骨髓间充质干细胞对急性肺损伤幼鼠炎症因子IL-1β、IL-10的影响

目的 探讨骨髓充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)幼鼠炎症因子IL-1β、IL-10的影响.方法 SPF级雄性SD幼年鼠72只,随机分为3组:对照组、疾病模型组(模型组)、疾病模型+ BMSC(治疗组),各组再按时段随机分为4个亚组.建立幼年鼠ALI模型,治疗组注射BMSC,模型组、对照组注射等体积培养基(DMEM).观察肺组织病理形态变化,检测W/D比值和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中性粒细胞计数及蛋白质含量,检测IL-1β、IL-10含量的变化.结果 与对照组、治疗组相比,模型组各个时间段的BALF中性粒细胞数量、总蛋白的含量、肺组织W/D比值均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05).治疗组肺组织损伤程度较模型组相比明显减轻.血清中的IL-1β和IL-10含量在不同时间段均呈降低状态,48h时段与6h时段存在显著差异,具有统计学意义(P<0.05).模型组幼年鼠肺组织IL-1β蛋白大量表达于肺泡上皮细胞胞浆及细胞壁上;而治疗组蛋白表达强度明显下降.模型组各个时间段的肺组织IL-1β、IL-10蛋白含量均明显较高,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 BMSC可对ALI幼鼠炎症因子IL-1β、IL-10产生重要影响,BMSC能够减轻肺损伤炎症反应,并参与了肺损伤的修复.     

地塞米松对脂多糖诱导的急性肺损伤幼鼠肺表面活性物质蛋白－D的影响

目的：肺表面活性物质蛋白D(SP－D)被认为是急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)有价值的生物指标。该研究旨在探讨幼鼠ALI时及地塞米松干预后肺组织SP－D的变化。方法：144只SD大鼠被随机分为正常对照组、肺损伤组和地塞米松治疗组。腹腔内注射脂多糖（LPS，4 mg/kg)建立急性肺损伤模型, 正常对照组注射等量生理盐水, 治疗组于注射LPS 1小时后注射地塞米松(5 mg/kg)。LPS注射后6，12，24，36，48，72 h 每组各处死8只大鼠。用Western blot方法测定肺组织SP－D的相对含量。结果：与正常对照组相比,ALI组在注射LPS后36，48，72 h SP－D含量明显下降(P<0.01)，在48 hrs达最低点(0.92±0.11 vs 3.27±0.52)。地塞米松治疗组于注射LPS后36，48，72 h SP－D含量明显高于ALI组 (P<0.01), 6，12，24，36和48 h 与对照组相比差异无显著性, 72 h差异有显著性(P<0.05)。结论：急性肺损伤早期幼鼠肺组织SP－D含量降低。早期应用地塞米松能使ALI肺组织下降的SP－D明显上升。［中国当代儿科杂志，2007，9（2）：155-158］     

新生大鼠内毒素性急性肺损伤肺组织MDA、SOD和IL-10、IL-18的改变

目的 探讨氧化/抗氧化及细胞因子在新生大鼠急性肺损伤中的变化。方法 用脂多糖(LPS)制备新生大鼠急性损伤模型,用化学方法和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-18(IL-18)的改变。结果 MDA在应用LPS后1小时明显高于正常对照组,(31.99±1.73)nmol/mg肺蛋白VS(10.68±0.67)nmol/mg肺蛋白,持续至24小时;SOD含量在应用LPS后1小时即明显低于正常对照组,(69.86±2.94)NU/mg肺蛋白VS(85.99±1.89)NU/mg肺蛋白,4小时最低(58.61±3.01)NU/mg肺蛋白,8小时有所恢复,16小时基本正常;IL-10在注射LPS后4小时明显升高[(9.46±0.53)pg/mg肺蛋白],持续至16小时仍高于正常对照组(8.57±0.38)pg/mg肺蛋白,24小时下降至正常;IL-18在应用LPS后1小时即明显增多(10.73±0.29)pg/mg肺蛋白,持续至24小时。结论 在LPS造成的新生大鼠急性肺损伤中,存在明显的氧化/抗氧化平衡失调,并有抑炎性和促炎症介质的失调,炎症介质释放的失调和氧化/抗氧化的失衡可能相互协同,加重肺损伤。     

