一氧化氮对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶的调节作用

目的研究一氧化氮(NO)对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的调节作用。方法大鼠主动脉平滑肌细胞分为硝普钠(SNP)实验组和对照组,硫电极法测定培养上清中H2S含量,竞争性RT-PCR法检测细胞中CSE mRNA水平。结果SNP实验组较对照组培养上清H2S含量显著升高[(16.16±3.71)μmol/Lvs(22.71±4.84)μmol/L],但CSE mRNA的水平在SNP组较对照组明显降低[(0.16±0.06)vs(0.12±0.04)]。结论SNP对SHR血管平滑肌细胞中H2S/CSE体系发挥复杂的调节作用。     

硫化氢体系在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖中的意义

目的　探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞中胱硫醚 γ 裂解酶 (CSE)基因表达的影响和硫化氢对肺动脉平滑肌细胞增殖的调节作用。方法　人工培养大鼠的肺动脉平滑肌细胞 ,实验分为 1.对照组 ;2 .硫氢化钠 (NaHS)组 :10 - 4mol/LNaHS处理 2 4h ;3 .低氧组 :氧浓度 1%以下 2 4h ;4.低氧 NaHS组 :低氧 2 4h ,10 - 4mol/LNaHS。每组各 6孔细胞。用3H TdR掺入估计细胞增殖 ,用定量竞争性RT PCR方法测定CSEmRNA含量 ,评价CSE基因表达。结果　低氧组平滑肌细胞中的CSEmRNA含量较对照组减少 67% (P <0 .0 1)。低氧组细胞的3H TdR掺入较对照组增加 66% (P <0 .0 1) ;NaHS组细胞的3H TdR掺入较对照组减少 3 7%(P <0 .0 1) ;低氧 NaHS组的3H TdR掺入较低氧组减少 2 9% (P <0 .0 1)。结论　低氧使人工培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞中CSE基因表达下调 ,硫化氢对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖有抑制作用。     

二氧化硫对低氧性肺动脉高压大鼠内源性硫化氢体系的调节作用

目的 研究二氧化硫( SO2)对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内源性硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶( CSE)以及H2S/巯基丙酮酸转硫酶(MPST)体系的调节作用.方法 将雄性Wistar大鼠(32只)随机分为对照组、低氧组、低氧+ SO2组和低氧+天冬氨酸异羟肟酸(hydroxamate,HDX)组,每组8只.低氧处理采用常压低氧的方法,氧浓度为10％,每天低氧6h,持续21 d.对照组大鼠在常氧环境中饲养.低氧处理结束后采用右心导管法测定肺动脉平均压,采用硫电极法测定肺组织H2S含量和H2S产率,采用免疫组化法检测各组大鼠肺小动脉内膜及中膜CSE和MPST的蛋白表达.结果 低氧组大鼠肺动脉平均压较对照组高[(33.38 ±6.32) mm Hg vs(16.74±3.81) mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P＜0.01];低氧+SO2组大鼠肺动脉平均压较低氧组低[(29.65±2.53)mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01],低氧+HDX组大鼠肺动脉平均压较低氧组高[(39.44±6.26) mm Hg vs(33.38±6.32) mm Hg,P＜0.01].低氧组大鼠肺组织H2S含量[(2.02±0.43) μmol/g vs (3.11±0.42) μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(19.64±3.48) nmol/(g· min)vs(28.20±5.95) nmol/(g·min),P＜0.05]均较对照组低.给予SO2供体后,低氧+SO2组肺组织H2S含量[(2.73±0.20)μmol/g vs(2.02±0.43)μmol/g,P＜0.01]及H2S产率[(26.24±1.92) nmol/(g· min)vs(19.64±3.48) nmol/(g· min),P＜0.01]均较低氧组升高.当给予内源性SO2生成酶抑制剂HDX后,低氧+HDX组肺组织H2S含量[(1.64±0.23) μmol/g vs (2.02±0.43)μmol/g,P＜0.05]及肺组织H2S产率[(13.94±3.63) nmol/(g·min) vs (19.64±3.48) nmol/(g·min),P＜0.05]均较低氧组低.低氧组大鼠肺小动脉内膜[(0.31±0.02)vs(0.36±0.01),P＜0.01]及中膜[(0.27±0.01)vs (0.30±0.01),P＜0.01]中CSE蛋白表达均较对照组低.低氧+SO2组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组高[(0.35±0.02) vs (0.31 ±0.02),P＜0.01].低氧+HDX组大鼠肺小动脉内膜CSE蛋白表达较低氧组低[(0.26±0.01) vs (0.31±0.02),P＜0.01].与对照组相比,低氧组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.低氧+SO2组大鼠肺小动脉中膜MPST的蛋白表达较低氧组高[(0.32±0.02) vs (0.29±0.01),P＜0.01];而与低氧组相比,低氧+ HDX组大鼠肺小动脉内膜及中膜MPST的蛋白表达差异没有统计学意义.结论 外源性给予SO2供体可上调低氧性肺动脉高压大鼠肺小动脉内膜H2S生成酶CSE及肺小动脉中膜MPST蛋白表达,促进H2S生成增多,从而间接缓解低氧性肺动脉高压的形成.     

