血管性痴呆大鼠认知功能及nNOS的表达

目的 探讨血管性痴呆(VD)大鼠认知功能、海马神经元结构及nNOS的表达.方法 采用双侧颈总动脉结扎法制备慢性前脑缺血动物模型,40只老龄大鼠随机分为假手术组(S)、模型组(M).应用水迷宫、透射电镜及免疫组化方法对2组大鼠学习记忆、神经元结构、nNOS表达进行观察.结果 与假手术组比较,大鼠水迷宫学习记忆能力在造模2个月后差异有统计学意义(P＜0.05),大鼠海马神经元在造模后变性水肿明显,大鼠海马及颞叶皮层nNOS在造模2个月后表达增加 (P＜0.05).结论 海马及颞叶皮层nNOS表达增加,神经元变性,可能导致血管性痴呆大鼠学习记忆障碍.     

不同干预方法对血管性痴呆大鼠神经再生及脑组织N-myc蛋白表达的影响

目的探讨不同干预方法对血管性痴呆大鼠神经再生及脑组织N-myc蛋白表达的影响。方法雄性Wistar大鼠实验随机分为4组:假手术组,模型组,训练组,b FGF组。采用两血管阻断加硝普钠降压法制作大鼠血管性痴呆(VD)动物模型,用HE、和免疫组织化学方法检测海马组织N-myc蛋白的表达及穿梭箱训练和b FGF的干预作用。结果随着脑缺血再灌注3 d缺血海马神经元N-myc阳性细胞明显增多,随缺血再灌注时间的延长逐渐增多,14 d达高峰。应用穿梭箱训练和b FGF的干预后N-myc阳性细胞明显增加。结论穿梭箱训练和b FGF促进神经再生及缺血脑组织N-myc蛋白的表达,提示穿梭箱训练和b FGF促进神经再生作用可能由N-myc信号介导。     

雌二醇对血管性痴呆大鼠海马CA1区GFAP表达的影响

目的研究17β-雌二醇对血管性痴呆（vascular dementia，VD）大鼠海马CA1区GFAP表达的影响，探讨雌激素对血管性痴呆大鼠中枢神经系统保护作用的机制。方法采用结扎双侧颈总动脉方法制备血管性痴呆动物模型，腹腔注射不同剂量17β-雌二醇60d后，应用γ迷宫检测各组VD大鼠认知功能以及免疫组化法等检测大鼠大脑海马CA1区GFAP表达的变化。结果腹腔注射17β-雌二醇60d后，大鼠认知功能显著改善；学习、记忆功能测试30次的正确次数较实验对照组明显增高（P〈0．05），造模60d后的大鼠，其脑内CA1区GFAP免疫阳性细胞数较假手术组显著增高，而雌二醇组大鼠CA1区GFAP免疫阳性细胞数较实验对照组显著减少。结论雌激素补充疗法能选择性影响血管性痴呆大鼠脑内CA1区GFAP阳性细胞，并有可能影响学习和记忆能力。     

丁苯酞对血管性痴呆大鼠认知功能、海马神经元结构及nNOS的影响

目的研究丁苯酞对血管性痴呆（VD）大鼠认知功能、海马神经元结构、及神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的影响。方法采用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,100只老龄大鼠随机分5组,应用水迷宫、透射电镜及免疫组化方法对各组大鼠学习记忆、神经元结构、nNOS表达进行观察。结果与假手术组比较,大鼠学习记忆能力在造模后差异有显著性意义（P〈0.05）;大鼠海马区神经元在造模后变性水肿明显,与模型组比较,丁苯酞不同剂量治疗1月后,大鼠学习记忆能力明显改善（P〈0.05）,神经元变性水肿减轻,nNOS阳性神经元表达减少（P〈0.05）。结论丁苯酞能显著改善VD大鼠学习记忆能力;减轻神经元变性水肿;抑制nNOS阳性神经元表达。     

