骨髓间充质干细胞对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)对磷酰胺氮芥诱导卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用及可能机制.方法 分离培养雌性Wistar大鼠卵巢颗粒细胞,加入磷酰胺氮芥(30/μmol/L)至培养的颗粒细胞中,再与MSCs以不同比例共培养72h.实验分为4组:①颗粒细胞单独培养组(对照组);②共培养组1,MSCs:颗粒细胞=1:1;③共培养组2,MSCs:颗粒细胞=1:5;④共培养组3,MScs:颗粒细胞=1:10.采用Annexin V检测凋亡率;采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化,ELISA法检测MSCs培养基中血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的浓度.结果 对照组化疗药物引起的卵巢颗粒细胞凋亡率为35.04%±5.75%,而共培养组1、2、3的凋亡率分别为12.80%±2.42%.13.94%±3.86%,22.31%±5.67%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).蛋白质免疫印迹显示与MSCs共培养后,颗粒细胞Bcl-2表达水平明显增高(P<0.05),Bax表达水平无明显变化(P>0.05).MSC$能分泌VEGF、HGF和IGF-1.结论 MSCs对体外化疗药物诱导的卵巢颗粒细胞的凋亡有保护作用,其作用机制可能是其分泌的细胞因子通过旁分泌途径发挥作用,以及Bel-2在颗粒细胞中表达上调有关.     

经皮神经电针刺激对骨质疏松大鼠骨形态发生蛋白-2表达的影响

目的 探讨经皮神经电针刺激对骨质疏松大鼠骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响.方法 选择88只4个月大雌性SD大鼠,采用随机数字法将其分为空白组(不做任何处理,n=22)、假手术组(只暴露双侧卵巢但不切除,n=22)、模型组(双侧卵巢切除术,n=22)、电针刺激组(双侧卵巢切除术+经皮神经电针刺激,n=22).干预结束后,测定4组大鼠离体骨组织骨密度;分别采用第4腰椎压缩试验、股骨三点弯曲试验测定大鼠腰椎、股骨生物力学;采用Real-time PCR检测大鼠血清BMP-2、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达水平,采用改良Mankin评分综合评定大鼠骨组织形态及结构.结果 模型组大鼠股骨、腰椎骨密度低于空白组及假手术组,电针刺激组高于模型组、低于空白组及假手术组(P<0.05).第4腰椎压缩试验及股骨三点弯曲试验结果:模型组大鼠弹性模量、最大载荷低于空白组及假手术组,电针刺激组高于模型组、低于空白组及假手术组(P<0.05).模型组大鼠Mankin评分高于空白组及假手术组,电针刺激组低于模型组、高于空白组及假手术组(P<0.05).模型组大鼠血清BMP-2、TGF-β1 mRNA低于空白组及假手术组,电针刺激组高于模型组、空白组及假手术组(P<0.05).结论 经皮神经电针刺激可提高骨质疏松大鼠血清BMP-2表达水平,增强骨密度,可有效抑制骨质疏松与关节软骨退化.     

地塞米松对尾悬吊大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的　探讨地塞米松对尾悬吊大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法　采用尾悬吊大鼠模拟失重模型 ,将健康雄性SD大鼠分为尾悬吊组 (尾悬吊 7天模拟失重 )、地塞米松干预组 (尾悬吊第 3天开始腹腔注射地塞米松 5mg/kg,共 5天 )和正常对照组 ,每组 10只 ,用TUNEL技术检测肺组织细胞凋亡情况。结果　尾悬吊组凋亡指数显著高于对照组 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,地塞米松干预后细胞凋亡水平明显低于尾悬吊组 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 )。结论　尾悬吊模拟失重的大鼠肺组织细胞凋亡指数增高 ,而地塞米松可抑制模拟失重大鼠肺组织细胞的凋亡。     

