湿润烧伤膏对糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平的影响

【摘要】目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病足创面组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平的影响。方法选取2020年5月至2022年5月郑州大学附属郑州中心医院收治的55例糖尿病足患者作为研究对象,按照不同治疗方法将其分为MEBO组(35例)和VSD组(20例),MEBO组患者局部创面采用MEBO治疗,VSD组患者局部创面采用负压封闭引流(VSD)治疗,对比观察两组患者创面面积,创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平及临床疗效。结果治疗第7、21天,MEBO组患者创面面积均明显小于VSD组(t=2.719、5.268,P=0.009、P<0.001),创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平均明显低于VSD组(MMP-2:t=2.138、2.202,P=0.037、0.032;MMP-9:t=2.129、2.476,P=0.038、0.017;Bax:t=3.623、3.038,P=0.001、0.004),Bcl-2水平均明显高于VSD组(t=2.040、3.054,P=0.046、0.004);治疗21d后,MEBO组患者中显效23例、有效10例、无效2例,明显优于VSD组患者的显效8例、有效7例、无效5例(Z=-2.126,P=0.033)。结论MEBO可通过降低糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平以及提高Bcl-2水平促进创面愈合。     

雾化吸入布地奈德对肺纤维化大鼠肺组织MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的探讨布地奈德雾化吸入对博莱霉素（BLM）致肺纤维化大鼠肺组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达的影响。方法Wistar大鼠45只,随机分成博莱霉素模型组（BLM组）、生理盐水空白对照组（NS组）和布地奈德干预组（Bud组）各15只,BLM组和Bud组气管内灌注博莱霉素诱导肺纤维化,NS组在相同条件下灌注生理盐水。气管内灌注药物后,第0~6天Bud组给予布地奈德雾化吸入,其余组在相同条件下给予生理盐水雾化吸入。各组分别于第7、142、8天随机处死5只,收集肺组织作切片、行HE及Masson染色,判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;行免疫组化染色,检测MMP-2和TIMP-2在肺组织的表达水平。结果与NS组相比,Bud组第7、14、28天肺组织的肺泡炎和肺纤维化程度明显加重（P〈0.5）;与BLM组相比,Bud组第7、14天肺组织的肺泡炎程度明显减轻（P〈0.05）,第7、14、28天肺纤维化程度明显减轻（P〈0.05）;与NS组相比,BLM组第7、14、28天MMP-2和TIMP-2表达明显增加（P〈0.5）;与BLM组相比,Bud组第7、142、8天MMP-2和TIMP-2表达明显降低（P〈0.05）。结论布地奈德雾化吸入可减轻BLM致肺纤维化大鼠的肺泡炎和肺纤维化程度,其干预机制可能为降低肺组织内MMP-2及TIMP-2的表达,并在一定程度上调整MMP-2/TIMP2的比值。     

Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9、TIMP-1与炎症评分的相关性研究

【摘要】目的 研究分析幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染性胃溃疡患者血清基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)与炎症评分的相关性。方法 选取2017年9月至2019年9月新乡医学院第三附属医院收治的125例胃溃疡患者作为研究对象,收集患者性别、年龄、Hp感染情况、胃镜及病理组织学检查结果、炎症评分以及血清MMP-9、TIMP-1水平等病历资料,根据Hp感染情况,将83例Hp感染性胃溃疡患者设为Hp感染组,42例非Hp感染性胃溃疡患者设为非Hp感染组,对比两组患者血清MMP-9、TIMP-1水平及炎症评分,分析Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9、TIMP-1与炎症评分的相关性。结果 Hp感染组患者血清MMP-9、TIMP-1水平及炎症评分均明显高于非Hp感染组（t=6.440、6.941、4.417,P均=0.000）;Pearson相关性分析结果显示,Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9、TIMP-1水平与炎症评分呈正相关性（r=0.712、0.703,P均=0.000）。结论 Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9、TIMP-1水平及炎症评分均明显高于非Hp感染性胃溃疡患者,Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9、TIMP-1水平与炎症评分呈正相关性,以MMP-9、TIMP-1为作用靶点防控Hp感染性胃溃疡具有较高的研究价值。     