硫化氢抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人巨噬细胞单核细胞趋化蛋白-1分泌的作用

目的研究气体信号分子硫化氢(H2S)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人单核细胞白血病细胞(THP-1)来源的人巨噬细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)分泌的影响。方法将THP-1来源的人巨噬细胞分为4组:正常对照组、ox-LDL组、ox-LDL+H2S 100组及ox-LDL+H2S 500组。正常对照组:细胞于基础培养基中培养48 h;ox-LDL组:在基础培养基中加入50 mg.L-1ox-LDL,培养48 h;ox-LDL+H2S 100组在基础培养基中先加入100μmol.L-1NaHS,孵育30 min后再加入50 mg.L-1ox-LDL,培养48 h;ox-LDL+H2S 500组在基础培养基中先加入500μmol.L-1NaHS,孵育30 min后再加入50 mg.L-1ox-LDL,培养48 h。用ELISA法检测细胞上清液中MCP-1水平。结果与正常对照组[(34.58±6.77)μmol.L-1]比较,ox-LDL组[(66.27±7.29)μmol.L-1]、ox-LDL+H2S 100组[(49.45±3.08)μmol.L-1]及ox-LDL+H2S 500组[(46.64±5.47)μmol.L-1]细胞上清液中MCP-1水平均明显升高(Pa<0.05);与ox-LDL组比较,ox-LDL+H2S 100组及ox-LDL+H2S 500组细胞上清液中MCP-1水平均明显降低(Pa<0.05)。ox-LDL+H2S 100组细胞上清液中MCP-1水平与ox-LDL+H2S 500组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论ox-LDL可诱导人巨噬细胞MCP-1分泌增加;给予外源性H2S的供体NaHS可明显抑制ox-LDL诱导的MCP-1分泌增加。     

布地奈德对哮喘大鼠内源性H2S、CSE、CBS 体系的调节机制

目的：观察布地奈德对哮喘大鼠血浆硫化氢（H2S）含量和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、胱硫醚-β-合成酶(CBS) mRNA的表达,探讨内源性H2S、CSE、CBS体系在哮喘发病机制中的作用。方法：Sprague-Dawley大鼠30只随机分成对照组、哮喘组、布地奈德组,每组10只。用鸡卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。分光光度法测定血浆H2S的含量,RT-PCR 法测定肺组织CSE、CBS mRNA的表达水平。结果：哮喘组血浆H2S的含量（61±16 μmol/L）显著低于对照组（84±15 μmol/L）（P0.05）。哮喘组肺组织CSE mRNA和CBS mRNA的表达水平显著低于对照组（P<0.01）,布地奈德组CSE mRNA和CBS mRNA表达显著低于对照组但高于哮喘组（均P<0.01）。相关性分析结果显示血浆H2S含量和支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞总数表达呈显著负相关(n=30, r=-0.549,P<0.01)。结论：哮喘大鼠H2S、CSE、CBS的表达下降,它们的表达下降可能促进了炎症细胞在气道中的聚集,布地奈德改善哮喘炎症的机制可能部分通过内源性H2S、CSE、CBS体系起作用。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：654-657］     

硝普钠对早产兔动脉导管胱硫醚-y-裂解酶-硫化氢体系的影响

目的 探讨一氧化氮(NO)供体硝普钠对早产兔动脉导管胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)-硫化氢(H2S)体系的影响.方法 孕龄21 d日本大耳白兔16只,随机分为对照组,腹腔注射硝普钠(NO供体)小剂量(1 mg/kg)组,中剂量(2.5 mg/kg)组,大剂量(5 mg/kg)组,每组4只,对照组单纯用空针穿刺孕兔腹腔,各腹腔注射硝普钠组待孕龄23和25 d时分别腹腔注射相应剂量的硝普钠.待孕龄第26天时对各组动物进行麻醉解剖取胎兔(对照组取得胎兔28只,硝普钠小剂量组27只,中剂量组29只,大剂量组26只),胎兔心脏取血1ml后立即解剖胎兔取动脉导管组织.用去蛋白方法测定胎兔血浆H2S含量,用实时荧光定量RT-PCR测定动脉导管组织中CSE基因,用Western-blot测CSE蛋白表达情况.结果 对照组胎兔血浆H2S含量为(55.68±6.57) μmol/L,动脉导管组织CSEmRNA表达量为1.07±4.12;硝普钠腹腔注射小剂量组分别为(60.02±6.09) μmol/L,3.46±0.18;中剂量组为(64.71 ±7.12) μmol/L,10.93 ±0.22;大剂量组为(70.63±8.07) μmol/L和19.57 ±0.17,小剂量组与对照组、中剂量组与小剂量组、大剂量组与中剂量组比较均P＜ 0.05,胎兔动脉导管CSE蛋白表达随着孕兔注射硝普钠剂量的增大而逐渐增多.结论 硝普钠对早产兔动脉导管中CSE-H2S体系在一定浓度范围内具有浓度依赖性促进作用.     

