低强度810nm半导体激光照射对大鼠视神经损伤后视网膜脑源性神经营养因子的影响

目的观察低强度810 nm半导体激光照射对大鼠视神经钳夹伤后视神经再生的影响。方法健康成年Wistar大鼠44只,体重180～220 g,分成激光治疗组20只、单纯损伤组16只、正常对照组8只,每组按治疗时间又分成1、3、6和9周4个时间点。标准的视神经钳夹伤模型制备成功后,激光治疗组行激光照射,照射参数：光斑直径5 mm,照射功率60 mW,时间3 min,经皮至视神经损伤处,每日照射1次。单纯损伤组及正常对照组在进行激光照射时,激光器无功率输出。激光治疗1、3、6和9周后测量视网膜中脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的含量。结果激光治疗组大鼠视神经损伤后1周视网膜中的BDNFmRNA的含量达到最高,随后降低;治疗后1、3、6和9周与同一时间单纯损伤组视网膜中的BDNFmRNA表达相比有所提高（P〈0.05）。结论低强度810 nm半导体激光照射能促进视神经钳夹伤后视神经再生,增加视网膜中BDNF mRNA的表达。     

PirB蛋白在中枢神经损伤修复中的作用

中枢神经系统损伤后再生困难的一个重要原因是因为髓鞘中存在与其相关的神经生长抑制性因子,而Pir B蛋白是新发现的这些因子的共同受体。许多研究发现Pir B在中枢神经系统中广泛表达,并参与调控神经元发育、生长导向及可塑性等作用,阻抑Pir B功能后存在促进中枢神经系统神经再生修复的作用。深入了解Pir B的功能可能为神经再生带来新的希望。     

神经营养因子、周围神经及嗅鞘细胞与脊髓再生

神经营养因子是一类由神经元、神经胶质细胞及神经支配靶组织产生的神经营养多肽,是维持神经元生存、促进轴突生长的重要因素。周围神经移植可促进损伤神经元轴突再生,使其成为治疗脊髓损伤及促进脊髓再生研究的候选之一。嗅鞘细胞表现出类似于星形胶质细胞和雪旺细胞的双重特性,可分泌多种神经营养因子,具有促进脊髓损伤后的髓鞘重塑、轴突再生和功能恢复的潜在作用。     

神经生长因子与周围神经病变相关性研究进展

神经生长因子（nerve growth factor,NGF）是目前研究最为清楚的一种神经营养因子（NTFs）,具有营养、保护神经元及促进受损神经的再生和修复等多种生物学功能。研究表明NGF对周围神经系统的神经再生、生长发育、血管生成和轴突形成具有重要作用,提示NGF可应用于周围神经再生和修复。现将NGF对周围神经病变的作用机制和特点综述如下。     

脊髓损伤与基因治疗

随着分子生物学技术的日益成熟,不少学者在中枢神经系统（ＣＮＳ）损伤方面进行了潜心研究,并取得一定成绩,为脊髓损伤后神经再生寻找到新的途径。一、影响脊髓损伤后神经再生的因素成熟神经元再生轴突的能力依赖于以下几个因素：（１）再表达生长相关基因的能力;（２）再生轴突能攀附及伸展的有效基质分子;（３）促进及引导轴突再生的有效神经营养因子;（４）是否存在损害轴突延伸的伴髓生长抑制因子［１］。脊髓组织作为成熟的中枢神经系统,其神经元已失去分裂和再生新神经元的能力,其髓鞘由少突胶质细胞而不是雪旺细胞组成,成熟…     

低强度激光疗法作用机制的新进展

自1967年开始低强度激光疗法就被世人所知,并且作为一种有效的治疗手段广泛应用于神经科、牙科、眼科及再生医学等方面。本文整理、归纳了近年来有关低强度激光实验研究和临床应用的文献,对低强度激光疗法在治疗炎症、促进伤口愈合、组织再生及缓解肌肉疲劳等方面的细胞分子机制的新进展进行概述。结果发现低强度激光能通过调节细胞因子的分泌、基因的表达、蛋白质合成等达到治疗的目的。了解低强度激光疗法的细胞分子机制对临床应用低强度激光治疗疾病至关重要。     