MMP-12和TIMP-1在大鼠COPD模型肺组织表达及糖皮质激素对其表达的影响

目的观察基质金属蛋白酶及其抑制因子在大鼠COPD模型肺组织中的表达以及糖皮质激素对其的影响。方法Wistar大鼠24只随机分为对照组、模型组和布地奈德组。气道内注入LPS结合烟熏的方法建立COPD模型。以支气管肺泡灌洗液内白细胞分类计数和HE切片来评价COPD大鼠模型炎症和肺气肿程度。免疫组化方法检测MMP-12、TIMP-1的表达情况。结果模型组大鼠肺组织内MMP-12、TIMP-1表达及MMP-12/TIMP-1值均明显高于健康对照组沪均〈0．05）。布地奈德组与模型组之间MMP-12、TIMP-1表达及其比值均无明显差异俨均〉0．05）。结论大鼠COPD模型肺组织中MMP-12及TIMP-1表达升高，并且呈现出蛋白酶优势的状态，而糖皮质激素不能调节MMP-12及TIMP-1的表达。     

埃索美拉唑四联疗法对Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9及TIMP-1的影响

目的 对比观察埃索美拉唑四联疗法与三联疗法对幽门螺杆菌（Hp）感染性胃溃疡患者血清MMP-9及TIMP-1水平的影响。方法 选取2017年9月至2019年9月新乡医学院第三附属医院收治的97例Hp感染性胃溃疡患者作为研究对象,并按照随机数表法将其随机分为研究组（49例）与对照组（48例）,其中研究组患者采用埃索美拉唑镁肠溶片、阿莫西林克拉维酸钾片、克拉霉素片、双歧杆菌四联活菌片四联疗法治疗,对照组患者采用埃索美拉唑镁肠溶片、阿莫西林克拉维酸钾片、克拉霉素片三联疗法治疗,对比两组患者治疗前及治疗第7、14天的血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）水平以及治疗4周后的临床疗效。结果 治疗第7、14天,研究组患者血清MMP-9、TIMP-1水平均明显低于对照组（MMP-9：t=2.192、5.661,P=0.031、＜0.001;TIMP-1：t=3.749、4.331,P均＜0.001）;治疗4周后,研究组患者治疗总有效率为93.88%,明显高于对照组患者的治疗总有效率81.25%（Z=-2.497,P=0.013）。结论 与埃索美拉唑三联疗法相比,埃索美拉唑四联疗法能够更有效根除Hp,促进Hp感染性胃溃疡愈合,且降低Hp感染性胃溃疡患者血清MMP-9和TIMP-1水平可能是其作用机制,值得临床进一步研究证实。     

犬快速肺静脉起搏心房颤动模型中基质金属蛋白酶在肺静脉肌袖表达的实验研究

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和组织型基质金属蛋白酶抑止因子-1（TIMP-1）在持续性房颤发生和维持中的作用。方法：30只犬随机分为对照组和房颤组，建立犬快速肺静脉起搏持续性心房颤动模型。取组织标本，用RT—PCR和Western印记法分别检测各组MMP-9和TLMP-1mRNA和蛋白的表达情况。结果：与对照组相比，房颤组肺静脉肌袖组织MMP-9mRNA与蛋白质水平均增高（P均〈O．05），TIMP-1mRNA与蛋白质表达水平均降低（P均〈O．05）。结论：MMP-9／TIMP-1平衡失调可能是房颤时肺静脉肌袖细胞外基质重构的因素之一，参与了房颤的发生和维持。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1与子宫内膜异位症的相关性研究

目的研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制物-1（TIMP-1）是否与子宫内膜异位症（EMs）有关。方法将11例EMs轻度和32例重度患者分别作为观察组1和2,41例卵巢畸胎瘤患者作为对照组。通过ELISA法测定腹水中MMP-9及TIMP-1值,比较各组两者及其比值的差异。结果与对照组比较,EMs轻度组MMP-9、TIMP-1差异无统计学意义（P〉0.05）,EMs重度组MMP-9、TIMP-1差异有统计学意义（P〈0.05）;3组的MMP-9/TIMP-1差异均有统计学意义（P〈0.05）;EMs轻度组与重度组相比较,MMP-9差异有统计学意义（P〈0.05）,TIMP-1差异无统计学意义（P〉0.05）。结论随着疾病的加重,MMP-9升高、TIMP-1降低、MMP-9/TIMP-1比值升高,MMP-9、TIMP-1与子宫内膜异位症发生、发展有相关性,特别是两者的比值,具有重要诊断价值。     