新生大鼠内毒素性急性肺损伤肺组织MDA、SOD和IL-10、IL-18的改变

目的探讨氧化/抗氧化及细胞因子在新生大鼠急性肺损伤中的变化.方法用脂多糖(LPS)制备新生大鼠急性损伤模型,用化学方法和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-18(IL-18)的改变.结果MDA在应用LPS后1小时明显高于正常对照组,(31.99±1.73)nmol/mg肺蛋白VS(10.68±O.67)nmol/mg肺蛋白,持续至24小时;SOD含量在应用LPS后1小时即明显低于正常对照组,(69.86±2.94)NU/mg肺蛋白VS(85.99±1.89)NU/mg肺蛋白,4小时最低(58.61±3.01)NU/mg肺蛋白,8小时有所恢复,16小时基本正常;IL-10在注射LPS后4小时明显升高[(9.46±0.53)pg/mg肺蛋白],持续至16小时仍高于正常对照组(8.57±0.38)pg/mg肺蛋白,24小时下降至正常;IL-18在应用LPS后1小时即明显增多(10.73±0.29)pg/mg肺蛋白,持续至24小时.结论在LPS造成的新生大鼠急性肺损伤中,存在明显的氧化/抗氧化平衡失调,并有抑炎性和促炎症介质的失调,炎症介质释放的失调和氧化/抗氧化的失衡可能相互协同,加重肺损伤.     

血管活性肠肽对肺损伤大鼠Toll样受体mRNA表达的影响

目的 探讨血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)对内毒素(脂多糖,lipopolysaceberide,LPS)致休克大鼠肺损伤后Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2和TLR4 mRNA表达的影响.方法 40只SD大鼠,随机分为LPS组(16只)、LPS+VIP组(16只)和对照组(8只).LPS组尾静脉注射LPS(E.coli O_(55)B_5)10 mg/kg;LPS+VIP组尾静脉注射LPS 10 ms/kg后注射VIP 5 nmol/kg;对照组尾静脉注射等容量生理盐水.分别于注射后6 h和24 h处死,留取肺标本,RT-PCR检测肺TLR2/4 mRNA表达,并观察24 h时肺组织病理变化.结果 (1)肺组织病理改变:制模24 h时.光镜和透射电镜下,LPS组见肺泡间隔弥漫性增宽、炎性细胞浸润,隔内毛细血管不同程度充血,肺泡壁增厚,肺泡腔结构破坏、炎性细胞浸润、出血、间质水肿、细胞器破坏,LPS+VIP组病变较轻.(2)TLR2/4 mRNA表达:注射LPS后6 h、24 h,肺组织TLR2/4 mRNA表达升高(F=16.638,P=0.000;t=5.876,P=0.000);24 h时LPs+VIP组TLR2/4 mRNA表达低于LPS组(F=16.676,P=0.000;t=3.9,16,P<0.001).结论 LPS致休克大鼠肺损伤时,肺组织TLR2/4 mRNA表达增强.VIP可减轻LPS所致肺损伤,其机制可能与下调重要炎症基因TLR2/4 mRNA表达有关.     

肾上腺素对内毒素血症大鼠早期炎症因子及急性肺损伤的影响

目的：探讨肾上腺素对内毒素( lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠肺损伤的保护作用及其作用机制。方法30只SD大鼠随机分为3组(每组10只)：正常对照组大鼠静脉输注生理盐水2．4 ml/( kg·h);LPS组大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,静脉输注生理盐水2．4 ml/( kg·h);肾上腺素组大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,静脉输注肾上腺素0．6μg/( kg·min)。在LPS注射后2 h和6 h通过心导管抽血,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子( TNF)-α、白细胞介素( IL)-6和IL-10水平,并在6 h处死大鼠取肺脏组织,分别予肺组织含水量检测,HE染色观察肺组织病理学变化,以及ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)内TNF-α、IL-6和IL-10水平。结果(1)与正常对照组肺含水量(70．19%±5．87%)相比,LPS组肺含水量(85．24%±5．87%)明显升高( P <0．05),与 LPS 组相比,肾上腺素组肺含水量(78．00%±6．41%)明显降低(P<0．05)。(2)病理观察结果显示,LPS组大鼠肺泡隔内毛细血管充血、水肿及炎症细胞浸润,少部分肺组织可见肺不张及肺泡内水肿、出血。肾上腺素组大鼠肺病理损伤较LPS组明显减轻。(3)与LPS组相比,肾上腺素组各时点血清TNF-α及IL-6水平明显降低(P<0．05), IL-10水平明显升高(P<0．05)。(4)与LPS组相比,肾上腺素组大鼠BALF中TNF-α水平降低[(78±9)ng/L vs.(102±16) ng/L],IL-6水平降低[(268±42) ng/L vs.(347±50) ng/L],IL-10水平升高[(210±23)ng/L vs.(146±34) ng/L](P<0．05)。结论肾上腺素可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其保护作用可能与降低TNF-α、IL-6水平,升高IL-10水平有关。     