神经营养因子与中枢神经系统再生研究

神经营养因子(NTFs)可以促进神经细胞的生存、生长与分化,并维持其功能的执行,对中枢神经系统(CNS)的再生修复起着重要作用。本文着重讨论NTFs对CNS损伤后的再生修复作用及对CNS退行性疾病的治疗作用。     

不同功率半导体激光照射与大鼠脊髓生长相关蛋白表达的关系

目的 研究不同功率半导体激光照射损伤的大鼠从骨神经后脊髓中生长相关蛋白（GAP－43）的表达与激光功率和照射时间的关系。方法 172只雄性SD大鼠制成从骨神经损伤模型,随机分为1个对照组和3个激光照射组,每组42只。分别以功率为5、10和15mW、波长810nm的半导体激光照射激光组大鼠神经损伤部位,第天1次,连续照射10天。照射后1、3、7、14、28、42和56天取恨鼠脊髓用于免疫组化方法观察脊髓内GAP－43表达的变化。结果 半导体激光照射后第7天内各激光照射组和对照组无明显差异。第14天和第28天时15mW激光照射组脊髓内GAP－43表达高于对照组。第56天时激光照射组较对照射组脊髓内GAP－43表达稍低,5mW和10mW激光照射组与对照组比较无明显差异。结论 15mW半导体激光照射可引起损伤神经后大鼠脊髓中GAP－43表达的变化,对神经再生过程有一定的影响,5mW和10mW半导体激光照射对损伤神经的鼠中GAP－43表达作用不明显。     

低强度激光促细胞增殖效应与丝裂原激活的蛋白激酶信号传导途径

人们在应用中发现低强度激光有种特殊的作用,即作用于生物体时不产生不可逆损伤,而直接由辐射产生刺激效应。如病灶直接照射和穴位照射,能产生消炎,镇痛,血管扩张,促进创伤愈合、毛发、神经及骨再生等作用;照射小鼠胸腺区和脾区可增强免疫细胞活性及促进免疫分子产生[1]。...     

低强度激光照射对大鼠骨髓间充质干细胞生物学性状影响的实验研究

目的 探讨低强度635 nm激光照射对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BM-SCs)增殖及分泌功能的影响.方法 体外培养的第2代SD大鼠BMSCs以InGaAsP半导体激光(635 nm,60 mw)不同能量密度(0,0.5,1.0,2.0和5.0 J/cm2)照射,24 h后酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中血管内皮生长因子(VEGF)及神经生长因子(NGF)含量;BrdU法绘制BMSCs增殖曲线.结果 低强度635 nm半导体激光照射能够促进体外培养的大鼠BMSCs的增殖,最佳能量密度为0.5 J/cm2;大鼠BMSCs能够在体外培养条件下分泌VEGF、NGF;5.0 J/cm2低强度半导体激光照射能够显著促进BMSCs分泌VEGF、NGF.结论 635 nm波长低强度半导体激光照射能够显著促进体外培养的大鼠BMSCs增殖及分泌功能,且与照射剂量有关.     

坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元内神经生长因子的时程变化

以坐骨神经损伤的豚鼠为动物模型，采用免疫细胞化学方法，研究脊髓前角运动细胞神经生长因子（Ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＮＧＦ）的变化。结果表明，ＮＧＦ－ｉｒ免疫阳性产物见于前角运动核背外侧群（ＤＬ）、腹外侧群（ＶＬ）、中间群（Ｃ）、后背外侧群（ＲＤＬ），损伤侧ＮＧＦ免疫反应染色明显深于对照侧，第４ｄ染色达到高峰。提示ＮＧＦ在坐骨神经损伤后，可能具有营养、保护及促进损伤神经再生作用     

肝细胞生长因子修复周围神经损伤研究

目的 探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对周围神经损伤修复的作用.方法 以Wistar大鼠坐骨神经挤挫伤为动物模型,神经损伤局部肌肉注射腺病毒介导的人肝细胞生长因子(Ad-HGF),与无注射HGF组对照,通过步态分析、肌肉湿重测定、计算机图像分析等指标评价神经损伤后再生效果.结果 术后4周,在坐骨神经指数、肌肉湿重恢复、计算机图像分析等再生指标的比较中,注射HGF组明显强于对照组(P<0.05).结论 HGF能促进大鼠坐骨神经损伤后的有髓纤维再生和功能恢复,是一种有效的治疗周围神经损伤的神经营养因子.     