Rho激酶抑制剂对大鼠血管内皮的保护作用及eNOS表达的影响

目的探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠血管内皮的保护作用及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为5组(每组6只),即空白对照组(Control组,腹腔注射0.9%生理盐水),高同型半胱氨酸血症(HHcy)模型组(HHcy组,腹腔注射0.9%生理盐水),低、中、高剂量法舒地尔干预组[L-、M-、H-干预组,分别经腹腔注射法舒地尔1、5、15mg/(kg.d)]。HHcy组及法舒地尔干预组均采用1.5%蛋氨酸饮用水持续饲养大鼠4周,构建HHcy血管内皮损伤模型;空白对照组大鼠以饮用水喂养。建模成功后采用酶法检测大鼠血清一氧化氮(NO)含量;分别用免疫组织化学法和Western blotting检测主动脉中eNOS、Rho相关的卷曲蛋白激酶(ROCK2)和Ras基因家族成员A(RhoA)蛋白的表达。结果与空白对照组比较,HHcy组大鼠血清中NO含量明显下降,主动脉中eNOS蛋白表达也明显下降(P<0.05)。与HHcy组相比,M-干预组和H-干预组大鼠血清NO浓度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),而L-干预组则无明显变化(P>0.05);H-干预组主动脉血管内皮细胞eNOS表达明显高于HHcy组和L-干预组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比,HHcy组RhoA和ROCK2表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);与HHcy组比较,H-干预组RhoA和ROCK2表达明显降低(P<0.05),而L-干预组和M-干预组则无明显差异(P>0.05)。结论高剂量法舒地尔可能通过抑制Rho/Rho激酶信号通路,增加NO和eNOS的表达,发挥对大鼠血管内皮的保护作用。     

高压氧联合川芎嗪对重症急性胰腺炎模型大鼠的疗效及其作用机制

目的:探究高压氧(HBO)联合川芎嗪对重症急性胰腺炎(SAP)模型大鼠的治疗疗效及其作用机制。方法:75只SPF级健康大鼠造模完成后,按照数字表法随机分成3组:对照组、观察1组和观察2组,每组25只。对照组给予生理盐水腹腔注射,观察1组给予川芎嗪腹腔注射,观察2组在观察1组处理的基础上进行HBO治疗。每组各选取10只大鼠,记录24 h死亡率和平均生存时间;记录各时间点腹水量;采用酶联免疫吸附实验检测各组大鼠各时间点血清中炎性因子以及淀粉酶表达水平,硫代巴比妥酸法测定大鼠各时间点血浆中丙二醛(MDA)的含量。断头法处死大鼠后进行综合胰腺组织病理评分。结果:HBO处理后,观察1组(35.5%)和观察2组(20.0%)模型大鼠死亡率均明显低于对照组(55.0%),平均生存时间高于对照组;且观察2组大鼠死亡率低于观察1组,平均生存时间高于观察1组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01);观察1组和观察2组不同时间腹水量明显少于对照组,观察2组腹水量少于观察1组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。观察1组和观察2组模型大鼠血清淀粉酶IL-6、TNF-α、MDA水平明显低于对照组,IL-10高于对照组;且观察2组淀粉酶IL-6、TNF-α、MDA水平明显低于观察1组,IL-10高于观察组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。观察1组和观察2组不同时间模型大鼠胰腺组织病理评分明显低于对照组,观察2组评分低于观察1组,差异均有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。 结论:HBO联合川芎嗪可通过改善SAP大鼠氧化损伤,调节炎性因子分泌,抑制其病情进展。     

医源性因素早发性卵巢功能不全家兔模型建立

目的 通过比较不同剂量的环磷酰胺对新西兰白兔卵巢功能的影响,探究建立化疗损伤性早发性卵巢功能不全(POI)家兔模型的最佳给药方案。方法 将32只普通级雌性未交配新西兰白兔随机分入4组,每组各8只。A组为正常对照组;B组50 mg/kg腹腔注射环磷酰胺1 d, 8 mg/kg连续注射14 d; C组50 mg/kg连续腹腔注射环磷酰胺3 d; D组100 mg/kg连续腹腔注射环磷酰胺3 d。比较4组家兔的状态、体质量、卵巢长径及卵巢指数;检测4组家兔血清雌二醇和促卵泡生成素水平的变化;HE染色观察4组家兔的卵巢组织形态,统计各级卵泡数量和闭锁卵泡占比;检测4组家兔卵巢组织凋亡相关蛋白Bax和Bcl2蛋白的表达水平。结果 与A组比较,B、C、D组Bax蛋白表达上调(P<0.05),Bcl2蛋白表达下调(P<0.05)。B组原始和初级卵泡数量少于A组,闭锁卵泡数量多于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。经腹腔注射环磷酰胺造模3周后,C组和D组家兔体质量低于A组,卵巢长径短于A组,卵巢指数小于A组,雌二醇水平低于A组,促卵泡生成素水平高于A组,原始卵泡、初级卵泡、次级卵...     