急性肺损伤新生大鼠肺组织水通道蛋白5的变化及意义

目的 探讨早期急性肺损伤(ALI)肺组织水通道蛋白5(AQP 5)的变化及意义.方法 70只新生SD大鼠随机分为生理盐水对照组及内毒素(LPS)急性肺损伤组(LPS组,7个亚组).LPS组新生大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS,各亚组分别在注射后0.5、1、2、4、8、16 h和24 h处死,收集肺组织行病理学观察及测肺湿/干重比值,用免疫印迹法测肺组织AQP 5的表达,观察其动态变化.结果 注射LPS后0.5 h病理可见针尖样肺出血,随时间延长,肺出血从局灶性向弥漫性发展;注射后2、4 h新生大鼠肺湿/干重比值较对照组增高(P＜0.05),之后回落;注射后0.5 h,肺组织AQP 5表达开始下调,1～2 h达到最低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),随后AQP 5表达逐渐升高,8 h时AQP 5表达接近正常水平,8 h后又出现下调直至24 h,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 新生大鼠ALI早期即出现明显的AQP5表达下调,并与肺组织湿/干重比值呈负相关,可能是导致肺泡水肿的重要因素之一.     

抗炎多肽对内毒素诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 研究抗炎多肽AF2(antiflammin-2)和重组多肽R2(recombinantant peptide sequence 2)对内毒素(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用,及其对肺组织clara细胞16 000蛋白(CC16)和表面活性蛋白A(SP-A)表达的影响.方法 Balb/c雄性小鼠随机分为5组:对照组,ALI模型组,AF2治疗组,R2治疗组和氢化可的松(HC)治疗组.ALI模型组和各治疗组分别腹腔注射LPS复制小鼠肺损伤模型;治疗组随后注射AF2(2 mg/kg)、R2(2 mg/kg)或氢化可的松(25 mg/kg),对照组和ALI模型组注射等量的生理盐水.在6 h记录动物的呼吸频率;在12 h处死动物,肺组织切片观察肺病理变化;肺组织研磨提取总RNA,半定量法检测CC16和SP-A的表达.结果 (1)各治疗组动物6 h呼吸频率均低于ALI模型组[(112±4)次/30 s],分别为AF2治疗组(108±2)次/30 s、R2治疗组(101±2)次/30 s、HC治疗组(96±2)次/30 s,其中R2和HC治疗组与ALI模型组比较,差异有统计学意义.(2)肺组织病理学观察显示AF2、R2对LPS诱导的小鼠ALI肺组织的渗出、炎症细胞浸润有一定的抑制作用,各治疗组病理评分与ALI模型组比较差别均有统计学意义.(3)与ALI模型组比较,AF2治疗组CC16的表达上调,差异有统计学意义,R2和HC治疗组SP-A的表达上调,差异有统计学意义.结论 抗炎多肽AF2和重组多肽R2对内毒素诱导的小鼠ALI有一定的保护作用.     