视神经损伤治疗和不全损伤再生研究的回顾

临床的视神经损伤可发生在从球后到颅内的各段。造成严重损伤必须具备足够的致伤力度。伤后无光感的预后差。视神经管减压手术效果不肯定。大剂量皮质类固醇治疗可能有帮助。视神经不完全损伤模型研究提示,视神经再生能力与损伤程度密切相关。不全损伤与完全损伤对于损伤的纤维其再生环境是不同的。在不全损伤时,不可逆损伤纤维可能有更强的再生能力。     

视神经损伤后修复再生的GAP-43原位杂交和免疫细胞化学动态研究

目的研究和探讨视神经损伤后的自然修复再生和脑源性神经营养因子及睫状神经营养因子互补辅助再生的GAP-43mRNA原位杂交组织化学和分子神经生物学变化特征，寻找视神经有效再生的新途径。方法用猫作为实验对象，术前动物被分为四组：①正常对照组；②单纯球后视神经1／2截断组；③视神经1／2截断并定时玻璃体内注射生理盐水对照组；④视神经1／2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合因子辅助再生组。动物模型制做为以眶外侧入路方法手术开眶，暴露眼球后视神经，在眼球后5mm处准确行视神经的1／2截断术。术后四组动物共同在正常视环境中饲养4～8个月，视神经1／2截断并玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子辅助再生组，在术后即日注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液（10ng），并在以后每周注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液2次。在视神经损伤后第4个月和第8个月后将动物处死行外侧膝状体的GAP43免疫细胞化学和原位杂交组织化学检测。结果在视神经损伤4个月时，四组的外侧膝状体的损伤眼相应输入层GAP43免疫阳性神经元的细胞数密度和积分光密度比较为：正常对照组与视神经1／2截断组和视神经1／2截断并定时玻璃体内注射生理盐水对照组比较都有显著差异性（P均〈0．001），而与视神经1／2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合因子辅助再生组比较有显著差异性（P〈0．01）；视神经1／2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合因子辅助再生组与视神经1／2截断并定时玻璃体内注射生理盐水对照组和视神经1／2截断组比较都有显著差异性（P均〈0．001），在视神经损伤8个月时，四组的外侧膝状体的损伤眼相应输入层GAP43免疫阳性神经元的细胞数密度和积分光密度比较为：正常对照组与视神经1／2截断组和视神经1／2截断并定时玻璃体内注射生理盐水比较都有显著差异性（P均〈0．001），而视神经1／2截断并定时玻璃体内注射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子复合液组比较也有差异（P〈0．05）；视神经1／2截断并定时玻璃体内沣射脑源性神经营养因子和睫状神经营养因予复合液组与视神经1／2截断并定时玻璃体内注射生理盐水组和视神经1／2截断组比较都有显著差异性（P均〈0．01）。损伤第4个月和第8个月时外侧膝状体的损伤眼相应输入层的GAP43 mRNA原位杂交阳性信号积分光密度和数密度经计算机图像分析及统计学处理发现原位杂交组织化学图像分析结果与免疫细胞化学图象分析结果相一致。结论①视神经1／2损伤后可以施加条件因素辅助再生，脑源性神经营养因子和睫状神经营养因子对促进视神经损伤后的再生有调节局部微环境和互补促生长作用；②原位杂交组织化学实验观察也证实了视神经1／2损伤后的复合神经营养因子辅助视神经再生具有显著的拮抗损伤效应。     

缝线黏附重组pcDNA3-GDNF-GFP质粒在周围神经损伤中的实验研究

目的 研究周围神经损伤后新的修复方法,了解携带含胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因重组质粒的缝合线对损伤的周围神经修复的影响.方法 使用prolene线浸泡于0.1%的左旋多聚赖氨酸和质粒等体积液并冻干,反复3次后使缝线黏附上质粒DNA.50只雌性Wistar大鼠制成右侧坐骨神经缺损动物模型,随机分为实验组和对照组,每组各25只.实验组使用黏附pcDNA3-GDNF-GFP的缝线,对照组使用黏附pcDNA3的缝线进行坐骨神经的缝合修复.术后1 w、8 w使用激光共聚焦显微镜检测GDNF在神经修复处的表达,于坐骨神经吻合处取材行免疫组化检测;手术后12 w行右侧坐骨神经电生理检查.结果 携带pcDNA3-GDNF-GFP重组质粒的缝线修复周围神经时,该质粒可以转染周围神经并得到表达.实验组神经的传导速度、动作电位的峰值及潜伏期分别是（19.82±1.90）m/s、（3.47±0.32）mV、（0.36±0.03）ms,明显优于对照组.结论 使用携pcDNA3-GDNF-GFP重组质粒的缝线修复损伤的周围神经,可以促进损伤神经的再生.     