缬沙坦对稳定型心绞痛伴高血压患者血清MMP-1、MMP-9及TIMP-1水平的影响

目的 探讨稳定型心绞痛（SAP）伴高血压患者经缬沙坦治疗前后血清明胶酶（MMP-1，MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）水平，明确SAP伴高血压患者动脉粥样硬化斑块的稳定性。方法 选择SAP惠者30例，SAP伴高血压I级患者66例，30例健康人作为对照。随机将SAP伴高血压患者分成缬沙坦治疗组（36例）及常规治疗组（30例），比较各组患者血清MMP-1、MMP-9和TIMP-1水平变化。结果SAP伴高血压、SAP、健康对照组三组之间MMP-1、MMP-9和TIMP-1水平比较，差异有统计学意义，缬沙坦治疗组与常规治疗组治疗后血清MMP-1、MMP-9和TIMP-1水平相比，差异有统计学意义。结论 SAP伴高血压患者血清MMP-1、MMP-9增高及TIMP-1降低可能导致粥样斑块破裂不稳定，缬沙坦可降低该类患者血清MMP-1、MMP-9水平，升高TIMP-1水平，从而起到稳定斑块的作用。     

MEBT/MEBO对大鼠糖尿病溃疡创面组织中血管新生的影响研究

【摘要】 　目的 研究探讨创疡再生医疗技术(MEBT/MEBO)对大鼠糖尿病溃疡创面组织中血管新生的影响。方法 选取SPF级雄性SD大鼠60只适应性饲养1周后,按照随机数表法将其随机分为模型对照组、MEBO组和VSD组,每组20只,建立糖尿病溃疡模型,模型对照组大鼠创面予以凡士林油纱换药处理,MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(MEBO)换药处理,VSD 组大鼠创面予以负压封闭引流(VSD)处理,对比各组大鼠创面愈合率及创面组织中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达水平。结果 (1)干预第3、7、10、14天,模型对照组大鼠创面愈合率均明显低于MEBO组与VSD组（P均＜0.05）; 干预第14天,MEBO组大鼠创面愈合率明显高于VSD组（P＜0.05）,其余各时间点 MEBO 组与 VSD 组间无明显差异（P均＞0.05）。 (2)干预第7、14天,模型对照组大鼠创面组织中MVD均明显低于MEBO组与VSD组（P均＜0.05）,且VSD组大鼠创面组织中MVD又明显低于MEBO组（P均＜0.05）。干预第7天,模型对照组大鼠创面组织中可见极少量散在分布的棕黄色颗粒,而MEBO组与 VSD 组大鼠创面组织中均可见较多密集分布的棕黄色颗粒;干预第14天,模型对照组、MEBO 组、VSD 组大鼠创面组织中均可见大量密集分布的棕黄色颗粒,且MEBO组与VSD组棕黄色颗粒量明显多于模型对照组。 (3)干预第7、14天,模型对照组大鼠创面组织中 VEGF mRNA表达水平均明显低于MEBO组与VSD 组（P均＜0.05）,且 VSD 组大鼠创面组织中 VEGF mRNA表达水平又明显低于MEBO组（P均＜0.05）。结论 MEBT/MEBO可通过提高VEGF mRNA的表达水平促进血管生成,进而促进糖尿病溃疡创面愈合,效果明显优于凡士林油纱与 VSD。     

川崎病患儿血清MMP-9与TIMP-1变化及其意义

目的:研究川崎病(KD)患儿血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其特异性组织抑制剂-1(TIMP-1)质量浓度的变化在预测发生冠状动脉病变(CAL)风险中的临床意义。方法:观察组为住院的KD患儿23例,静脉注射丙种球蛋白(IVIG)前后各抽取患儿外周静脉血1次,同时抽取20名正常体检儿童(正常对照组)外周静脉血。ELISA双抗体法测定血清MMP-9与TIMP-1质量浓度,用二维超声心动图观察心脏冠状动脉病变。结果:观察组患儿急性期血清MMP-9与TIMP-1质量浓度及MMP-9/TIMP-1比值均较正常对照组儿童显著增高(P<0.01);IVIG干预前CAL组患儿血清MMP-9质量浓度及血清MMP-9/TIMP-1显著地高于非CAL组患儿(P<0.01);IVIG干预后观察组患儿血清MMP-9质量浓度与MMP-9/TIMP-1显著降低(P<0.01);IVIG干预后CAL组患儿血清MMP-9质量浓度及血清MMP-9/TIMP-1仍显著高于非CAL组患儿(P<0.05)。结论:动态监测血清MMP-9与TIMP-1质量浓度和(或)MMP-9/TIMP-1比值对预测KD并发CAL具有重要临床意义。     