银丹心脑通软胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及海马组织乙酰胆碱酯酶的影响

目的 观察银丹心脑通软胶囊对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织乙酰胆碱酯酶活性的影响,探讨银丹心脑通软胶囊治疗血管性痴呆的作用机制. 方法 采用反复夹闭双侧颈总动脉再灌注、同时腹膜腔内注射硝普钠方法制作拟血管性痴呆大鼠模型.将造模成功的20只大鼠按随机数字表法分为血管性痴呆组及银丹心脑通软胶囊治疗组(各10只),另以条件匹配的10只大鼠为假手术组.于造模结束大鼠苏醒后30min以及处死前测定大鼠神经功能评分,采用跳台实验检测大鼠学习记忆能力,采用放射免疫法检测海马组织乙酰胆碱酯酶活性. 结果 大鼠处死前,与假手术组比较,血管性痴呆组和银丹心脑通软胶囊治疗组大鼠神经功能评分仍明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05);银丹心脑通软胶囊治疗组大鼠神经功能评分明显低于血管性痴呆模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).与血管性痴呆组比较,银丹心脑通软胶囊治疗组大鼠反应时间明显缩短,潜伏时间明显延长,错误次数明显减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).银丹心脑通软胶囊治疗组海马组织AChE活性明显低于血管性痴呆组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 银丹心脑通软胶囊能增强血管性痴呆模型动物的学习记忆功能,其作用机制可能与抑制乙酰胆碱酯酶活性有关.     

β-淀粉样蛋白诱导大鼠海马神经元凋亡及海马亲环素A表达的变化

目的 探讨Aβ25-35对大鼠海马神经元的损伤及对亲环素A(CyPA)表达的影响. 方法 健康Wister大鼠60只按照随机数字表法分为实验组(n=30)和对照组(n-30),实验组大鼠采用Aβ25-35注射入双侧海马制造阿尔茨海默病的动物模型,对照组大鼠同样位置注射入等量生理盐水.HE染色观察2组大鼠海马CA1区神经元形态,TUNEL染色检测细胞凋亡,RT-PCR检测CyPAmRNA的表达,Western blotting检测CyPA蛋白的表达. 结果 实验组大鼠海马CA1区神经元遭到破坏,细胞凋亡增加,数量减少,且随时间延长细胞凋亡情况进一步加重,造模后1d、7d、14d较对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组大鼠海马组织CyPA mRNA和CyPA蛋白表达量随时间呈现出先增长后降低的趋势,1d、7d时明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).14d时明显低于对照组大鼠,其中CyPA蛋白的差异具有统计学意义(P＜0.05). 结论 Aβ25-35通过加重大鼠海马神经元凋亡诱发神经毒性作用,CyPA表达的增加可能是一种内源性保护因素.     

高压氧早期干预对创伤后应激障碍模型大鼠行为及海马核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1表达水平的影响

目的 探讨高压氧早期干预对创伤后应激障碍（PTSD）模型大鼠行及海马核因子 E2 相 关因子 2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）及血红素加氧酶 1（HO-1）基因表达的影响。 方法 将 32 只雄性 Sprague-Dawley 大鼠随机分为对照组（sham 组）、高压氧组（HBO 组）、模型组（ESPS 组）、模型 + 高压氧早期干预组（ESPS+HBO 组），每组 8 只。ESPS 组和 ESPS+HBO 组大鼠经增强型单次 延长应激（ESPS）构建 PTSD 模型，其他两组不接受 ESPS 造模，但置于同一实验室环境。造模结束 24 h 后，各组大鼠置于高压氧舱进行 1 h 高压氧（2.5 个大气压，100% O2 ）或常压空气干预，连续 5 d。干预 结束后将大鼠放回原饲养笼中不受打扰饲养 7 d。通过旷场实验、高架十字迷宫实验以及条件性恐惧 性实验观察大鼠的行为表现，并通过蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测大鼠海马组织 Nrf2 和 HO-1 的 表达情况。结果 （1）各处理组旷场内总运动距离的差异无统计学意义（P＞ 0.05）；ESPS 组中心区运 动时间 ［（20.52±9.25）s］和进入旷场中心区次数［（15.22±4.38）次］均显著低于sham组［（44.94±14.49）s、 （32.77±6.22）次］，而 ESPS+HBO 组［（35.49±13.04）s、（21.50±5.98）次］则显著高于 ESPS 组（均P＜ 0.05）。 （2）与 sham 组开臂停留时间［（54.47±23.23）s］、开臂停留时间百分比［（17.91 ±8.11）%］和进入开臂次 数［（10.54±3.85）次］比较，ESPS 组各指标［（26.18±8.56） s］、［（7.23±4.24）%］和［（3.10±1.96）次］均 显 著 降 低，而 ESPS+HBO 组 各 指 标［（40.77±16.66）s］、［（13.66±8.81）%］和［（6.40±1.71）次］均 显 著高于 ESPS 组（均P＜ 0.05）。（3）ESPS 组环境诱发僵直时间［（183.21±25.83）s］和声音诱发僵直时间 ［（202.03±47.79）s］均显著高于 sham 组和 ESPS+HBO 组（均P＜ 0.05）。（4）ESPS 组海马 Nrf2（0.23±0.08） 和 HO-1（0.84±0.13）的蛋白相对表达水平均显著低于 sham 组和 ESPS+HBO 组（均P＜ 0.05）。（5）sham 组 与 HBO 组在上述行为和分子表达指标之间的差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）。结论 高压氧早期干 预可能通过调节海马的抗氧化系统 Nrf2/HO-1 的表达水平改善 PTSD 大鼠的焦虑样行为和认知损伤。     