海湾战争综合征模型大鼠海马VGF、BDNF及MAPK表达研究

目的探讨神经营养因子BDNF、神经肽VGF及MAPK/Erk信号传导通路表达情况与海湾战争综合征(GWS)发病机制的关系。方法将36只SD大鼠随机分为对照组、限制应激组及GWS模型组,采用Abdel-Rahman的方法建立GWS大鼠模型。分别在0、7、14、21、28 d测定大鼠体质量。实验28 d结束后,处死实验大鼠、取脑、分离海马。采用免疫组化染色、VGF/MAPK免疫荧光双标染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测VGF、BDNF、MAPK的表达情况。结果单因素方差分析3组大鼠体质量,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。GWS模型组大鼠体质量增长率明显低于对照组与限制应激组,差异有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区VGF、BDNF、MAPK免疫组化染色的平均光密度值,限制应激组、GWS模型组较对照组均降低,差异有统计学意义(P<0.05);GWS模型组较限制应激组均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,海马CA3区细胞内MAPK与VGF的表达部位相同、变化趋势一致,MAPK、VGF荧光的表达与CA1区免疫组化结果一致。Western blot结果显示,限制应激组、GWS模型组与对照组比较,海马VGF、BDNF和MAPK的积分光密度值降低,差异有统计学意义(P<0.05);GWS模型组与限制应激组比较,海马VGF、BDNF和MAPK的积分光密度值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GWS的发病机制与MAPK/ERK信号传导通路的抑制及VGF的表达减少相关。     

中药三子排痰汤联合氨溴索对哮喘大鼠气道黏液高分泌的影响

目的研究三子排痰汤联合氨溴索(Ambroxol)对哮喘大鼠气道黏液高分泌的影响作用。方法 40只SD大鼠按随机数字表法分为5组:空白组、哮喘组、三子排痰汤组(中药组)、氨溴索组(西药组)、三子排痰汤联合氨溴索组(中西结合组),每组8只。采用卵清白蛋白(OVA)复制大鼠哮喘模型,于实验第42、56d对大鼠进行形态学评分;采用苏木素-伊红(HE)染色观察气道炎症;免疫组化法检测肺组织黏蛋白(MUC5AC)表达;酶联免疫法(EILSA)测定血中白细胞介素13(IL-13)含量;过碘酸雪夫氏(PAS)染色法检测气道杯状细胞增生。结果所有药物干预组的形态学评分与气道炎症均较哮喘组明显减轻;哮喘组肺组织MUC5AC表达量高于空白组(0.530±0.035 vs 0.132±0.020,P<0.05),中西结合组、中药组、西药组MUC5AC表达量均低于哮喘组(P<0.05),且中西结合组与中药组、西药组的差异均有统计学意义(P<0.05);中西结合组、中药组和西药组血中IL-13含量均较哮喘组明显减少(42.41±3.15、46.31±3.07、43.05±2.70 vs 51.65±4.07,P<0.05),且中西结合组与中药组的差异有统计学意义(P<0.05),而与西药组差异无统计学意义;中西结合组和中药组、西药组气道杯状细胞增生面积均较哮喘组明显减少(41.21±2.88、48.10±3.44、51.06±3.51 vs 63.25±5.02,P<0.05),且中西结合组与中药组、西药组的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论三子排痰汤联合氨溴索能抑制哮喘大鼠气道黏液的过度分泌,其机制可能是通过调节IL-13和杯状细胞实现的,而且其疗效优于单纯的中药或西药治疗。     

不同药物对创伤后应激障碍大鼠血浆促肾上腺皮质激素和皮质醇的影响

目的探讨甘麦大枣汤、栀子豉汤、天麻素胶囊等药对创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(COR)水平的影响。方法 40只大鼠随机分空白组、模型组、甘麦大枣汤组、栀子豉汤组和天麻素组,每组各8只。建立PTSD大鼠模型(SPS模型)后,给予3种药物喂养大鼠14d,用放射免疫法测量各组大鼠血浆ACTH和COR含量。结果模型组与空白组比较,血浆ACTH、COR含量明显升高(P<0.01);栀子豉汤组、天麻素组、甘麦大枣汤组与模型组比较,血浆ACTH、COR含量明显降低(P<0.01或P<0.05),但各药物组之间ACTH、COR含量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论甘麦大枣汤、栀子豉汤、天麻素胶囊对创伤后应激障碍引起的大鼠内分泌功能紊乱具有调节作用。     