化疗栓塞对肝细胞癌MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的 探讨MMP-2、TIMP-2在肝细胞癌(HCC)中表达的意义及化疗栓塞对其表达的影响.方法 47例经手术病理证实的原发性肝细胞痛,其中25例单纯手术切除,22例经导管动脉化疗栓塞(TACE)后行Ⅱ期切除,用免疫组化方法检测两组标本MMP-2、TIMP-2蛋白表达.结果 有、无转移或完整包膜的肝细胞癌MMP-2表达差异有统计学意义(χ2=6.518、6.038,P<0.05);与单纯手术组相比,TACE组肝细胞癌MMP-2表达明显降低(χ2=4.854,P<0.05)、TIMP-2表达明显增高(χ2=5.144,P<0.05);MMP-2与TIMP-2表达存在显著负相关(r=-0.392,P<0.05).结论 MMP-2、TIMP-2与HCC的侵袭转移潜能相关,化疗栓塞有助于抑制HCC侵袭与转移潜能.     

IgA肾病肾血管纤溶酶原激活物抑制物-1和基质金属蛋白酶-9的表达及其意义

为探讨免疫球蛋白A肾病(IgA肾病)患者肾血管壁纤溶酶原激活物抑制物1(PAI1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)和α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达及意义,采用免疫组织化学技术检测38例IgA肾病肾组织血管壁的PAI1、MMP9、αSMA和TIMP1的蛋白表达。结果显示,αSMA主要表达于平滑肌细胞;PAI1表达与αSMA类似;MMP9在平滑肌细胞和内皮细胞均表达;TIMP1仅在血管壁内膜的内皮细胞微弱表达。在IgA肾病LeeⅣ～Ⅴ级组,肾血管壁的PAI1、MMP9和αSMA表达显著高于LeeⅠ～Ⅲ级组(P<001)。直线相关分析显示,肾血管的PAI1、MMP9和αSMA表达与肾小管间质的纤维化和炎细胞浸润呈正相关(P<001)。提示PAI1可能参与介导了IgA肾病肾血管壁细胞外基质的积聚过程,MMP9则可能促进血管的平滑肌细胞迁移和内膜增生。     

MMP-3、MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病中的表达及其意义

 目的 研究MMP-3、MMP-9、TIMP-1在子宫腺肌病中的表达,探讨子宫腺肌病的发病机制.方法 采用二步法免疫组化的方法检测子宫肌腺病45例在位内膜(A组)、36例异位内膜(B组)和28例对照组内膜中的MMP-3、MMP-9、TIMP-1含量.结果 MMP- 9在研究组A、研究组B中的表达强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-3在研究组A、研究组B中的表达强于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TIMP-1在对照组中的阳性表达弱于研究组A,差异有统计学意义(P<0.05),研究组A强于研究组B的阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 子宫腺肌病的发病可能与MMP-3、MMP-9、TIMP-1的异常表达有关.     

长期耐力运动对大鼠右心室MMP-2和TIMP-2的影响

目的:通过建立长期大强度运动模型,研究长期不同强度耐力运动对大鼠右心室心功能和羟脯氨酸的含量影响以及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和金属蛋白酶抑制剂2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)的调节作用,为运动性心肌纤维化和心律失常的发生机制提供实验依据。方法:24只健康成年雄性SD大鼠随机分为安静对照组、中强度运动组和大强度运动组,每组8只。中强度组和大强度组进行16周的运动,每周训练5天,休息2天,每次1 h。16周后采用小动物超声心动仪检测大鼠右心室心功能。随后,立刻麻醉处死大鼠,摘取心脏,分离出右心室。采用样本碱水解法检测羟脯氨酸的含量;荧光定量PCR检测MMP-2和TIMP-2 m RNA的相对表达。Western Blot检测MMP-2和TIMP-2蛋白的表达。结果:(1)与安静组相比,中强度组右室射血分数(RVEF)和右室缩短分数(RVFS)增加,但无显著性差异。大强度组RVEF显著低于安静组和中强度组(P<0.05),大强度组RVFS均低于安静组和中强度组,但无显著性差异。(2)中强度组羟脯氨酸的含量高于安静对照组,但无显著性差异;而大强度组羟脯氨酸的含量显著高于安静组和中强度组(P<0.01)。(3)与安静组相比,中强度组MMP-2 m RNA和蛋白的表达具有增加趋势,但无显著性差异。大强度组MMP-2 m RNA的表达显著高于安静组(P<0.05),大强度组MMP-2蛋白的表达显著高于安静组和中强度组(P<0.01);与安静组比较,中强度组和大强度组TIMP-2 m RNA的表达均无显著性差异;通过计算发现,三组间MMP-2/TIMP-2m RNA的比值无明显差异,大强度组MMP-2/TIMP-2蛋白的比值显著高于安静组和中强度组(P<0.01)。结论:长期大强度运动造成大鼠右心室羟脯氨酸含量显著增加,心肌MMP-2的表达增加,MMP-2/TIMP-2比例失调可能是右心室心功能异常和运动性心肌纤维化的发生机制之一。     

