胰岛素作用24h后,TGF-β2mRNA表达上调(P<0.01),且10×103U/mL胰岛素组TGF-β2mRNA表达明显高于0.1×103U/mL胰岛素组(P<0.01)。结论:RPE细胞是眼内近视信号因子TGF-β2的重要来源,胰岛素可以通过促进RPE细胞增殖并分泌TGF-β2进行信号传递,促进近视发生。     

Relationship of MMP-2 or TGF-β2 levels in human vitreous with axial length

目的:探究高度近视患者眼轴与玻璃体中MMP-2和TGF-β2水平的相关性.方法:研究患者玻璃体切除术中获取玻璃体样本55份.依据角膜表面曲率大小及眼轴长度,将研究对象分为两组:即高度近视组(25例):SE>-6.00D,AL≥26.00mm和对照组或非高度近视组(30例):SE<-6.00D,AL<26.00mm.利用ELISA的方法测量研究对象玻璃体MMP-2和TGF-β2浓度.结果:高度近视组玻璃体MMP-2浓度(96.87±55.95ng/mL)显著高于对照组(77.24±41.81ng/mL,P<0.05),但与眼轴没有相关性(r=0.088,P=0.544).高度近视组(3729.08±1890.88pg/mL)与对照组(3926.00±1333.88pg/mL,P<0.05)TGF-β2浓度具有显著差异性,且TGF-β2浓度与眼轴长度呈负相关(r=-0.344,P=0.014).结论:人玻璃体中MMP-2和TGF-β2两种分子浓度在高度近视进展中具有重要作用,TGF-β2浓度与眼轴长度具有相关性.     

基于心与小肠相表里探析肠道菌群与糖尿病认知障碍的关联

基于中医学心与小肠相表里理论，心病可及小肠，小肠病亦可反作用于心，而心主神明是心的重要功能。若小肠分清泌浊功能受损，会有碍于心主司神志活动的发挥。现代医学发现肠道菌群与认知功能的联系紧密，这与中医学“心与小肠相表里”相吻合。糖尿病认知障碍（DCI）在中医学里属于消渴呆病范畴。中医学认为，脾胃失衡是消渴呆病的始动因子，脾虚痰浊闭阻是消渴呆病的病理物质产物，临床有健脾醒脑法指导该病。以往项目证实肠道菌群紊乱是中医学脾胃失衡的现代病理基础，提示恢复脾胃功能以调整肠道微生物稳态有助于消渴呆病的防治。近年来DCI发病率上升迅速，发病机制复杂未明，增加了治疗难度，故寻找新的靶标不容忽视。目前糖尿病与肠道菌群紊乱互为因果关系方面的研究取得不少成果。基于肠道菌群与糖尿病、认知障碍均有复杂联系，梳理三者之间的关系尤为关键。立足于既往的科研基础，逐层分析，发现肠道菌群既能影响大脑内神经递质的合成，又参与慢性炎症、胰岛素抵抗、血糖上升等糖尿病与认知障碍的共同发病环节，具有典型的靶标作用。梳理肠道菌群与DCI的关联，以期为治疗建立新的靶点和方向，并深挖中医药调控脾胃治疗消渴呆病的科学内涵。