虎纹蜘蛛毒素-I对全脑缺血再灌注大鼠海马神经元Fas凋亡通路的抑制作用

目的:探讨虎纹蜘蛛毒素-I(HWTX-I)与由Fas分子启动的死亡信号转导通路之间的关系及可能的神经保护作用分子机制。方法:48只SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水组及用药组三组,每组16只,采用改良的Pulsinelli"四血管阻断法"并结合蛛网膜下腔置管术构建全脑缺血再灌注损伤大鼠模型。免疫组织化学法检测海马组织CA1区Fas、FasL、FADD蛋白水平表达,RT-PCR法检测海马组织死亡信号转导通路相关因子Fas、FasL、FADD核酸水平表达。结果:免疫组化法检测结果显示,生理盐水组、用药组Fas、FasL和FADD蛋白表达高于假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),用药组Fas、FasL和FADD蛋白表达低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);RT-PCR检测结果显示,假手术组Fas、FasL、FADDmRNA表达低于生理盐水组和用药组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),用药组Fas、FasL、FADDmRNA表达均低于生理盐水组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:HWTX-I蛛网膜下腔用药对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织具有一定的神经保护作用,其机制可能是通过抑制Fas分子启动的死亡信号转导通路激活而发挥作用。     

亚低温辅助治疗缺血性脑病分子机制研究

目的探讨亚低温辅助治疗缺血性脑病的分子机制。方法将24只雄性SD大鼠随机分为阴性对照组、假手术组、实验组和亚低温实验组,每组各6只。构建大鼠的缺血再灌注模型。检测各组大鼠脑组织内炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-8、IL-6]水平,人脑微血管内皮细胞(hCMEC/D3)、人外周血单核细胞系(THP-1)细胞中炎症因子转录水平,hCMEC/D3细胞凋亡率,核因子κβ(NF-κβ)、天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、Fas蛋白的表达水平。结果实验组、亚低温实验组处理6、24、48 h的TNF-α、IL-8、IL-6均高于阴性对照组,且实验组高于亚低温实验组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组与亚低温实验组处理4、8 h的hCMEC/D3细胞中TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-8 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组与亚低温实验组处理2、4、8 h的THP-1细胞中TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、IL-8 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。亚低温实验组处理1、4 h的hCMEC/D3细胞凋亡率分别为7.0%、17.0%,分别低于实验组的12.0%、28.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。亚低温实验组、实验组NF-κB、Caspase-3、Fas表达量均高于阴性对照组,且实验组高于亚低温实验组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温处理通过降低NF-κβ、Caspase-3和Fas的表达发挥对缺血性脑病的辅助治疗作用。     

多囊卵巢综合征模型大鼠血清生长素水平及卵巢组织生长素的表达及意义

目的研究大鼠血清生长素(ghrelin)与动情周期的关系,以及ghrelin在多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的卵巢及子宫内膜中的表达及意义。方法选择8周龄SD雌性大鼠44只,其中24只利用胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素造模,作为PCOS造模组,其余20只给予同等剂量的生理盐水作为对照组。利用免疫组化方法检测两组大鼠卵巢及子宫内膜上ghrelin的表达,酶联免疫法(ELISA)测定不同动情周期及禁食前后大鼠的血清ghrelin水平。结果 PCOS造模组大鼠在禁食前后血清ghrelin水平差异有统计学意义(P=0.004),对照组大鼠不同动情周期的血清ghrelin水平存在周期变化,但差异无统计学意义(P=0.084)。PCOS造模组大鼠的血清ghrelin水平较对照组降低,但差异无统计学意义(P=0.067)。对照组大鼠不同动情周期的卵巢组织颗粒细胞上均能见到ghrelin表达,在动情后期表达明显增加。与对照组不同动情周期比较,造模组ghrelin的表达明显减少(P=0.031)。两组大鼠子宫内膜上均未见到ghrelin表达。结论大鼠血清ghrelin水平可能随着动情周期变化而变化,以动情后期水平最高,ghrelin可能与卵巢黄体功能有关,而与子宫内膜功能无明显联系。     

Expression and significance of serum ghrelin level and ovarian tissue growth substance in a rat model of polycystic ovary syndrome