金属蛋白酶组织抑制因子-2在大鼠肝组织中的定位及表达

用人血白蛋白攻击的方法制备实验性免疫性肝纤维化大鼠模型，以正常大鼠为对照。采用免疫化法及原位杂交技术分别检测肝脏中金属酶组织抑制因子－2在正常及实验性免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的定位及表达状态。结果为实验组肝脏中TIMP－2mRNA和相关抗原表达在肌纤维细胞、成纤维细胞，以汇管区及纤维间隔中最明显，阳性信号位于细胞胞浆中，未见细胞核表达。提示在肝纤维化中，成纤维细胞及肌成纤维细胞是TIMP－2表达的主要细胞，并随着病损肝脏中肝纤维化程度的加重，TIMP－2基因和蛋白表达水平随之增高。     

胸腺瘤MSCT征象与PCNA及MMP-2表达的相关性

目的:探讨胸腺瘤MSCT征象与增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)在胸腺瘤组织中表达的相关性。方法:对46例胸腺瘤患者行MSCT平扫,其中21例行增强扫描,所有胸腺瘤标本行免疫组化SP法染色,分析MSCT征象与PCNA、MMP-2表达水平的相关性。结果:胸腺瘤CT征象中的病灶直径大于10cm,分叶征,病灶边缘不光滑,纵膈脂肪线消失,胸膜、心包及大血管侵犯,纵隔淋巴结、远处转移及病灶高强化程度与胸腺瘤组织PCNA及MMP-2的高表达具有显著相关性(P<0.05)。结论:MSCT征象能在一定程度上反映胸腺瘤的病理学特点,有利于术前无创地评估肿瘤生物学行为。     

阿托伐他汀对心脏成纤维细胞MMP-9/TIMP-1表达的影响

目的：观察阿托伐他汀（atorvastatin）对心脏成纤维细胞基质金属蛋白酶-9/组织型基质金属蛋白酶抑制因子-1（MMP-9/TIMP-1）表达的影响。方法：体外培养乳鼠心脏成纤维细胞（CF）,做细胞形态观察和心脏成纤维细胞标志性波形蛋白免疫荧光组化检测,明胶酶谱法测定MMP-9的活性,RT-PCR检测MMP-9和TIMP-1mRNA的表达。结果：AngⅡ增加MMP-9的活性及mRNA的表达（P〈0.05）,同时TIMP-1的mRNA表达减少（P〈0.05）,阿托伐他汀在某种程度上可逆转上述变化（P〈0.05）。结论：Aorvastatin通过对MMP-9/TIMP-1表达的影响作为预防和治疗房颤的重要机制之一。     

MMP-2-PEX原核表达纯化及其对黑色素瘤细胞与内皮细胞黏附的影响

目的探讨原核表达的人源基质金属蛋白酶2的C端结构域（MMP-2-PEX）对黑色素瘤细胞A375与内皮细胞黏附的影响。方法利用RT-PCR方法从人成纤维肉瘤细胞HT1080中克隆MMP-2 C端结构域,构建原核表达载体pET-His-PEX;转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达;盐酸胍裂解包涵体,经镍琼脂糖凝胶柱纯化,透析复性后获得MMP-2-PEX蛋白,随后对其进行Western印迹和质谱鉴定。采用明胶酶谱法检测MMP-2-PEX的活性;采用平行板流动小室系统检测在流动状态下MMP-2-PEX对A375细胞与脐静脉内皮细胞HUVEC黏附的影响,通过小鼠实验性肺转移模型检测MMP-2-PEX对A375细胞在小鼠肺内癌栓形成的影响。结果 Western印迹和质谱鉴定原核表达的MMP-2-PEX蛋白正确,明胶酶谱检测MMP-2-PEX能够明显抑制MMP-2的活性。表达的MMP-2-PEX蛋白能够在流动状态下抑制A375细胞与HUVEC细胞的黏附,其黏附抑制率与MMP-2-PEX蛋白浓度增加成正相关,MMP-2-PEX浓度为12.5,25和50μg/ml时抑制率分别为32.5%,41.4%和53.9%。用MMP-2-PEX处理后,A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成与对照组相比降低了26.4%。结论原核表达的人MMP-2-PEX在体外流动状态下可抑制A375细胞与内皮细胞的黏附,并抑制A375细胞在小鼠肺内癌栓的形成。