血管性痴呆大鼠学习记忆障碍及脑组织生长抑素的变化

目的探讨生长抑素（SS）参与血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆障碍的作用机制。方法采用双侧颈总动脉结扎法制备慢性前脑缺血动物模型，随机分为假手术组（S）、模型组（M）。造模2月后进行水迷宫试验，观察2组大鼠空间学习记忆能力的差异，应用免疫组化方法检测造模2月后VD大鼠海马及颞叶皮层生长抑素表达变化。结果与假手术组比较，大鼠水迷宫学习记忆能力在造模2月后差异有显著性意义（P〈0．05），大鼠海马及颞叶皮层SS表达在造模2月后降低（P〈0．05）。结论脑组织SS表达降低，导致血管性痴呆大鼠学习记忆障碍。     

康复训练联合促红细胞生成素对脑出血大鼠神经 修复及海马胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的 康复训练联合促红细胞生成素（EPO）对脑出血大鼠神经修复及海马组织胶质原纤 维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。方法 健康雄性SD 大鼠30 只随机分成3 组：模型组、EPO 组和训练组， 每组各10 只大鼠。3 组均建立脑出血模型，EPO 组与训练组在造模成功24 h 后均腹腔注射EPO，训练组 大鼠给予康复训练，模型组注射与EPO 组及训练组所注射EPO等量的生理盐水。观察与检测大鼠神经 修复及海马GFAP表达情况。结果 所有大鼠均造模成功，EPO 组与训练组造模后7 d、14 d 和28 d 的 Tarlov 评分高于模型组（P＜ 0.05），训练组也显著高于EPO 组（P ＜ 0.05）。造模后28 d，EPO 组与训练组 的脑含水量、血清IL-6 和TNF-α 值、海马组织GFAP蛋白相对表达水平显著低于模型组（P＜ 0.05），训练 组也低于EPO 组（P ＜ 0.05）。结论 康复训练联合EPO在脑出血大鼠中的应用能抑制海马GFAP表达 与血清炎性因子的释放，减轻脑水肿，从而促进神经功能恢复正常。     

高压氧促进小鼠脊髓损伤后功能恢复

目的 探讨高压氧（HBO）治疗小鼠脊髓损伤的效果及机制。方法 将雌性ICR小鼠45只随机分为3组:假手术组（n=15）、模型组（n=15）、HBO组（n=15）。应用血管夹损伤脊髓组织制作脊髓损伤模型。模型组造模后常规护理,HBO组行HBO治疗。造模后1、7、28 d采用BMS评分评估小鼠后肢运动功能;造模后7 d,采用免疫印迹法检测损伤脊髓组织Nrf2蛋白表达情况,采用免疫荧光染色观察细胞核Nrf2移位情况。结果 假手术组BMS评分均为9分。造模后1 d,模型组和HBO组BMS评分均为0分,后肢完全瘫痪。造模7 d,模型组BMS评分仍为0分;HBO组MBS评分明显高于模型组（P<0.05）,但明显低于假手术组（P<0.05）;造模后28 d,模型组和HBO组BMS评分均明显提高（P<0.05）,HBO组提高更明显（P<0.05）。造模后7 d,免疫荧光染色显示,假手术组没有发现Nrf2核移位,模型组可见少量Nrf2核移位,HBO组Nrf2核移位明显增多;免疫印迹法结果显示,模型组和HBO组Nrf2表达水平明显增高（P<0.05）,HBO组增高更明显（P<0.05）。结论 HBO治疗可显著促进小鼠脊髓损伤后神经功能恢复,机制可能与促进Nrf2表达及核移位有关。