分泌型白细胞蛋白酶抑制剂对内毒素致新生大鼠急性肺损伤的抗感染作用

目的探讨分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)对内毒素(LPS)致新生大鼠急性肺损伤(ALI)的抗感染作用。方法利用LPS气管内滴入制备新生大鼠ALI模型,设立SLPI治疗组、LPS组、生理盐水(NS)对照组。SLPI治疗组在气管内滴入LPS前30 min预先滴入400μg SLPI。4 h后取各组大鼠肺组织匀浆,用琼脂扩散法、ELISA法分别测定中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性和TNFα-水平。结果LPS组肺组织NE活性、TNFα-及总蛋白水平均显著高于SLPI治疗组和对照组,3组比较差异有显著性(F=1475.28,35.8,21.6 P均<0.01);SLPI治疗组肺组织NE活性、TNF-α及总蛋白水平均显著低于LPS组,差异有显著性(q=66.14,7.02,5.60 P均<0.01);但高于对照组,亦有显著性差异(q=22.18,5.07,3.77 P<0.01,0.05)。结论SLPI对LPS致新生大鼠急性肺损伤有抗感染作用。     

糖皮质激素对急性肺损伤幼鼠水通道蛋白-1表达的作用

目的 研究急性肺损伤(acute lung injury,ALI)幼鼠肺组织中水通道蛋白-1(aquaporin1,AQP-1)的表达变化,探讨糖皮质激素治疗ALI的可能机制.方法 将实验动物分为生理盐水对照组(对照组)、致ALI组(lipopolysaccharide,LPS组)、甲泼尼龙(methylprednisolone,Mp)治疗组(Mp组).观察6h后测定动脉血氧分压、肺湿干重比值,并采用免疫组织化学方法和RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中AQP-1的表达变化及对肺组织进行常规病理染色观察.结果 RT-PCR结果显示LPS组AQP-1mRNA相对表达量与对照组相比明显减少(0.28±0.05 vs 0.50 ±0.24,P＜0.05),Mp组AQP-1 mRNA相对表达量与LPS组相比明显增加(0.47±0.16 vs 0.28±0.05,P＜0.05).免疫组织化学结果与RT-PCR结果一致.同时Mp组血氧明显改善(P＜0.01),肺湿干重比值下降(P＜0.05),肺2组织损伤减轻.结论 糖皮质激素对ALI的治疗作用可能与其影响AQP-1的表达有关.     

孤儿核受体RORC在脓毒症大鼠肺泡巨噬细胞的表达及调控机制

目的观察脓毒症肺损伤大鼠孤儿核受体RORC基因表达及血清IL-17水平,探讨Th17细胞在肺损伤中的作用及可能的调控机制。方法24只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamates,PDTC)预防组。静脉注射脂多糖(LPS,6mg/kg)复制急性肺损伤(ALI)的动物模型,在注射后12h处死。PDTC预防组在注射LPS前30min予以PDTC(120mg/kg)腹腔注射。测定肺湿/干重比(W/D),石蜡包埋切片经苏木素-伊红(HE)染色行肺组织病理评分,免疫组织化学法检测肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AM)核因子-κBP65(nuclear factor-κBP65,NF-κBP65)表达,ELISA法检测血清IL-17水平,实时荧光定量PCR法检测AM孤儿核受体RORC基因表达。结果与对照组相比,模型组肺干/湿比、肺组织病理评分、AM的NF-κBP65表达、血清IL-17水平、AM孤儿核受体RORC基因表达增加(P<0.05);与模型组相比,PDTC预防组上述改变得以逆转。结论Th17细胞可能参与了肺损伤的病理过程...     

反复热性惊厥大鼠海马IL-1β和IL-1ra表达的变化

目的 探讨大鼠反复热性惊厥(FS)后海马白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-1受体拈抗剂(IL-1ra)表达的变化.方法 清洁级21日龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、高热对照组(HC组)和热性惊厥组(FS组).末次热水浴后12 h处死动物,用ELISA法检测海马IL-1β和IL-1ra的含量;RT-PCR法测海马IL-1β和IL-1ra mRNA的表达水平.结果 Fs组大鼠海马IL-1β蛋白和IL-1β mRNA水平均明显高于NC组和HC组,差异均具有显著性(P＜0.01和P＜0.05);FS组大鼠海马IL-1ra蛋白及IL-1ra mRNA水平亦明显高于HC组和NC组,差异均具有显著性(P＜0.01和P＜0.05).各组大鼠海马IL-1ra/IL-1β蛋白比值差异无显著性(P＞0.05).结论 短期内反复FS可导致海马IL-1β和IL-1ra表达增加,提示IL-1β和IL-1ra可能参与FS脑损伤发病的病理过程.     