目的 研究大鼠血清生长素(ghrelin)与动情周期的关系,以及ghrelin在多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠的卵巢及子宫内膜中的表达及意义.方法 选择8周龄SD雌性大鼠44只,其中24只利用胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素造模,作为PCOS造模组,其余20只给予同等剂量的生理盐水作为对照组.利用免疫组化方法检测两组大鼠卵巢及子宫内膜上ghrelin的表达,酶联免疫法(ELISA)测定不同动情周期及禁食前后大鼠的血清ghrelin水平.结果 PCOS造模组大鼠在禁食前后血清ghrelin水平差异有统计学意义(P=0.004),对照组大鼠不同动情周期的血清ghrelin水平存在周期变化,但差异无统计学意义(P=0.084).PCOS造模组大鼠的血清ghrelin水平较对照组降低,但差异无统计学意义(P=0.067).对照组大鼠不同动情周期的卵巢组织颗粒细胞上均能见到ghrelin表达,在动情后期表达明显增加.与对照组不同动情周期比较,造模组ghrelin的表达明显减少(P=0.031).两组大鼠子宫内膜上均未见到ghrelin表达.结论 大鼠血清ghrelin水平可能随着动情周期变化而变化,以动情后期水平最高,ghrelin可能与卵巢黄体功能有关,而与子宫内膜功能无明显联系.     

脂肪间充质干细胞外泌体对脑创伤记忆障碍作用及机制研究

目的 探讨脂肪间充质干细胞外泌体对脑创伤记忆障碍的作用及机制。方法 采用差速离心法提取脂肪间充质干细胞外泌体。将24只SD大鼠随机分为对照组、脑创伤组、外泌体组,每组各8只。对照组大鼠不作处理,脑创伤组、外泌体组大鼠采用落体撞击法建立脑创伤模型,外泌体组在模型建立成功后静脉注射脂肪间充质干细胞外泌体300μg。7 d后,通过水迷宫评价大鼠记忆能力,通过湿干重、Tau和S100β蛋白评价脑组织损伤及修复情况。采用酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠脑组织TrkA和TrkB蛋白表达。结果 脑创伤组大鼠湿干比、Tau和S100β蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);外泌体组大鼠湿干比、Tau和S100β蛋白表达水平低于脑创伤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与脑创伤组比较,外泌体组大鼠第2～5天逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,目标象限时间延长,脑组织NGF、BDNF、TrkA和TrkB蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 脂肪间充质干细胞外泌体能够...     

高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的作用研究

目的探讨高压氧(HBO)治疗对急性一氧化碳(CO)中毒大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的作用。方法将36只大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、CO中毒组和HBO治疗组各12只。建立急性CO中毒大鼠模型,给予HBO治疗7 d后,采用转录组测序(RNA-seq)进行各组大鼠脑组织基因检测,采用实时定量PCR(RT-PCR)对RNA-seq检测的差异基因阿片黑素促皮质激素原(POMC)进行分析;采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(COR)的水平;采用免疫组化和免疫印迹法检测大鼠脑内POMC蛋白和ACTH蛋白受体(ACTHR)的表达。结果 RNA-seq和RT-PCR结果显示,CO中毒7 d后,大鼠下丘脑POMC基因表达显著升高(P<0.05),HBO处理使其表达降低(P<0.05)。与对照组相比,CO中毒组大鼠大脑皮层POMC表达升高(P<0.05), HBO治疗组较CO中毒组表达减少(P<0.05);CO中毒组大鼠大脑皮层ACTHR表达升高(P<0.05),但HBO治疗组与CO中毒组之间差异无统计学意义(P>0.05)。血清ACTH和COR水平检测结果显示,CO中毒组ACTH和COR显著增加(P<0.05),HBO治疗使其水平降低(P<0.05)。结论急性CO中毒可通过POMC-ACTH-COR途径激活HPA轴,HBO可能通过抑制HPA轴上相关基因、蛋白和激素水平的过度激活而发挥治疗作用。     