缺氧缺血性脑损伤新生儿血清硫化氢动态变化的研究

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤时血清硫化氢(H2S)水平的变化情况。方法选取本院儿科2004年12月至2009年9月因缺氧缺血性脑病或颅内出血住院的新生儿为观察组,同期因怀疑咽下综合征入院、最终排除各种疾病的新生儿20例为对照组。观察组分别于生后1~2天(急性期)及7~10天(恢复期)、对照组于生后1~2天留取空腹静脉血,采用ELISA法检测血清中H2S水平。结果观察组(52例)急性期H2S水平较对照组明显升高[(4.6±2.9)μmol/L比(2.4±1.7)μmol/L,P=0.002],观察组恢复期(31例)H2S水平较急性期(31例)明显降低[(1.7±1.7)μmol/L比(4.6±3.4)μmol/L,P=0.000];观察组恢复期血清H2S水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。早产儿和足月儿、缺氧缺血性脑病组和颅内出血组H2S水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论新生儿缺氧缺血性脑损伤后血清中H2S水平增高,并随疾病恢复而降低,发生动态变化。     

手足口病患儿血清硫化氢及白细胞介素-6水平改变的研究

目的：研究手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)患儿血清硫化氢(hydrogen sulfide,H2 S)与白细胞介素(interleukin,IL)-6水平改变的意义。方法选择在我院住院治疗的92例HFMD 患儿为研究对象,根据病情,选择其中48例为重症 HFMD 组,44例为普通 HFMD 组,选择同期健康儿童46例为健康对照组。分别检测其血清 H2 S 及 IL-6水平。结果急性期：重症 HFMD 组与普通 HFMD 组血清 H2 S [(21.72±7.52)μmol /L、(31.86±8.41)μmol /L]水平均明显降低,IL-6[(131.33±17.82)ng /L、(95.48±15.07)ng /L]水平明显升高,与健康对照组[H2 S (55.76±7.80)μmol /L,IL-6(61.31±13.43)ng /L]比较差异有统计学意义(P ﹤0.01);重症 HFMD 组与普通HFMD 组比较差异有统计学意义(P ﹤0.01)。恢复期：重症 HFMD 组血清 H2 S[(34.54±13.21)μmol /L]水平仍低于健康对照组,IL-6[(92.73±15.25)ng /L]水平仍高于健康对照组,差异有统计学意义(P ﹤0.01)。相关性分析显示：重症 HFMD 组与普通 HFMD 组血清 H2 S 与 IL-6水平之间均呈显著负相关(r ＝-0.31,P ﹤0.01;r ＝-0.45,P ﹤0.01)。结论 HFMD 患儿血清 H2 S 和 IL-6水平发生了改变,并且可作为重症 HFMD 患儿早期诊断的指标之一。     

先天性心脏病患儿血浆硫化氢变化的意义

目的研究先天性心脏病(CHD)患儿血浆硫化氢(H2S)含量与正常小儿有何差异,并探讨其病理生理学意义。方法先天性心脏病和对照组各9例,测定其心率、血压、肺动脉压及血浆H2S含量,分析CHD患儿与对照组血浆H2S含量的差异及其与肺动脉压力的关系。结果CHD患儿血浆H2S含量为(32.13±2.25)μmol/L,低于对照组的(43.69±2.05)μmol/L,差异有显著性(P<0.01)。血浆H2S含量与肺动脉压力呈明显负相关(r=-0.864P<0.05)。结论内源性H2S的下调可能在CHD继发肺动脉高压的发病过程中起重要作用。     

肺动脉高压新生儿血浆硫化氢变化的意义

目的 探讨肺动脉高压新生儿血浆硫化氢(H2S)的变化及其与肺动脉高压(PH)相关性,为临床有效治疗新生儿PH提供新的思路和理论依据.方法 随机选取2005年3月-2006年3月本院ICU病房住院PH新生儿16例,选取同期住院非PH新生儿16例作为对照组.对全部研究对象均行超声心动图检查,依据简化柏努力方程AP=4V2max计算出压力阶差,估测三尖瓣二侧压力,间接判断其肺动脉压,对二组新生儿于出生3～10 d清晨8:00取静脉血4 mL,迅速分离其血浆,采用敏感硫电极法测定其血浆H2S水平,应用氨基酸分析仪测定其同型半胱氨酸水平.应用SPSS 10.0软件进行t检验.结果 PH新生儿肺动脉收缩压为4.27～9.73(6.49.±1.79)kPa;对照组肺动脉收缩压正常.肺动脉高压组血浆同型半胱氨酸及H:s水平明显高于对照组[(11.94 ±6.65)μmol/Lvs(6.43 ±2.08)μmol/L,t=2.630 P=0.016;(26.99 ±1.33)μmol/Lvs(24.92 ±1.36)μmol/L,t=4.373 P=0].结论 PH新生儿血浆同型半胱氨酸和H2S明显升高,内源性H2S上调可能参与肺动脉压力的调节.H2S可能通过扩张肺动脉降低肺动脉压力而对PH具有保护作用.