IL-12对小鼠哮喘模型Th亚群和气道炎症的影响

目的观察腹腔注射IL-12对哮喘小鼠Th亚群的调节和气道炎症的影响,并寻找更有效的干预阶段。方法将36只BALB/c小鼠分为4组,每组9只,分别为哮喘组、IL-12干预A组、IL-12干预B组及正常对照组。采用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法制成哮喘模型,正常对照组小鼠同时以等量的生理盐水腹腔注射加雾化吸入。干预A组在致敏和激发阶段均给予IL-12腹腔注射进行干预,干预B组仅在激发阶段给予IL-12腹腔注射进行干预。最后1次激发结束后24h处死所有小鼠,取左肺作病理切片(HE染色),右肺提取总RNA并逆转录成cDNA后,应用半定量RT-PCR法检测肺组织内IFN-γ基因mRNA的转录表达情况,实时定量PCR法检测肺组织内IL-4基因mRNA的转录表达情况。结果与正常对照组相比,哮喘组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达显著减少(P<0.05),IL-4mRNA表达显著增多(P<0.05);与哮喘组相比,IL-12干预A、B组小鼠肺组织内IFN-γmRNA表达均显著增多(P均<0.05),IL-4mRNA表达均显著减少(P均<0.05)。干预A组与干预B组相比,IL-4mRNA的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),而IFN-γmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论IL-12能有效纠正哮喘小鼠失衡的Th亚群及控制气道炎症;致敏、激发阶段同时干预与仅激发阶段的干预均能有效的抑制Th2型免疫反应和气道炎症改变,前者能更有效的降低IL-4mRNA的表达水平。     

吸入性糖皮质激素对哮喘小鼠肺组织HMGB1、IL-1β表达的影响北大核心CSCD

目的了解高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及白介素-1β(IL-1β)在小鼠哮喘模型肺组织表达及分布以及吸入性糖皮质激素(ICS)对其影响。方法 SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及布地奈德组,每组24只,分别于1、2、3、4周时每组各处死6只。RT-PCR法检测各组肺组织HMGB1 mRNA表达水平,免疫组化标记HMGB1、IL-1β在肺组织的分布,用Image-Pro Plus图像分析系统分析IL-1β的灰度值。结果 HMGB1在对照组小鼠肺组织呈低表达,哮喘组第2周出现高峰,而布地奈德组第1周出现高峰,各组小鼠之间以及在第1～4周不同时间点之间,HMGB1表达的差异均有统计学意义(P均<0.01);IL-1β的免疫组化标记在对照组小鼠肺组织中少,而哮喘组明显;布地奈德组则介于两者之间。肺组织IL-1β灰度值在哮喘组和布地奈德组小鼠中,从第1～4周,逐渐增加,各时间点差异有统计学意义(P均<0.05);两组在不同时间点均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);哮喘组在不同时间点又都低于布地奈德组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 HMGB1可能参与哮喘气道炎症,作用机制可能不同于IL-1β。     

肾上腺素对内毒素致大鼠肠道损害的保护作用

目的 探讨肾上腺素对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠肠道损害的保护作用及其作用机制.方法 50只SD大鼠随机分为5组(每组10只):对照组:大鼠静脉输注0.9％生理盐水24 ml/(kg·h);LPS组:大鼠静脉注射LPS 6m/kg后,静脉输注生理盐水2.4 ml/(kg·h);低、中和高剂量肾上腺素组:大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,分别静脉输注肾上腺素0.12 μg/(kg·min)、0.3μg/(kg·min)和0.6μg(kg· min).在LPS注射前、注射后2h和注射后6h3个时点取血,检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-10水平,并在24h观察肠道的组织病理学变化.结果 LPS组大鼠在LPS注射后2h血清TNF-α浓度为(1164±145) ng/L,IL-1β浓度为(521±68)ng/L,IL-10浓度为(303±20) ng/L,较对照组均明显升高(P＜0.05).病理结果显示,LPS组小肠黏膜充血、水肿、出血及炎症细胞浸润,上皮细胞坏死、脱落.高剂量肾上腺素组2h血清TNF-α浓度为(576±105) ng/L,2h和6h的IL-10浓度分别为(424±29) ng/L和(24.5±14) ng/L,与LPS组相比血清TNF-α水平明显降低(P＜0.05)且IL-10水平明显升高(P＜0.05),但IL-1β水平无明显变化(P＞0.05).高剂量肾上腺素组大鼠肠道病理损伤明显减轻.中、低剂量肾上腺素组各时间点血清细胞因子水平与LPS组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),未见肠道病理损害减轻.结论 肾上腺素可以通过抗炎作用减轻LPS素诱导的肠道损害.     