中药合剂清火败毒饮对烧伤SD大鼠小肠黏膜细胞凋亡的影响

目的探讨清火败毒饮(qinghuobaiduyin,QHBDY)对烧伤SD大鼠小肠黏膜细胞凋亡的影响。方法选择健康雄性SD大鼠45只,随机分为对照组、单纯烧伤组、烧伤后QHBDY治疗组,分别于烧伤后6 h、12 h、24 h、48h取SD大鼠小肠标本并检测分析各组小肠黏膜细胞凋亡情况和凋亡因子Caspase-3、Bcl-2的表达情况。结果单纯烧伤组SD大鼠烧伤后各时间点小肠黏膜细胞凋亡率均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);QHBDY治疗组SD大鼠除6h外其余各时间点小肠黏膜细胞凋亡率均低于单纯烧伤组相同时间点小肠黏膜细胞凋亡率,差异有统计学意义(P0.05)。单纯烧伤组SD大鼠烧伤后各时间点Caspase-3的表达均较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05);QHBDY治疗组SD大鼠除6h外其余各时间点Caspase-3的表达均低于单纯烧伤组相同时间点Caspase-3的表达,差异有统计学意义(P0.05)。单纯烧伤组SD大鼠烧伤后各时间点Bcl-2的表达均较对照组降低,差异有统计学意义(P0.05);QHBDY治疗组SD大鼠除6h外其余各时间点Bcl-2的表达均高于单纯烧伤组相同时间点Bcl-2的表达,差异有统计学意义(P0.05)。结论清火败毒饮对烧伤后SD大鼠小肠黏膜细胞凋亡具有抑制作用,这可能是通过增强Bcl-2的表达和降低Caspase-3的表达实现的。     

N-乙酰半胱氨酸对缺氧缺血性脑病新生鼠脑细胞凋亡的干预效果

 目的探讨新型抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对缺氧缺血性脑病(Hypoxic-ischemic en-cephalopathy,HIE)新生鼠脑细胞凋亡的干预效果.方法7日龄SD大鼠随机分为手术组、干预组和假手术组.干预组给予NAC 0.1 mg/(g·d),手术组给予等体积生理盐水,假手术组不做相应处理.分别于建模后3 d、7 d和21 d摘取脑组织,观察神经细胞凋亡情况(TUNEL法).结果干预组在3 d、7 d和21 d的脑细胞凋亡指数均低于手术组,差异具有统计学意义.结论NAC能在一定程度上减轻脑细胞凋亡,可以考虑将其应用于临床HIE的治疗.     

皮肤再生医疗技术对大鼠慢性难愈合创面组织中VEGFR-2表达的动态调控作用

目的动态观察皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed bum ointment,MEBT/MEBO)对大鼠慢性难愈合创面组织中VEGFR-2表达水平的影响,探讨MEBT/MEBO促进创面愈合的分子学机制。方法按照随机数表法将90只健康成年SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组(18只)、对照组(18只)、模型组(18只)、MEBO组(18只)和贝复济组(18只),其中空白组仅做备皮处理,对照组做全层皮肤缺损创面模型,模型组、MEBO组和贝复济组做慢性难愈合创面模型;模型建立后,空白组大鼠备皮后皮肤予以生理盐水纱布湿敷,对照组及模型组大鼠创面予以生理盐水纱布覆盖治疗,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment,MEBO)药纱覆盖治疗,贝复济组大鼠创面予以贝复济药纱覆盖治疗,并分别于治疗后第3、7、14天检测、对比各组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA的表达水平。结果创面处理后第3、7、14天,空白组大鼠皮肤组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平均无明显变化,P均0.05,差异无统计学意义;而对照组、模型组、MEBO组及贝复济组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平变化均较明显,P均0.05,差异具有统计学意义,其中对照组、MEBO组及贝复济组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白及VEGFR-2 mRNA表达水平均呈先升高后降低的趋势,而模型组则呈递增趋势。治疗第3、7、14天,MEBO组大鼠创面组织中VEGFR-2蛋白和VEGFR-2 mRNA表达水平均高于模型组,P均0.05.差异具有统计学意义。结论 MEBT/MEBO可通过上调创面组织中VEGFR-2的表达水平,促进创面愈合。     