Characteristics of cytokines in the sciatic nerve stumps and DRG after rat sciatic nerve crush injury

Background:Cytokines are essential cellular modulators of various physiological and pathological activities,including peripheral nerve repair and regeneration.However,the molecular changes of these cellular mediators after peripheral nerve injury are still unclear.This study aimed to identify cytokines critical for the regenerative process of injured peripheral nerves.Methods:The sequencing data of the injured nerve stumps and the dorsal root ganglia (DRG) of Sprague-Dawley (SD)rats subjected to sciatic nerve (SN) crush injury were analyzed to determine the expression patterns of genes coding for cytokines.PCR was used to validate the accuracy of the sequencing data.Results:A total of 46,52,and 54 upstream cytokines were differentially expressed in the SN at 1 day,4 days,and 7 days after nerve injury.A total of 25,28,and 34 upstream cytokines were differentially expressed in the DRG at these time points.The expression patterns of some essential upstream cytokines are displayed in a heatmap and were validated by PCR.Bioinformatic analysis of these differentially expressed upstream cytokines after nerve injury demonstrated that inflammatory and immune responses were significantly involved.Conclusions:In summary,these findings provide an overview of the dynamic changes in cytokines in the SN and DRG at different time points after nerve crush injury in rats,elucidate the biological processes of differentially expressed cytokines,especially the important roles in inflammatory and immune responses after peripheral nerve injury,and thus might contribute to the identification of potential treatments for peripheral nerve repair and regeneration.     

大鼠坐骨神经损伤后神经再生的形态学观察

目的 研究周围神经损伤后的再生情况。方法 切断并原位吻合右侧SD大鼠坐骨神经。左侧不作任何处理、作为对照。手术后不同时间取跨越吻合口两侧的神经段作纵向冰冻切片,行乙酰胆碱酯酶(AChE)组织化学染色,观察神经纤维的变化。同时取左侧一段神经作对照染色。结果 右侧坐骨神经损伤后。术后第1天至第7天无神经纤维通过吻合口。且神经纤维排列杂乱;第14天只有小部分神经纤维通过吻合口;第21天有部分神经纤维通过吻口;第30天有较多神经纤维通过吻合口;第45天有大量神经纤维通过吻合口。但排列不整齐;第60天吻合口神经纤维排列整齐。而左侧的神经纤维排列整齐、均匀。结论 大鼠坐骨神经切断损伤后,神经纤维先发生溃变,1个月后有大量神经能够再生,至2个月,再生神经纤维的排列近似正常。     

正确认识周围神经断裂伤的修复方法

周围神经缺损的修复方法,目前仍以自体神经移植术较为常用。由于来源受限,供区受损,供求神经难以匹配,轴突再生需要跨越两个吻合口,从而影响疗效,因而需要开发其它途径。通过大量的实验研究和临床尝试,诸多学者推出了许多新的修复方法。本文只选其7种,即受损神经自身延长端端缝合、神经端侧缝合、神经侧侧缝合、神经断端肌肉内埋入、骨骼肌桥架移植、去细胞异体神经移植和组织工程化人工神经等。笔者针对每种方法的设计机制以及存在的问题和对临床疗效的影响等方面进行讨论,目的是以求提高对各种方法的认识,使其在临床中得到正确选用。只有严格掌握适应证,才能提高临床疗效。     

电磁场促进周围神经再生的组织学观察

目的:探讨电磁场对周围神经再生的作用。方法:以60只Wistar大白鼠左侧坐骨神经重度钳夹伤为模型,术后随机将大鼠均分为治疗组和对照组,治疗组给予锯齿波形电磁场治疗。术后不同时期对大鼠坐骨神经进行组织学检查。结果:电磁场治疗能促进周围神经损伤后的轴索和髓鞘再生。结论:电磁场治疗对周围神经再生确有促进作用;它可能是通过对周围神经再生过程中多环节的调控和促进,通过多种协同机制,促进周围神经再生和功能恢复的。