吸入性糖皮质激素对哮喘小鼠肺组织HMGB1、IL-1β表达的影响

目的了解高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及白介素-1β(IL-1β)在小鼠哮喘模型肺组织表达及分布以及吸入性糖皮质激素(ICS)对其影响。方法 SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及布地奈德组,每组24只,分别于1、2、3、4周时每组各处死6只。RT-PCR法检测各组肺组织HMGB1 mRNA表达水平,免疫组化标记HMGB1、IL-1β在肺组织的分布,用Image-Pro Plus图像分析系统分析IL-1β的灰度值。结果 HMGB1在对照组小鼠肺组织呈低表达,哮喘组第2周出现高峰,而布地奈德组第1周出现高峰,各组小鼠之间以及在第1～4周不同时间点之间,HMGB1表达的差异均有统计学意义(P均<0.01);IL-1β的免疫组化标记在对照组小鼠肺组织中少,而哮喘组明显;布地奈德组则介于两者之间。肺组织IL-1β灰度值在哮喘组和布地奈德组小鼠中,从第1～4周,逐渐增加,各时间点差异有统计学意义(P均<0.05);两组在不同时间点均低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01);哮喘组在不同时间点又都低于布地奈德组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 HMGB1可能参与哮喘气道炎症,作用机制可能不...     

氢化可的松对内毒素致急性肺损伤大鼠多形核白细胞氧自由基释放的影响

目的　　观察氢化可的松 (6mg/kg)对内毒素致急性肺损伤 (ALI)大鼠多形核白细胞(PMN)释放氧自由基 (OFR)及肺部病理改变的影响 ,探讨激素在ALI中发挥作用的可能机制。方法复制大鼠ALI模型 ,随机分为空白组、内毒素组 (LPS组 )、氢化可的松组 (HC组 ) ,空白组于注药后 6h、LPS组和HC组分别于注药后 2、4、6h抽血检测OFR释放 ,同时比较各组间肺组织病理改变。结果　(1)LPS组大鼠肺病理符合ALI表现。 (2 )OFR释放 3组比较有差异显著意义 (P <0 0 1) ,LPS组较空白组明显增强 (P <0 0 5 ) ,并在观察时间内 (2～ 6h)不断升高。HC组在各时点较LPS组均明显降低(P <0 0 5 ) ,在 4h抑制作用最明显 ,达 98 2 %。 (3)肺病理半定量评分 ,3组间差异有显著意义 (P <0 0 1)。与空白组相比 ,LPS组与HC组评分均显著升高 (P <0 0 5 )。而与LPS组相比 ,HC组病理评分显著降低 (P <0 0 5 )。结论　在LPS诱导ALI大鼠模型中 ,OFR大量释放在ALI发病中起了重要作用 ,6mg/kgHC可使肺损伤改善 ,同时对OFR释放可产生明显、持续的抑制 ,提示HC对ALI起保护作用 ,机制可能是通过抑制PMN释放OFR而实现     