血氧水平依赖成像联合DTI应用于早期糖尿病肾病糖肾方疗效评价的初步研究

目的:探讨血氧水平依赖成像(BOLD)联合DTI评价中药糖肾方治疗早期糖尿病肾病(DN)模型大鼠的可行性。方法:35只雄性SD大鼠随机选取5只作为空白组以普通饲料喂养10周;其余采用高糖高脂饲料喂养10周后,行腹腔注射1%链脲佐菌素溶液诱导糖尿病模型。造模成功的24只大鼠随机分为糖肾方组、模型组各12只,最终存活糖肾方组9只、模型组8只。糖肾方组采用糖肾方煎剂灌胃,空白组和模型组均采用等体积的蒸馏水灌胃,连续干预6周。测量不同时间点3组大鼠的体质量、空腹血糖、尿量、24 h尿蛋白定量。药物治疗6周后,对3组大鼠行常规MRI、BOLD、DTI扫描。MRI观察并测量肾皮质、髓质的横向弛豫率(R_2~*)值、ADC值、各向异性分数(FA)值,并取大鼠右肾行病理学检查。结果:干预第6周,糖肾方组和模型组较空白组体质量显著降低(均P0.05),空腹血糖显著升高(均P0.05);糖肾方组空腹血糖较模型组显著下降(P0.05),其他指标均有一定好转,但差异均无统计学意义(均P 0.05)。空白组肾组织无病理性损伤,糖肾方组、模型组肾组织病理改变处于DNⅠ～Ⅱ期。BOLD数据显示,模型组的髓质R_2~*值较空白组升高(P0.05)。DTI数据显示,3组大鼠的肾皮质FA值均低于髓质(均P0.05);模型组较空白组的皮质ADC值升高(P0.05);糖肾方组较模型组的肾髓质FA值有上升趋势,皮质ADC值有降低趋势,但差异均无统计学意义(均P 0.05)。结论:BOLD联合DTI应用于早期DN糖肾方疗效评价具有一定的可行性。     

MEBT/ MEBO对慢性难愈合创面 NF-κB p65、IκBα、IKK及其磷酸化蛋白表达水平的影响

【摘要】 目的 探讨创疡再生医疗技术 (MEBT/MEBO) 对慢性难愈合创面组织中核因子 κB (NF-κB) p65?NF-κB 抑制蛋白(IκB)、IκB激酶(IKK) 及其磷酸化蛋白表达水平的影响。 方法 选取 SPF 级雄性 Wistar 大鼠90 只适应性饲养1周后,按照随机数表法将其随机分为空白组、对照组、模型组、MEBO组和贝复新组,每组18 只。空白组大鼠仅做备皮处理,对照组大鼠建立急性创面模型,模型组、MEBO组、贝复新组大鼠建立慢性难愈合创面模型?空白组大鼠备皮处皮肤及对照组、模型组大鼠创面采用生理盐水纱布换药处理,MEBO 组大鼠创面采用湿润烧伤膏 (MEBO) 药纱换药处理,贝复新组大鼠创面采用重组牛碱性成纤维细胞生长因子换药处理,对比各组大鼠干预第3、7、14天创面愈合率、组织病理学变化,以及皮肤/ 创面组织中NF-κB p65、IκBα、IKK及 p-NF-κB p65、p-IκBα、p-IKK 蛋白表达水平。结果 (1)干预第 3、7 天,各组大鼠创面愈合率均无明显差异(P均＞0. 05);干预第 14 天,模型组大鼠创面愈合率明显低于对照组、MEBO组(P均＜0.05),其余各组间创面愈合率均无明显差异 (P均＞0.05)。(2)干预第 7 天,MEBO 组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量均明显增加,可见大量成纤维细胞和新生毛细血管及少量毛囊结构生成; 干预第14天,MEBO 组、贝复新组大鼠创面组织中胶原纤维量明显多于模型组,可见整齐排列的毛细血管及成熟的毛囊、皮脂腺等组织,而模型组大鼠创面组织中仍可见少量炎症细胞浸润,但已有大量成纤维细胞生成。(3) 干预第7、14天,空白组、对照组、MEBO组大鼠创面组织中 NF-κB p65、IKK、p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα 蛋白表达水平均明显低于模型组(P均＜0.05);干预第 7 天,MEBO 组大鼠创面组织中 NF-κB p65、IκBα 蛋白表达水平均明显高于贝复新组 (P均＜0.05),IKK、p-NF-κB p65、p-IKK、p-IκBα 蛋白表达水平均明显低于贝复新组 (P 均＜0.05); 干预第 14天,MEBO 组大鼠创面组织中 IKK、IκBα蛋白表达水平均明显低于贝复新组 (P 均＜0.05)。结论 MEBT/ MEBO促进慢性难愈合创面愈合的机制可能与创面组织中 NF-κB p65、IκBα、IKK 及其磷酸化蛋白的表达水平有关。