宫内注射脂多糖对围产期大鼠肺Toll样受体4信号转导通路的影响

目的 观察宫内注射脂多糖(LPS)对围产期大鼠肺内天然免疫相关的Toll样受体4(TLR4)信号转导通路的影响,探讨天然免疫在宫内感染中的免疫调节能力及对肺发育的影响.方法 将30只孕17d的SD大鼠随机分为LPS组和生理盐水对照组,LPS组宫内注射LPS 10μl(40μg/ml),对照组宫内注射等体积的灭菌生理盐水.分别留取胎龄18、20、22 d(E18、E20、E22)的胎鼠肺组织、胎盘组织标本以及生后1、3、7d(P1、P3、P7)新生鼠肺组织标本,HE染色观察病理改变,RT-PCR技术检测TLR4、髓样分化因子88(MyD88)和白介素1 β(IL-1β)mRNA表达,免疫组织化学技术检测肺组织TLR4、MyD88的表达分布情况.实验数据采用单因素方差分析和q检验进行统计学分析.结果 (1)LPS组孕鼠胎盘组织有大量中性粒细胞浸润,宫内感染模型建立成功;(2)在E18、E20和E22时,LPS组胎鼠肺组织无明显病理学改变,以后逐渐出现改变,于P7时可见肺泡数量减少,肺泡腔变大,间隔变薄,但未见明显结构紊乱;(3)LPS组TLR4、MyD88和IL-1β mRNA水平于E20和E22均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且均于E22表达达高峰,后缓慢下降;(4)免疫组织化学结果显示E18时两组肺组织内均未见明显TLR4和MyD88阳性染色,后均逐渐表达增加,且主要在细支气管和肺泡上皮细胞表达.结论 (1)宫内注射LPS可导致胎鼠和早产鼠肺组织TLR4、MyD88表达在一定范围内增加,后逐渐回复正常水平,同时肺组织的病理改变和炎症反应较为温和,推测在围产期胎肺天然免疫系统可以调节LPS诱导的炎症反应强度;(2)该实验在一定程度上证实宫内感染激活的信号转导通路是MyD88依赖性途径.     

一氧化碳释放分子3通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻脂多糖诱导的新生鼠急性肺损伤

目的 探讨一氧化碳释放分子3(CORM3)对脂多糖(LPS)诱导的新生鼠急性肺损伤(ALI)肺泡上皮细胞凋亡的影响。 方法 32只新生SD大鼠均分为对照组、LPS组、CORM3组和失活CORM3（iCORM3）组;LPS组、CORM3组和iCORM3组采用LPS气管内滴注建立新生鼠ALI模型,分别腹腔注射生理盐水、CORM3和iCORM3;对照组不建立ALI模型,腹腔注射生理盐水。于建模后12 h取肺组织,苏木素 伊红染色观察肺组织病理改变,湿干(W/D)比值测定,肺泡灌洗液(BALF)细胞计数及蛋白含量测定。体外培养A549细胞,LPS诱导细胞凋亡。MTT检测细胞活性,Tunel染色观察组织、细胞凋亡变化。 结果 ①与对照组相比,LPS组肺组织形态结构明显紊乱,肺泡压缩,肺间质大量炎性细胞浸润;CORM3组肺组织形态结构基本正常,间质炎性细胞浸润少;iCORM3组见肺组织水肿及大量炎性细胞浸润。②与对照组相比,LPS组肺组织W/D比值、BALF细胞数及蛋白含量明显升高,肺泡上皮细胞凋亡率明显增多［(37.3±4.5)% vs (3.0±1.0)%］;A549细胞活力下降,凋亡率明显升高［(29.6±4.1)% vs (3.6±1.0)%］,差异均有统计学意义 （P<0.05）。CORM3组肺组织W/D比值、BALF细胞数和蛋白含量较LPS组显著下降,肺泡上皮细胞凋亡率减少［（19.3±4.6）%］;A549细胞活力回升,凋亡率［（15.3±4.5）%］明显降低,差异均有统计学意义 （P<0.05）。LPS组与iCORM3组间上述指标差异均无统计学意义。 结论 CO通过抑制肺泡上皮细胞凋亡减轻新生鼠ALI     

急性肺损伤大鼠肺Clara细胞蛋白的变化及相关因素研究

目的 研究急性肺损伤(ALI)大鼠肺Clara细胞蛋白(CCSP)的变化及相关影响因素.方法 将6周龄雄性SD大鼠随机分成4 h实验组及对照组、12 h实验组及对照组(各8只);实验组腹腔注射(IP)脂多糖(10 mg/ks),对照组IP等量牛理盐水;于实验第4、12小时观察肺泡灌洗液(BALF)中WBC及分类、肺组织湿/干重比(W/D)、肺组织病理学评分(LIS);检测肺组织γ干扰素(IFN-γ)、白介素8(IL-8)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)含量及BALF中CCSP含量、肺组织CCSP mRNA表达.结果 腹腔注射脂多糖4 h后,肺部病理改变显著,BALF中CCSP及CCSP mRNA显著减少,肺组织MIP-2增高;12 h后,进一步出现肺组织IFN-γ、IL-8显著增高.结论 ALI大鼠肺CCSP减少并与急性炎症反应有关.